土壤中草甘膦检测方案(液相色谱仪)

华谱科仪(北京)科技有限公司 华谱科仪(北京)科技有限公司 华谱科仪 S6000 液相色谱测定土壤中的草甘膦 方案优势 1)主峰与杂质之间分离度良好 2) 方法回收率良好 3) 分析时间短，分析效率高 4) 仪器灵敏度高，检测限度远低于标准要求 项目背景 草甘膦又称镇草宁，是一种常用的水溶性除草剂。近年来，随着转基因抗草甘膦农作物增多，草甘膦用量逐年增加，已成为世界上应用最广、产量最大的农药品种，全球每年需草甘膦原粉40万吨， t占据世界农药销售额首位。在农业上大量使用的草甘膦除草剂，只有极少部分发挥了作用，多数残留在土壤或漂浮在大气中，通过降雨和径流的冲刷进入地表水或地下水，造成水体污染。随着世界各国草甘膦需求量和使用量的不断增加，人们对于草甘膦农药的使用，将会危及人体健康，并会造成肝肾、黏膜(消化道、皮肤)、神经、呼吸和心血管系统的损伤，严重者可危及生命。 目前土壤中草甘膦的检测的国家现行标准为 HJ 1055-2019。现行国标中，土壤中草甘膦的检测方法为柱前衍生方法，首先将土壤中的草甘膦用磷酸钠和柠檬酸钠混合水溶液提取，然后将提取液在弱碱条件下经正己烷萃取净化，水相用9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC-Cl)衍生化后，使用荧光检测器分则检测草甘膦的衍生物(Glyphasate-FMOC)。但现行国标中使用的色谱条件不能将杂质和草甘膦主峰分离开，本项目计划参考国标中前处理方法进行样品处理，优化色谱条件，实现土壤中草甘膦的检测。 实验部分 样品前处理 取土壤样品10g于50 mL的离心管中，加入50 mL 磷酸钠和柠檬酸钠混合提取液，超声提取30 min， 在9500 r/min 下离心5 min， 取上清液用滤纸过滤，待净化；提取液先用盐酸溶液调节pH值至9， 静置10 min 后用滤纸过滤，加入50 mL正己烷，充分震荡后静置，弃去有机相，水相用50 mL 正己烷再萃取一次，取1mL样品溶液于5 mL 离心管中，加入 0.12 mL 四硼酸钠溶液和 0.2 mL 9-芴甲基氯甲酸酯溶液，在常温下用振荡器衍生4h， 0.45 um 滤膜过滤，收集滤液于进样瓶中以备进样。 仪器配置与分析方法 液相条件 仪器配置 Acchrom S6000 只织器 S6110四元泵S6210进样器 S6310 温温箱 S6440 荧光检测器 色谱柱 Alphasil VC-C18， 4.6mm*250 mm， 5 um 流动相 A：磷酸溶液(w=0.2%) +20mM硫酸钠；B：乙腈 流速 1ml/min 进样量 20 pL 柱温 35°C 检测波长 激发波长：254nm， 检测波长：301 mn 结果与讨论 实际样品检测 图1为实际样品通过前处理后在上述条件下的分离结果。本实验考察实际土壤样品中草甘膦的含量。由图中结果显示，土壤样品基质不干扰草甘膦出峰。本实验采用单点校正法测定样品含量，草甘膦标品浓度为 0.1 ug/mL，样品中草甘膦的含量为 0.001151 ug/mL(0.006301 mg/kg)。 图1实际样品色谱图 实验针对草甘膦进行了线性、检测限及定量限的考察，具体结果见表1。取不同体积的标准使用液，用水稀释，制成不同浓度的标准溶液，经衍生后测定，以待测物峰面积为纵坐标，待测物浓度为度坐标绘制标准曲线，草甘膦在 0.001~0.1 ug/mL 内线性相关系数为 0.9999。以 S/N=3 为检测限， S/N=10为定量限，测定草甘膦的检测限和定量限，由表1结论可知，草甘膦各峰检测限和定量限远低于国标要求，方法灵敏度高。 图2检测限度结果色谱图 表11草甘膦的线性、检测限和定量限 名称 浓度 R2 方法检测限 方法定量限 国标检测限 国标定量限 草甘膦 0.001-0.1 0.9999 0.0015 0.00625 0.02 0.08 ug/ml mg/kg mg/kg mg/kg mg/kg 回收率 通过加标回收实验来验证方法准确度，加标回收率如表2所示。结果表明草甘膦加标实验回收率在95%-102.3%范围内， RSD%符合国标要求。 表2 加标回收结果数据表((n=3，单点外标法) 加标量(mg/kg) 回收率 平均回收率 RSD(%) 97.4% 0.05 98.5% 95.8% 3.94 91.5% 93.6% 0.1 92.5% 95% 3.64 99% 95.6% 0.5 100.6% 102.3% 5.67 108.8% 结论 土壤中草甘膦的检测在环境行业中是行业热点，也是重点。国标方法不能将土壤中杂质与草甘膦分离开，导致检测时将杂质错认为草甘膦，可能对草甘膦的检测定量造成困扰。本项目按照国标方法进行样品前处理，并对色谱条件进行了优化，优化后实验结果中实际样品基质不干扰草甘膦出峰。本项目优化方法线性及加标回收均符合国标要求，且从结果看该方法检测限和定量限均很低，表明我们荧光检测器具有高的灵敏度。 联系我们 关注我们 www.acchrom-tech.com 华谱科仪(北京)科技有限公司 热线电话：010-8410-9313 邮箱： marketing@acchrom-tech.com 土壤样品基质不干扰草甘膦出峰，草甘膦在0.001~0.1 μg/mL内线性相关系数为0.9999。以S/N=3为检测限，S/N=10为定量限，测定草甘膦的检测限和定量限，草甘膦各峰检测限和定量限远低于国标要求，方法灵敏度高。