白酒样品和面包样品中曲酸检测方案

： suon!puo07dH 食品中曲酸的测定-LC-MS/MS 曲酸，化学名称为5-羟基-2-羟甲基-1，4-吡喃酮，存在于酱油、豆瓣酱、酒类的酿造中，在许多以曲霉发酵的发酵产品中都可以检测到曲酸的存在。曲酸可用作食品添加剂，起到保鲜、防腐、抗氧化作用。实验证明曲酸能抑制熏肉中亚硝酸钠转化为致癌的亚硝胺，而且食品中添加曲酸不会影响食品的口味、香味及质感；曲酸同时也是生产麦芽酚和乙基麦芽酚的原料。在食品加工中，曲酸应用范围十分广泛。 OH 我们参考中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3853-2014《出口食品中曲酸的测定液相色谱-质谱/质谱法》中分析方法，使用 DAISOPAK SP-100-5-ODS-P 以及 CAPCELL PAK C18 MGIII 色谱柱对曲酸标准品、样品及加标样品进行了分析。 1. DAISOPAK SP-100-5-ODS-P 色谱柱 1.1L标准品分析结果 行业标准SN/T方法中要求使用 4.6 mm i.d.×150 mm， 5 um 规格色谱柱在0.6 mL/min 流速下进行分析，我们按照该方法，对标准品进行分析，结果如下图所示。O曲酸在液质检测中响应值不高，建议根据使用质谱情况尽量优化质谱条件，以得到良好检出限。 HPLC Conditions 色谱柱： DAISOPAK SP-100-5-ODS-P S5；4.6 mmi.d.××1150mm 流动相：5mmol/L 乙酸铵+0.03%甲酸/乙腈=95/5 流 速：0.6mL/min 温 度：35c 检 测： AB SCEIX QTRAP 5500； ESI；Positive 浓 度：10 ug/mL(甲醇溶解水稀释) 进样量：10uL 以超市购买白酒样品和面包样品，参考标准中样品处理方法进行处理后进样分析，白酒和面包中均未检出含有曲酸。 ：毕川回里 ：毕业日 √坠业凿影‘奸墨秋中智[‘甲隧半中智 色谱柱： DAISOPAK SP-100-5-ODS-P S5； 4.6 mm i.d..X 150mm 流动相：5mmol/L 乙酸铵+0.03%甲酸//乙腈=95/5 流 速：0.6mL/min 温 度：355°C 检 测：AB SCEIX QTRAP 5500； ESI； Positive 进样量：10uL 加标样品处理： 白酒：称取2.0100g白酒置于 25mL具塞容量瓶中，加入250uL1mg/mL标准溶液，加入15mL水稀稀后超声 5min，分别加入2mL 20%乙酸锌溶液和2mL10%亚铁氰化钾溶液，静置10min 后加水稀释至刻度。混匀，取少量溶液12000r/min 高速离心3min 后过0.22um水相滤膜，待测。 面包：称取 2.0187g面包置于50mL具塞离心管中，加入乙腈10mL，超声震荡 15min后，加入2g左右无水硫酸钠，8000 r/min 高速离心 5min， 取少量上清液稀释5倍，过0.22um 有机相滤膜，取少量溶液与 200ug/mL标准溶液1：1混合，待测。 2.CAPCELL PAK C18 MGIII 色谱柱 2.1.标准品分析结果 本行业标准SN/T中使用色谱柱为一般液相规格(内径4.6mm)，但为了在结果中得到更好的响应，我们使用了对应的质谱规格色谱柱(((内径2.0mm)作为分析柱，即CAPCELL PAK C18 MGIII S5； 2.0 mm i.d.×150 mm色谱柱，并使用流速相应调整为 0.3 mL/min 得到标准品分析谱图如下图所示，在该色 谱柱上可快速完成分析检测，且响应和峰形良好，这与色谱柱的内径和流速有关。 HPLC Conditions： 色谱柱：CAPCELL PAK C18 MGIII S5； 2.0 mm i.d. × 150mm 流动相：5mmol/L 乙酸铵+0.03%甲酸/乙腈=95/5 流 速：0.3mL/min 温 度：355°C 检 测： AB SCEIX QTRAP 5500； ESI； Positive 浓 度： 10 ug/mL(甲醇溶解水稀释) 进样量：10uL 我们也在该色谱柱及上述实验条件下对加标样品溶液进行了分析，结果如下图： 白酒加标样品： 面包加标样品： HPLC Conditions： 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MGIII S5； 2.0 mm i.d. × 150 mm 流动相： 5mmol/L 乙酸铵+0.03%甲酸/乙腈=95/5 流速： 0.6 mL/min 温 度：35℃ 检 测： AB SCEIX QTRAP 5500； ESI； Positive 进样量：10uL 加标样品处理： 白酒：称取 2.0100g 白酒置于25mL具塞容量瓶中，加入250pL1mg/mL标准溶液，加入15mL水稀释后超声5min，分别加入2mL 20%乙酸锌溶液和2mL 10%亚铁氰化钾溶液，静置10min 后加水稀释至刻度。混匀，取少量溶液12000 r/min 高速离心 3min 后过 0.22 um水相滤膜，待测。 面包：称取2.0187g面包置于50mL具塞离心管中，加入乙腈10mL， 超声震荡 15min后，加入2g左右无水硫酸钠， 8000 r/min 高速离心5min， 取少量上清液稀释5倍，过0.22um有机目滤膜，取少量溶液与 200pg/mL标准溶液1：1混合，待测。 综上所述，按照行业标准SN/T3853-2014《出口食品中曲酸的测定液相色谱-质谱/质谱法》中分析方法，使用 DAISOPAK SP-100-5-0DS-P 和CAPCELL PAK C18 MGIII 色谱柱可以得到对曲酸的良好分析结果。 食品中曲酸的测定-LC-MS/MS曲酸，化学名称为5-羟基-2-羟甲基-1,4-吡喃酮，存在于酱油、豆瓣酱、酒类的酿造中，在许多以曲霉发酵的发酵产品中都可以检测到曲酸的存在。曲酸可用作食品添加剂，起到保鲜、防腐、抗氧化作用。实验证明曲酸能抑制熏肉中亚硝酸钠转化为致癌的亚硝胺，而且食品中添加曲酸不会影响食品的口味、香味及质感；曲酸同时也是生产麦芽酚和乙基麦芽酚的原料。在食品加工中，曲酸应用范围十分广泛。我们参考中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 3853-2014《出口食品中曲酸的测定 液相色谱-质谱/质谱法》中分析方法，使用DAISOPAK SP-100-5-ODS-P以及CAPCELL PAK C18 MGIII色谱柱对曲酸标准品、样品及加标样品进行了分析。 1. DAISOPAK SP-100-5-ODS-P 色谱柱1.1 标准品分析结果行业标准SN/T方法中要求使用4.6 mm i.d.×150 mm，5 μm规格色谱柱在0.6 mL/min流速下进行分析，我们按照该方法，对标准品进行分析，结果如下图所示。曲酸在液质检测中响应值不高，建议根据使用质谱情况尽量优化质谱条件，以得到良好检出限。HPLC Conditions ：色谱柱：DAISOPAK SP-100-5-ODS-P S5; 4.6 mm i.d. × 150 mm流动相：5 mmol/L 乙酸铵+0.03%甲酸 / 乙腈=95 / 5流   速：0.6 mL/min温   度：35 °C检   测：AB SCEIX QTRAP 5500；ESI；Positive浓   度：10 µg/mL（甲醇溶解水稀释）进样量：10 µL 1.2 加标样品分析结果以超市购买白酒样品和面包样品，参考标准中样品处理方法进行处理后进样分析，白酒和面包中均未检出含有曲酸。由于样品中未检测出曲酸，我们在样品中加入标准溶液后进行分析，结果下面两个图所示：白酒加标样品：面包加标样品：HPLC Conditions ：色谱柱：DAISOPAK SP-100-5-ODS-P S5; 4.6 mm i.d. × 150 mm流动相：5 mmol/L 乙酸铵+0.03%甲酸 / 乙腈= 95 / 5流   速：0.6 mL/min温   度：35 °C检   测：AB SCEIX QTRAP 5500；ESI；Positive进样量：10 µL加标样品处理：白酒：称取2.0100g白酒置于25mL具塞容量瓶中，加入250µL 1mg/mL标准溶液，加入15mL水稀释后超声5min，分别加入2mL 20%乙酸锌溶液和2mL 10%亚铁氰化钾溶液，静置10min后加水稀释至刻度。混匀，取少量溶液12000 r/min高速离心3min后过0.22μm水相滤膜，待测。面包：称取2.0187g面包置于50mL具塞离心管中，加入乙腈10mL，超声震荡15min后，加入2g左右无水硫酸钠，8000 r/min高速离心5min，取少量上清液稀释5倍，过0.22μm有机相滤膜，取少量溶液与200µg/mL标准溶液1:1混合，待测。 2. CAPCELL PAK C18 MGIII 色谱柱2.1 标准品分析结果本行业标准SN/T中使用色谱柱为一般液相规格（内径4.6mm），但为了在结果中得到更好的响应，我们使用了对应的质谱规格色谱柱（内径2.0mm）作为分析柱，即CAPCELL PAK C18 MGIII S5; 2.0 mm i.d.×150 mm色谱柱，并使用流速相应调整为0.3 mL/min得到标准品分析谱图如下图所示，在该色谱柱上可快速完成分析检测，且响应和峰形良好，这与色谱柱的内径和流速有关。HPLC Conditions ：色谱柱：CAPCELL PAK C18 MGIII S5; 2.0 mm i.d. × 150 mm流动相：5 mmol/L 乙酸铵+0.03%甲酸 / 乙腈 = 95 / 5流   速：0.3 mL/min温   度：35 °C检   测：AB SCEIX QTRAP 5500；ESI；Positive浓   度：10 µg/mL（甲醇溶解水稀释）进样量：10 µL 2.2 加标样品的检测我们也在该色谱柱及上述实验条件下对加标样品溶液进行了分析，结果如下图： 白酒加标样品：面包加标样品： HPLC Conditions ：色谱柱：CAPCELL PAK C18 MGIII S5; 2.0 mm i.d. × 150 mm流动相：5 mmol/L 乙酸铵+0.03%甲酸 / 乙腈  = 95 / 5流   速：0.6 mL/min温   度：35 °C检   测：AB SCEIX QTRAP 5500；ESI；Positive进样量：10 µL加标样品处理：白酒：称取2.0100g白酒置于25mL具塞容量瓶中，加入250µL 1mg/mL标准溶液，加入15mL水稀释后超声5min，分别加入2mL 20%乙酸锌溶液和2mL 10%亚铁氰化钾溶液，静置10min后加水稀释至刻度。混匀，取少量溶液12000 r/min高速离心3min后过0.22μm水相滤膜，待测。面包：称取2.0187g面包置于50mL具塞离心管中，加入乙腈10mL，超声震荡15min后，加入2g左右无水硫酸钠，8000 r/min高速离心5min，取少量上清液稀释5倍，过0.22μm有机相滤膜，取少量溶液与200µg/mL标准溶液1:1混合，待测。 3.总结综上所述，按照行业标准SN/T 3853-2014《出口食品中曲酸的测定 液相色谱-质谱/质谱法》中分析方法，使用DAISOPAK SP-100-5-ODS-P和CAPCELL PAK C18 MGIII色谱柱可以得到对曲酸的良好分析结果。