饲料中维生素B6检测方案(液相色谱仪)

华谱科仪(北京)科技有限公司 仪器配置与分析方法 华谱科仪(北京)科技有限公司 华谱科仪 S6000 测定添加剂预混合饲料中维生素 B6 方案优势 1)色谱柱应用范围广 2) 分离时间短，提高效率 3)方法重复性，两款检测器可供选择，配置灵活 项目背景 维生素B6又称吡哆素，是水溶性B族维生素之一，基本结构2-甲基-3-羟基-5-羟甲基吡啶，有3种化学形式，即吡哆醇( pyridoxine， PN)、吡哆醛(pyridoxal， PL)和吡哆胺(pyridoxamine，PM)，这3种形式均易被生物体有效吸收。维生素B6是水产饲料必不可少的添加成分之一，饲料中的维生素B6常以盐酸吡哆醇的形式添加。盐酸吡哆醇易溶于水，在酸、碱溶液中耐高温，但是暴露于可见光时易破坏。维生素B6在水产动物中主要有以下几个方面作用：1)影响蛋白质和氨基酸代谢，提高饲料营养成分利用率，促进生长。2)影响脂肪和糖代谢，促进鱼类血清酯质代谢及其转运，从而避免鱼类血脂积累及营养性脂肪肝的发生。3()影响水产动物的体成分，促进维生素 B6 自身在体内的积累以及不饱和脂肪酸含量的增加，改善水产品的营养价值和风味。 图1 维生素B，结构图 紫外方法-实验部分 样品前处理 称取0.5g(精确到0.0001g) 维生素复合预混合饲料于100 mL棕色容量瓶中，加入70 mL 磷酸二氢钠溶液，在超声波提取器中超声提取 20 min， 待温度降至室温后用提取剂定容至刻度，过滤(溶液浑浊则需离心)，溶液过 0.45 um 滤膜，待机上样。 液相条件 仪器配置 Acchrom S6000组织器S6110 四元泵 S6210进样器 S6310 柱温箱 S6410UV 检测器 色谱柱 Alphasil VC-C18， 4.6 mmx250 mm， 5 um 流动相 A：甲醇；B：乙二胺四乙酸(EDTA) 50 mg， 庚烷磺酸钠1.10g， 加入700 mL的纯净水，加入25mL 乙酸， 5mL 三乙胺，加入270 mL 的纯净水，用乙酸、 三乙胺调pH为3.7 流速 1mL/min 进样量 10pl 柱温 25°℃ 检测波长 240nm 结果与讨论 样品的测定 图2 预混合饲料维生素B6分析结果色谱图 采用上述方法对预混合饲料维生素 B6 进行测定，测定结果如图2所示。实际样品中的 维生素B6实现了基线分离。通过对阴性饲料样品加标回收实验来验证方法准确性，选取低、中、高三个浓度进行添加，所得加标回收率在100%-105%范围内，符合要求；对标品进行重复性实验验证，保留时间及峰面积的RSD%均为0.1。 荧光方法-实验部分 样品前处理 称取0.5g(精确到0.0001g) 维生素复合预混合饲料于100 mL 棕色容量瓶中，加入70mL磷酸二氢钠溶液，在超声波提取器中超声提取 20 min， 待温度降至室温后用提取剂定容至刻度，过滤(溶液浑浊则需离心)，溶液过 0.45 um 滤膜，待机上上。 仪器配置与分析方法 液相条件 仪器配置 Acchrom S6000 组织器 S6110四元泵S6210 进样器 S6310 温温箱 S6440 荧光检测器 色谱柱 Alphasil VC-C18， 4.6 mmx250 mm， 5 um 流动相 A：甲醇；B：磷酸二氢钠溶液 流速 1mL/min 进样量 10pl 柱温 25°℃ 检测波长 激发波长：293nm；发射波长：395nm 结果与讨论 样品的测定 3预混合饲料维生素B6分析结果色谱图 采用上述荧光方法对预混合饲料维生素B6 进行测定，测定结果如图3所示。实际样品中的维生素 B6 实现了基线分离。对标品进行重复性实验验证，保留时间及峰面积的RSD%均为0.1。 结论 本文在现有国标的基础上开发了采用紫外检测器和荧光检测器检测添加剂预混合饲料中维生素B6高效液相色谱方法，即可实现对添加剂预混合饲料中维生素 B6的含量测定，该方法对预混合饲料中维生素 B6 具有良好的分离效果，且在8 min 中内快速检测，经验证该方法，分析结果准确可靠。 联系我们 关注我们 www.acchrom-tech.com华谱科仪(北京)科技有限公司热线电话：010-8410-9313 邮箱： marketing@acchrom-tech.com 采用紫外以及荧光两种方法对饲料中的维生素B6进行检测，实际样品中的维生素B6实现了基线分离。通过对阴性饲料样品加标回收实验来验证方法准确性，选取低、中、高三个浓度进行添加，所得加标回收率在99.5%-105%范围内，符合要求；对标品进行重复性实验验证，保留时间及峰面积的RSD%均为0.1，满足要求。