饮料中22种非法添加物检测方案(液质联用仪)

SSL-CA20-542Excellence in Science Excellence in ScienceLCMSMS-558 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.-Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn LC-MS/MS 食定食品中22种非法添加物 LCMSMS-558 摘要：本文使用岛津三重四极杆液相色谱质谱联用仪(LCMS-8050) 开发了饮料等食品中22种非法添加物的检测方法。实验结果表明，在5-100 ng/mL浓度范围内，方法线性良好，线性相关系数在0.9973-0.9999 之间。曲线各标点准确度在86.9-113.7%之间。10 ng/mL标准溶液连续进样6次，保留时间和峰面积的相对标准偏差(RSD%)分别在 0.02-0.07%和1.31-4.62%之间，方法精密度良好。0.25 ug/mL、1ug/mL 和 5 ug/mL 三个不同浓度加标回收率在 86.3-105.8%之间，平行三份样品的相对标准偏差 (RSD%) 在1.1-4.6%之间。该方法简单、方便、高效，适用于饮料等食品中22种非法添加物的检测。 关键词： LCMS-8050食品非法添加物 现阶段，市场中声称有辅助降血糖、降血脂等功能的食品及保健食品琳琅满目，越来越多的消费者也开始食用这些食品以改善身体状况。某些商家由于利益驱使，选择在食品中添加违禁药物来达到提高其产品功能性的目的，这种行为违反了《中华人民共和国食品安全法》，会给人民群众的身体健康带来很大的安全隐患。因此对食品中非法添加物质进行快速准确地检测有着重要的意义。 目前，保健食品中非法添加物的研究比较常见，但饮料、茶叶、酒等普通食品没有引起足够的重视。本文采用岛津三重四极杆液质联用仪 LCMS-8050，建立了饮料中22种非法添加物的分析方法，供相关检测人员参考，为国家食品质量标准的提高提供依据。 实验部分 1.1仪器 本实验使用岛津超高效液相色谱仪 LC-30A与三重四极杆质谱仪 LCMS-8050 联用系统，具体配置为： 系统控制器： CBM-20A 脱气机： DGU-20A， 输液泵： LC-30AD×2 自动进进器：SIL-30ACMP 柱温箱： CTO-30A 色谱工作站： LabSolutions Ver. 5.99 1.2分析条件 液相条件 色谱柱： RRHD SB-C18 (100 mm × 2.1 mml.D.，1.8 um) 流动相：A相-0.1%甲酸水；B相-乙腈 流速： 0.3mL/min 柱温：40℃ 进样器温度：15℃ 进样量：2uL 洗脱方式：梯度洗脱，B相初始浓度为5%，洗脱程序见表1。 表1梯度洗脱时间程序 Time(min) Module Command Value 2.00 Pumps Pump B Conc. 5 17.00 Pumps Pump B Conc. 98 24.00 Pumps Pump B Conc. 98 24.10 Pumps Pump B Conc. 5 29.00 Controller Stop LCMS-8050 质谱条件： 加热模块温度：400℃ 离子源：ESI，正、负离子模式同时采集雾化气：氮气3.0 L/min干燥气：氮气10.0 L/min加热气：空气10.0 L/min 接口温度：350℃扫描模式：多反应监测(MRM) MRM 参数：见表2 DL管温度：300℃ 表2MRM 参数 LCMSMS-558 17 格列喹酮 528.0 403.5* -36.0 -14.0 -19.0 33342-05-1 386.5 -36.0 -23.0 -27.0 186.3* -20.0 -25.0 -12.0 18 莫格他唑 331741-94-7 517.3 292.4 -20.0 -16.0 -19.0 19 454.1 257.4* -17.0 -29.0 -17.0 GW501516 317318-70-0 188.3 -30.0 -55.0 -15.0 190.3* 30.0 18.0 20.0 20 氯磺丙脲 94-20-2 275.1 126.2 30.0 26.0 24.0 134.3* 16.0 28.0 25.0 21 醋磺己脲 968-81-0 323.4 198.3 16.0 19.0 13.0 289.5* 17.0 19.0 14.0 22 环格列酮 74772-77-3 332.5 150.2 16.0 35.0 15.0 注：*表示定量离子 1.3标准品溶液制备 混合标准储备液：精密称取表2中22种非法添加物标准品各5mg，用甲醇定容至100mL容量瓶中，制得50ug/mL 的混合标准储备液。 混合标准系列工作溶液：从上述储备液中移取适量，用甲醇配制成5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL、50ng/mL、100 ng/mL 标准系列工作溶液。 1.4样品前处理 准确称取1mL试样至50mL离心管中，加入甲醇45mL， 涡旋混匀2分钟，超声处理20分钟，取出，放冷，用甲醇定容至50 mL，以10000转/分的速率离心10分钟，将上清液过 0.22 m 滤膜过滤，取滤液上机。 结果与讨论 2.1标准品溶液色谱图 LCMSMS-558 图11i部分标准品溶液(5ng/mL) MRM 色谱图 2.2线性范围 将1.3中制备的5、10、20、50、100 ng/mL标准系列工作溶液，取2uL进样，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，使用外标法拟合工作曲线。标准曲线见图2。各浓度点线性回归的准确度、判定系数R²等结果见表3。 图22部分化合物工作曲线 表3校准曲线信息 化合物 线性范围(ng/mL) 准确度(%) 判定系数R2 维达列汀 5-100 96.0-104.7 0.9997 罗格列酮 5-100 95.9-103.4 0.9997 西他列汀 5-100 95.8-103.3 0.9996 吡格列酮 5-100 96.4-112.2 0.9999 格列吡嗪 5-100 89.7-109.5 0.9978 甲苯磺丁脲 5-100 90.5-105.2 0.9977 达格列净 5-100 87.2-110.0 0.9973 卡格列净 5-100 94.7-101.3 0.9998 妥拉磺脲 5-100 91.2-103.8 0.9992 瑞格列奈 5-100 93.8-113.7 0.9997 格列齐特 5-100 86.9-104.7 0.9988 格列波脲 5-100 94.8-104.0 0.9985 格列本脲 5-100 91.2-103.9 0.9975 那格列奈 5-100 92.1-105.0 0.9980 格列美脲 5-100 94.5-110.2 0.9982 曲格列酮 5-100 89.3-107.1 0.9973 格列喹酮 5-100 90.8-105.3 0.9973 莫格他唑 5-100 98.4-101.9 0.9999 GW501516 5-100 87.5-106.8 0.9975 氯磺丙脲 5-100 97.0-103.0 0.9992 醋磺己脲 5-100 95.3-104.3 0.9982 环格列酮 5-100 90.8-111.0 0.9999 2.3重复性考察 10 ng/mL 浓度对照品溶液，连续进样6次，考察保留时间和峰面积的重复性，结果如下表4所示。保留时间和峰面积的相对标准偏差 (RSD%)分别在 0.02-0.07%和1.31-4.62%之间，方法精密度良好。 表410ng/mL 标准溶液连续6针重复性结果 No. 化合物名称 RSD% (10 ng/mL) R.T. Area 维达列汀 0.07 1.98 2 罗格列酮 0.04 2.03 3 西他列汀 0.04 3.25 4 吡格列酮 0.04 1.58 5 格列吡嗪 0.03 4.62 6 甲苯磺丁脲 0.03 3.13 7 达格列净 0.03 2.22 8 卡格列净 0.03 4.18 9 妥拉磺脲 0.03 3.04. 10 瑞格列奈 0.03 2.27 11 格列齐特 0.03 1.74 12 格列波脲 0.03 4.20 13 格列本脲 0.02 2.93 14 那格列奈 0.02 3.79 15 格列美脲 0.03 4.10 16 曲格列酮 0.02 1.31 17 格列喹酮 0.03 2.15 18 莫格他唑 0.02 1.53 19 GW501516 0.02 3.49 20 氯磺丙脲 0.04 1.73 21 醋磺己脲 0.03 2.32 22 环格列酮 0.02 3.33 2.4加标回收率及重复性考察 按照1.4前处理方法，对饮料样品进行低、中、高三个浓度水平加标回收率考察。每个浓度平行制备三份样品，进行重复性考察。低、中、高三个加标浓度分别为 0.25 ug/mL、1 ug/mL 和5 ug/mL。三水平加标回收率及重复性结果见表 5。 表5三三浓度水平加标回收率及重复性计算结果(n=3) 名称 0.25 ug/mL 1ug/mL 5 ug/mL 回收率(%) RSD(%) 回收率(%) RSD(%) 回收率(%) RSD(%) 维达列汀 93.7 2.7 96.0 2.2 92.1 3.2 罗格列酮 94.9 3.4 92.3 3.5 95.6 2.9 西他列汀 97.0 2.5 93.7 1.8 92.3 3.7 吡格列酮 97.7 2.5 91.2 3.3 104.4 3.8 格列吡嗪 88.5 2.7 92.6 1.6 94.4 2.0 甲苯磺丁脲 90.7 3.6 98.5 3.4 102.3 3.1 达格列净 87.4 4.1 93.2 4.3 92.0 3.6 卡格列净 93.8 2.2 95.6 4.1 94.2 3.9 妥拉磺脲 95.3 2.8 99.6 2.9 103.4 2.4 瑞格列奈 98.5 4.2 94.1 3.3 95.7 3.8 格列齐特 94.0 1.3 92.3 2.4 89.7 2.6 格列波脲 89.4 4.4 91.5 2.0 93.3 1.9 格列本脲 90.7 3.8 93.5 4.6 94.0 3.4 那格列奈 96.4 2.1 95.3 2.4 95.6 3.2 格列美脲 87.6 1.1 94.2 3.5 92.3 4.0 曲格列酮 97.1 2.2 104.6 1.4 103.2 3.3 格列喹酮 94.5 3.7 95.9 2.5 99.2 莫格他唑 86.3 3.2 90.5 2.7 92.0 GW501516 94.4 1.9 92.7 1.8 92.9 2.3 氯磺丙脲 87.2 3.3 93.9 4.6 90.4 3.2 醋磺己脲 98.5 2.5 103.6 3.0 105.8 4.1 环格列酮 92.7 3.6 95.0 1.4 96.2 3.4 结论 本文利用岛津 LCMS-8050三重四级杆液质联用仪定量测定了饮料中22种非法添加物。实验结果表明，在5-100ng/mL 浓度范围内，方法线性良好，线性判定系数在 0.9973-0.9999之间。曲线各标点准确度在 86.9-113.7%之间。10 ng/mL标准溶液连续进样6次，保留时间和峰面积的相对标准偏差(RSD%)分别在0.02-0.07%和1.31-4.62%之间，方法精密度良好。0.25 ug/mL、1 ug/mL 和5 ug/mL 三个不同浓度加标回收率在86.3-105.8%之间， 平行三份样品的相对标准偏差 (RSD%) 在1.1-4.6%之间。该方法灵敏，准确，稳定性好，回收率高，抗假阳性能力强，适用于饮咪等食品中22种非法添加物的检测。 岛津应用云 本文使用岛津三重四极杆液相色谱质谱联用仪（LCMS-8050）开发了饮料等食品中22种非法添加物的检测方法。实验结果表明，在5-100 ng/mL浓度范围内，方法线性良好，线性相关系数在0.9973-0.9999之间。曲线各标点准确度在86.9-113.7%之间。10 ng/mL标准溶液连续进样6次，保留时间和峰面积的相对标准偏差(RSD%)分别在0.02-0.07%和1.31-4.62%之间，方法精密度良好。0.25 μg/mL、1 μg/mL和5 μg/mL三个不同浓度加标回收率在86.3-105.8%之间，平行三份样品的相对标准偏差(RSD%)在1.1-4.6%之间。