双壳软体贝类组织中麻痹贝类毒素检测方案(柱后衍生装置)

METHODABSTRACT/105.3CATALYST FOR SUCCESS www.tegent.com.cninfo@tegent.com.cn客服热线 400-006-9696 Tegent 德祥 双壳软体动物中麻痹贝类毒素的分析 -----高效液相色谱柱后衍生法(荧光检测) 甲壳类水生动物毒素是一组由腰鞭毛虫所产生的18种次级代谢产物，，它们多寄存在双壳软体动物中。腰鞭毛虫的繁盛是季节性的，多出现在温暖的月份。因为传染往往是不可预测的，所以甲壳类水生动物应定期地进行监测。吃了被感染的动物往往会导致麻痹性或瘫痪性的中毒，直接威胁生命。 用小鼠实验来检测鞭毛虫导致的神经毒素的方法有很大的缺陷，进而探索出液相色谱的分析方法。近来液相色谱柱后氧化衍生在在性条件下检测此毒素的方法被批准成为 AOAC 新的官方方法-OMA2011.02。三组毒素在梯度条件下由 C18柱分离，生成的衍生产物很容易被荧光检测器检测到。Pickering 的柱后衍生检测麻痹贝类毒素的系统方法符合AOAC Method 2011.02，如下： 方法 样品准备 1.：转移5g已均质的贝类组织到 50mL离心管中，并加入1N的 HCL 5mL； 2.搅拌混合物，调节PH到2-4必要范围； 3.开水浴加热混合物5分钟，冷却至室温，重新检查PH到必要范围； 4.离心混合物，取上清液 50uL到微离心管中； 5.加25uL 30%三氯乙酸 (TCA)脱蛋白萃取，混合，离心； 6.1M NaOH 调节pH到2-4； 7. 0.2um滤膜过滤进样。 分析条件 1.柱：Zorbax Bonus RP column，3.5um，4.6*150mm (Agilent) 2.流速：0.8ml/min 3.流动相： A：11mM的庚烷磺酸钠， 5.5mM的磷酸，氢氧化铵调节 pH到7.1； B： 11mM的庚烷磺酸钠， 16.5mM 的磷酸，11.5%的乙腈，氢氧化铵调节pH到7.1 柱后衍生条件 柱温：40℃ 反应器体积：：1.0mL 反应器温度：85℃ 试剂流速： 0.4mL/min 试剂：1.100mM磷酸，5mM高碘酸，5M氢氧化钠pH至7.82.0.75M硝酸 检测器：荧光检测器，，ex： 330nm， em： 390nm 0.00 2.00 4.00 6.00 8.00 10.0012.00 14.0016.00 HPLC GRADIENT PROGRAM TIME(MIN) %A %B 0 100 0 7.9 100 0 8 0 100 18.5 0 100 18.6 100 0 24 100 0 18.00 20.00 Chromatogram ofGTX and STX mixed toxins standard EGE 总部 香港九龙观塘巧明街100号友邦九龙大楼36楼3605室Tel：(852) 3910 1500 Fax：(852) 2758 3830 扫描二维码了解德祥 亚太地区 香港办事处 香港九龙观塘鸿图道14-16号 志成工业大厦5楼全层 北区北京办事处西安办事处北京市东城区南竹竿胡同2号陕西省西安市长安区郭杜街道文苑中路银河SOHO D座50921室长安双创中心B座Tel：(010) 8232 7383 Fax：(010) 8232 9551东区上海办事处武汉办事处上海市长宁区天山路1717号湖北省武汉市东湖高新佳园路2号SOHO天山广场T2幢1002室 (200050)高科大厦18楼F1801(430074)Tel：(021) 52610159 Fax： (021)5261 0122南区广州办事处长沙办事处广东省广州市黄埔区茅岗南路9号湖南省长沙市经济技术开发区向阳路1号鱼珠智谷A08-09(510730)金科时代中心3A-1904(410015)Tel：(020) 3256 8788 Fax： (020) 3256 8700海南办事处海南省海口市蓝天路7号华江大厦12B室(570203)昆明办事处云南省昆明市五华区北京路1079号欣欠龙城4栋707室(650041)西区南宁办事处广西省南宁市市族大道141号成都办事处中鼎万象东方C座601室 (530028)四川省成都市高新区都会路55号3单元25楼2506号重庆办事处重庆市渝北区新溉路保华大道仁安龙城国际1期1栋1单元20-9室(400020)PICAAA202112-01 慧淘科仪SmartLab Hub 德祥集团旗下一站式科研用品采购平台 网址： www.smartlabhub.com.cn邮箱： info@smartlabhub.com.cn 售后服务热线：400-006-9696 甲壳类水生动物毒素是一组由腰鞭毛虫所产生的 18 种次级代谢产物，它们多寄存在双壳软体动物中。腰鞭毛虫的繁盛是季节性的，多出现在温暖的月份。因为传染往往是不可预测的，所以甲壳类水生动物应定期地进行监测。吃了被感染的动物往往会导致麻痹性或瘫痪性的中毒，直接威胁生命。用小鼠实验来检测鞭毛虫导致的神经毒素的方法有很大的缺陷，进而探索出液相色谱的分析方法。近来液相色谱柱后氧化衍生在碱性条件下检测此毒素的方法被批准成为 AOAC 新的官方方法-OMA2011.02。三组毒素在梯度条件下由 C18 柱分离，生成的衍生产物很容易被荧光检测器检测到。Pickering 的柱后衍生检测麻痹贝类毒素的系统方法符合 AOAC Method 2011.02