胶塞中16种多环芳烃检测方案(气质联用仪)

SSL-CA20-457Excellence in Science Excellence in ScienceGCMSMS-213 岛津应用云岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.- Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn GC-MS/MS 法检测药用胶塞中16种可提取多环芳烃 GCMSMS-213 摘要：本文采用岛津 GCMS-TQ8050 NX 对药用胶塞中16种多环芳烃进行检测。结果显示：16种多环芳烃在1~120 ng/mL线性范围内线性相关系数 R>0.999， 对2 ng/mL标准品重复进样6次，峰面积RSD<5.43%，两个浓度水平加标实验的平均回收率(n=3) 为63.5%~124.3%。检测方法预处理简单、灵敏度高、专属性好，适用于药用胶塞中可提取多环芳烃的筛查。 多环芳烃 (polycyclic aromatic hydrocarbons，PAHs)由两个或两个以上稠化的芳香环组成，是一类经有机物热裂解形成的非均一致癌物。主要来源于人为排放，包括交通、!家庭供暖、生物质燃烧、炼油和其他工业过程。由于毒性较高，具有致癌和致突变作用，美国环境保护署(EPA)已将16种 PAHs 列入优先控制污染物名单。欧盟也规定了日用消费品种8种 PAHs的限度。 弹性体密封件的配方组分常包括能起到补强和着色作用的炭黑，炭黑的生产原料主要为煤焦油和天然气，其中煤焦油来源的炭黑含有较高含量的 PAHs。有 实验部分 1.1仪器 三重四极杆气质联用仪 GCMS-TQ8050 NX 1.2分析条件 色谱柱： DB-5MS(30m×0.25mm×0.25um) 柱温程序：35℃(2 min)_20℃/min_180℃(4min) _15℃/min_280℃ (4 min)_5℃/min_315℃ (2min)载气控制方式：线速度 (36.3 cm/sec) 进样口温度：300C 研究表明，弹性密封件中的 PAHs 能够迁移进入药品。为警示弹性体密封件 PAHs 迁移导致的安全风险，国家药品监督管理局已经 PAHs 列为弹性体密封件需要重点关注的可提取物。作为注射剂用弹性体密封件的主要品种，胶塞中可提取 PAHs 的检测是相容性研究的重要内容。 GC-MS/MS 可采用多反应监测(MRM)模式，具有更高灵敏度和较高选择性，适用于复杂基质样品的相关检测。本文建立了16种PAHs的GC-MS/MS筛查方法，适用于药用胶塞中 PAHs 的检测。 进样量： 1pL 进样方式：不分流 离子源温度：250℃ 接口温度：315℃ 检测器电压：相对于调谐结果+0.6kV 采集方式：MRM，化合物信息见表1 表1 多环芳烃组分信息表 NO. 中文名称 英文名称 CAS 保留时间 (min) 目标离子对 CE 参考离子对 CE 1 萘-D8(IS) Naphthalene-d8 1146-65-2 8.22 136.10>84.00 20 136.10>82.00 28 2 萘 Naphthalene 91-20-3 8.246 128.10>102.10 20 128.10>78.00 20 3 苊烯 Acenaphthylene 208-96-8 10.372 152.10>150.10 28 152.10>126.10 28 4 气代弋(IS) Acenaphthene-d10 15067-26-2 10.623 164.20>134.10 28 162.20>82.00 20 5 苊 Acenaphthene 83-32-9 10.682 153.10>151.10 28 153.10>127.10 28 6 芴 Fluorene 86-73-7 11.824 165.10>163.10 28 165.10>115.10 28 7 菲 Phenanthrene 85-01-8 14.824 178.10>176.10 28 178.10>152.10 20 8 蒽 Anthracene 120-12-7 14.973 178.10>176.10 28 178.10>152.10 20 9 荧蒽 Fluoranthene 206-44-0 17.773 202.10>200.10 30 200.10>198.10 30 10 芘 Pyrene 129-00-0 18.237 202.10>200.10 30 200.10>198.10 30 11 苯并[a] 蒽 Benz(a)anthracene 56-55-3 20.607 228.10>226.10 32 226.10>224.10 32 12 屈 Chrysene 218-01-9 20.68 228.10>226.10 32 226.10>224.10 32 13 苯并(b)荧蒽 Benzo(b)fluoranthene 205-99-2 23.322 252.10>250.10 36 250.10>248.10 36 14 苯并[k]荧蒽 Benzo(k)fluoranthene 207-08-9 23.41 252.10>250.10 36 250.10>248.10 36 15 苯并(a)芘 Benzo(a)pyrene 50-32-8 24.37 252.10>250.10 36 250.10>248.10 36 16 二苯并(a，h)蒽 Dibenz(a，h)anthracene 53-70-3 28.111 276.10>274.10 36 276.10>272.10 60 17 茚并(1，2，3-cd)芘 Indeno(1，2，3-cd)pyrene 193-39-5 28.243 278.10>276.10 36 276.10>274.10 36 18 苯并(g，h，i)菲 Benzo(g，h，i)perylene 191-24-2 28.925 276.10>274.10 36 276.10>272.10 36 注：萘-D8和气代芯为内标。 样品前处理 样品前处理如图1所示： 图1 样品前处理流程图 结果与讨论 3.1标准样品总离子流图(TIC)和质量色谱图(MC) 标准溶液 TIC 图见图2。MC图见图4，各物质出峰时间见表1. 图2 标准溶液 TIC 图(120ng/mL) GCMSMS-213 苯并(g，h，i) 图3多环芳烃质量色谱图(4ppb) 3.2标准曲线及仪器定量限 以二氯甲烷：丙酮(1：1)为溶剂，配制多环芳烃标准溶液，浓度梯度为1.0、2.0、4.0、10.0、40.0、120 ng/mL， 内标浓度为 100 ng/mL， 以浓度比为横坐标，化合物峰面积比为纵坐标绘制标准曲线，部分化合物标准曲线如图2所示。表2罗列了多环芳烃各组分的校准曲线回归方程的相关系数(r)和平均相对响应因子的相对标准偏差 (RRF%RSD)，以十倍信噪比计算仪器定量限 (iLOQ)，结果如表2所示，各各分在线性范围内r大于0.999， RRF %RSD 都在15%以内，各目标组分仪器定量限在 0.06-0.51 ng/mL范围内。部分组分校准曲线如图4所展示： 表2 标准曲线及仪器定量限 No. 化合物 相关系数r RRF% RSD iLOQ(ng/mL) 2 萘 0.9999 8.69 0.14 苊烯 0.9999 3.30 0.10 苊 0.9999 3.19 0.16 芴 0.9999 3.62 0.21 5 菲 0.9999 13.80 0.07 6 蒽 0.9999 1.76 0.10 7 荧蒽 0.9999 11.06 0.30 8 芘 0.9999 11.90 0.51 9 苯并[a]蒽 0.9999 4.36 0.03 10 屈 0.9999 4.52 0.05 11 苯并(b)荧蒽 0.9999 5.19 0.08 12 苯并[k]荧蒽 0.9999 3.50 0.10 13 苯并(a)芘 0.9999 4.74 0.15 14 二苯并(a，h)蒽 0.9998 8.27 0.06 15 茚并(1，2，3-cd)芘 0.9999 10.19 0.32 16 苯并(g，h，i) 0.9999 5.02 0.29 Area Ratio 图4 部分多环芳烃校准曲线 3.3重复性 对 2.0 ng/mL 的标准品平行分析6针，各组分与峰面积结果如表3所示，计算峰面积RSD%。结果显示，各组分 RSD%在1.42-5.43%之间，重复性良好。 表3 峰面积重复性结果 No. 化合物 #1 #2 #3 #4 #5 #6 RSD% 1 萘 22147 21912 21796 21918 22514 22539 1.45 2 苊烯 8767 9217 8449 9135 8779 9077 3.27 3 苊 7847 8077 7649 7895 8287 8252 3.11 4 芴 12506 12490 11199 12418 13127 11813 5.43 5 菲 23097 22305 22037 22769 23205 21999 2.35 6 蒽 17695 16797 16623 17114 17372 17141 2.26 7 荧蒽 32669 32188 30997 32707 32986 32931 2.31 8 芘 36088 34597 34258 35852 35025 34111 2.36 9 苯并[a]蔥 34073 34112 33692 34921 33442 32565 2.33 10 屈 31160 31784 30085 31023 31678 31400 1.97 11 苯并(b)荧蒽 92543 93408 89836 95197 92444 90041 2.21 12 苯并[k]荧蒽 118466 114504 112564 113630 115656 111877 2.08 13 苯并(a)芘 85491 82062 79041 82019 80491 78124 3.23 14 二苯并(a，h)蒽 79240 80456 75860 77592 78795 74772 2.76 15 茚并(1，2，3-cd)芘 72119 65989 70932 74716 74136 69697 4.49 16 苯并(g，h，i) 112425 113242 107067 113048 111074 107798 2.44 3.4实际样品分析 按照上文所述方法对胶塞样品进行了前处理后上机测定，样品测试谱图如下图5所示。对实实样品进行加标测试，加标浓度为 10 ng/g、50 ng/g。样品中各组分含量、样品加标量及加标回收率结果见表4。结果显示样品加标回收率在63.5%~124.3% 之间。 图5 样品测试谱图 表4实际样品测试结果 No. 样品测试浓度 加标测试浓度 加标浓度 平均回收率(%) 化合物名称 (ng/g) (ng/g) (ng/g) (n=3) 萘 15.83 27.72 10 118.9 74.73 50 117.8 结论 使用岛津 GCMS-TQ8050 NX 建立了药用胶塞中16种多环芳烃的测定方法。目标组分在1-120 ng/mL 浓度范围内，校准曲线线性良好，r均在0.999以上， RRF %RSD 在 15%以内，各目标组分仪器定量限在0.06-0.51 ng/mL范围内。对 2.0 ng/mL的标准品进行6次重复测定，峰面积比值 RSD%在1.42-5.43%之间。对实际样品进行分析，样品加标回收率在 63.5%~124.3%范围内。方法重复性好、灵敏度高，可用于药用胶塞中多环芳烃的筛查。 采用岛津GCMS-TQ8050   NX对药用胶塞中16种多环芳烃进行检测。结果显示：16种多环芳烃在1~120 ng/mL线性范围内线性相关系数R>0.999，对2   ng/mL标准品重复进样6次，峰面积RSD<5.43%，两个浓度水平加标实验的平均回收率（n=3）为63.5%~124.3%。检测方法预处理简单、灵敏度高、专属性好，适用于药用胶塞中可提取多环芳烃的筛查。