叶酸片中有关物质检测方案(液相色谱仪)

Acchrom·Tech华谱科仪华谱科仪(北京)科技有限公司 华谱科仪(北京)科技有限公司 华谱科仪 S6000液相色谱分析叶酸片有关物质 一、实验背景 本文参考2020版《中国药典》对叶酸片样品有关物质进行分析，以建立符合药典要求的叶酸片高效液相色谱分析方法。 药典要求：供试品溶液的色谱图中，蝶酸峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.6倍(0.6%)，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(1.0%)，除蝶酸峰外各杂质峰面积之和不得大于对照溶液主峰面积的3倍(3.0%)，小于对照溶液主峰面积0.05倍的峰忽略不计。 二、实验结果 三、方案思路 采用 Alphasil VC-C18 (4.6x250 mm，5 pm)色谱柱分析叶酸片样品，根据2020版《中国药典》记载的叶酸片有关物质液相色谱分析方法，验证本色谱柱分析叶酸片样品是否合乎要求。 四、样品制备 参照2020版《中国药典》供试品及对照品制备方法。 取本品细粉适量(约相当于叶酸10mg)，置具塞试管中，加入0.5%氨溶液10mL，置热水浴中加热20分钟，时时振摇使叶酸溶解，离心(每分钟4000转)15分钟，取上清液。 五、结果与讨论 色谱条件 仪 器：华谱 S6000 高效液相色谱仪 色谱柱：AlphasilVC-C18(4.6*250mm，：5um) 流动相：磷酸二氢钾-四丁基氢氧化铵-磷酸-甲醇溶液 流 速：1mL/min 柱 温：30℃ 检测波长：280nm 进样量：20uL 图1叶酸片供试品色谱图 表1叶酸片供试品检测结果 峰名称 保留时间 峰面积 占主峰面积的百分比 杂质峰1 3.785 59980 0.17% 杂质峰2 5.863 70644 0.20% 蝶酸 9.529 111304 0.31% 杂质峰3 11.469 101089 0.28% 杂质峰4 18.391 47853 0.14% 叶酸 21.062 35379841 杂质峰5 39.664 23251 0.06% 总计 1.16% 三、结论 从上述谱图可知，使用 Alphasil VC-C18色谱柱可以实现对叶酸片中有关物质的分离，从分析结果可知，蝶酸峰面积小于对照溶液主峰面积的0.6倍(0.6%)， 单个杂质峰面积小于对照溶液主峰面积(1.0%)，除蝶酸峰外各杂质峰面积之和小于对照溶液主峰面积的3倍(3.0%)。 联系我们 关注我们 www.acchrom-tech.com 华谱科仪(北京)科技有限公司 热线电话：010-8410-9313 邮箱： marketing@acchrom-tech.com 本文参照2020版《中国药典》对叶酸片中有关物质进行分析。从分析结果可知，蝶酸峰面积小于对照溶液主峰面积的0.6倍（0.6%），单个杂质峰面积小于对照溶液主峰面积（1.0%），除蝶酸峰外各杂质峰面积之和小于对照溶液主峰面积的3倍（3.0%）。