甘松根中气味成分检测方案(气质联用仪)

SSL-CA20-496Excellence in Science Excellence in ScienceGCMSMS-218 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD.-Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn GCMSMS 法结合气味数据库分析甘松根特征性气味成分 GCMSMS-218 摘要：本文利用岛津 GCMS-TQ8050 NX 三重四极杆气质联用仪结合 AOC-6000 自动进样器 SPME Arrow 进样建立了中药材甘松根中150种气味成分 MRM 定量方法。采用正构烷烃C9-C30数据调整150种气味组分保留时间，3种内标物校正数据库中标准曲线，无需150种气味物质标准品，自动生成150种气味物质的MRM分析方法。利用此方法分析了甘松根中特征性气味成分，并比较了野生和栽培甘松根中气味成分含量差异性。该方法可以为道地药材的相关研究提供参考。 客观数据化，量化不同中药材之间的气味差异，是中药材气味鉴别研究的发展趋势，随着科学技术的发展，越来越多的分析方法被用于评价药材的特征气味。 本文利用 HS-SPME-GC-MS/MS结合岛津气味数据库，实现了在无标准品的情况下快速建立150种气味成分 MRM定量方法。并分析了野生和栽培甘松根中特征性气味成分，定量气味成分含量。 InertCap Pure-wax，30m×0.25mm×0.25um 柱温程序：50℃(5min)_10℃ /min_250C (10min) 离子源温度：200℃ 接口温度：250℃ 采集模式：：MRM/SCAN 图1正构构烃 (C9-C30)质量色谱图 150种气味成分校准曲线校正用内标物质(4-溴氟苯、1，2-二氯苯-d4、造-d10) 3种内标信息见表2。 4-溴氟苯 1，2-二氯苯-d4 图2 标准曲线校正用3种内标MRM图 表2内标物质信息表 序号 名称 保留时间/min 定量离子对 CE 1 4-溴氟苯 10.846 174.0>95.0 15 2 1，2-二氯苯-d4 13.032 150.0>115.0 15 3 -d10 21.014 164.0>162.0 15 气味物质数据库结合正构烷烃数据及内标数据，无需150种气味物质标准品，自动生成150种气味物质的MRM定量方法。 3.2甘松根 MRM 测试结果 取栽培甘松根样品和野生甘松根样品粉碎，过三号筛后，分别准确称1.0g 置于20mL顶空瓶中，压紧瓶盖密封后，按着1.2分析条件上机分析，，7TIC图见图3。甘松根中的特征性气味成分及含量见表3. 图3 甘松根样品中气味成分 TIC 图 表3 野生甘松根和栽培甘松根气味成分定量结果 38 4-丙基苯酚 p-Propylphenol 645-56-7 0.168 0.445 湿毛发味 39 正癸酸 Capric acid 334-48-5 0.245 0.214 陈腐气味 40 异丁香酚 Isoeugenol 97-54-1 9.008 7.874 芳香气味 41 香豆素 Coumarin 91-64-5 0.133 0.199 青香气味 42 月桂酸 Lauric acid 143-07-7 0.406 0.444 金属气味 43 香兰素 Vanillin 121-33-5 0.090 0.096 香草气味 分析结果显示，野生甘松根中筛查出43种气味成分，栽培甘松根中筛查出38种气味成分，野生甘松根中独有5种气味成分，包括：仲辛酮，仲辛醛，2-壬酮，2-异丙基-3-甲氧基吡嗪，水杨醛，且野生甘松根中部分气味成分的含量明显高于栽培甘松根中对应气味成分含量。 为了更直观的呈现含量差异，用野生甘松根中每个化合物含量除以以培甘松跟中对应化合物含量得到含量倍数，以含量倍数大于2倍计，筛选出含量差异较大的气味成分有9个，包括： alpha-蒎烯， beta-蒎烯，3-乙基-4-甲基吡啶，桉叶油醇，苯乙酮，双戊烯，，己酸，异丁酸，芳樟醇；这些化合物可能可以作为区分野生和栽培甘松的特征气味成分。部分气味成分质量色谱图见图4和图5. 图4 野生甘松根中特征气味成分(部分)MRM图 图5 栽培甘松根中特征气味成分(部分) MRM图 3.3重复性实验 按着前述样品制备方式重复制备栽培和野生甘松根样品各6个，分别连续进样6次，计算栽培甘松根和野生甘松根中各气味成分峰面积RSD%，考察仪器重复性。连续6次进样，野生甘松根中各气味成分峰面积RSD% 分布在0.73%-8.62%之间，栽培甘松根中各气味成分峰面积 RSD% 分布在0.96%-9.50%之间，实验结果表明， HS-SPME Arrow 进样，仪器重复性良好，详细结果见表4。 表4甘松根中特征性气味成分峰面积重复性实验结果 No. 化合物 RSD%(n=6) No. 野生甘松根 栽培甘松根 化合物 RSD%(n=6) 野生甘松根 栽培甘松根 1 乙酸乙酯 2.65 3.44 23 苯乙酮 3.03 3.48 2 a-蒎烯 2.59 5.12 24 马鞭烯醇 3.94 2.60 3 正己醛 4.34 6.98 25 异戊酸 0.73 0.96 4 beta-蒎烯 3.91 5.93 26 水杨醛 6.67 - 5 4-甲基-3-戈烯-2-酮 5.62 6.42 27 正戊酸 2.30 6.96 6 双戊烯 3.92 5.42 28 己酸 4.14 5.87 7 桉叶油醇 4.09 5.17 29 2-甲基萘 5.14 6.79 8 仲辛酮 4.68 一 30 苯甲醇 5.93 7.15 9 正辛醛 3.49 31 1-甲基萘 3.34 6.16 10 2-壬酮 6.71 一 32 丙位辛内酯 7.32 7.05 11 乙二醇单丁醚 3.31 6.57 33 beta-紫罗酮 3.88 4.78 12 2-异丙基-3-甲氧基吡嗪 5.64 34 正庚酸 5.25 8.51 13 乙酸 2.22 5.09 35 正辛酸 6.09 6.16 14 2-乙基-1-己醇 4.39 4.93 36 正壬酸 8.49 6.68 15 2-茨酮 5.40 6.19 37 4-乙基苯酚 4.98 6.96 16 苯甲醛 4.87 6.85 38 4-丙基苯酚 2.67 7.51 17 2-甲氧基-3-异丁基吡嗪 6.02 6.01 39 正癸酸 8.62 5.79 18 丙酸 1.48 5.07 40 异丁香酚 3.02 9.39 19 3-乙基-4-甲基吡啶 4.99 3.81 41 香豆素 2.63 7.42 20 芳樟醇 5.66 4.15 42 月桂酸 6.65 4.92 21 异丁酸 5.29 9.50 43 香兰素 5.00 7.27 22 丁酸 2.91 5.45 结论 本方法使用岛津气味数据库结合 GCMS-TQ8050 NX 建立了甘松根中150种特征性气味成分 MRM 定量方法。利用 AOC-6000 SPME Arrow 进样，分析了野生和栽培甘松根中特征性气味成分。野生甘松根中筛查出43种气味成分，栽培甘松根中筛查出38种气味成分。实验结果说明，野生甘松根中至少有5种气味成分是独有的，在野生甘松根中含量明显高于栽培甘松根中含量的气味成分(含量倍数大于2)有9个。岛津气味数据库结合 GCMS-TQ8050 NX可用于甘松根特征性气味分析，量化栽培和野生中药材的气味成分差异，为道地药材的相关研究提供参考。 岛津应用云 本方法使用岛津气味数据库结合GCMS-TQ8050   NX建立了甘松根中150种特征性气味成分MRM定量方法。利用AOC-6000 SPME   Arrow进样,分析了野生和栽培甘松根中特征性气味成分。野生甘松根中筛查出43种气味成分，栽培甘松根中筛查出39种气味成分。实验结果说明，野生甘松根中至少有5种气味成分是独有的，在野生甘松根中含量明显高于栽培甘松根中含量的气味成分（含量倍数大于2）有9个。岛津气味数据库结合GCMS-TQ8050   NX可用于甘松根特征性气味分析，量化栽培和野生中药材的气味成分差异，为道地药材的相关研究提供参考。