药品中头孢菌素类抗生素检测方案

2020版药典头孢菌素类抗生素的测定 《2020版中国药典》中头孢菌素类抗生素的测定方法。 头孢菌素类抗生素是广泛使用的一种抗生素，属于β-内酰胺类，是7-氨基头孢烷酸(7-ACA)的衍生物，因此它们具有相似的杀菌机制。 本期测定项目如下： 1.头孢氨苄2.头孢丙烯希3.头孢拉定4.头孢硫脒5.头孢噻肟钠 6.头孢唑林钠7.头孢地尼8.头孢克肟9.头孢呋辛钠 1.头孢氨苄 有关物质测定： 色谱条件 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MGII S5；4.6 mmi.d.x250 mm 流动相： A)0.2 mol/L磷酸二氢容溶液(用氢氧化钠调节pH值到5.0)， B)甲醇，B 2%(0min)->2%(1.0min)->30%(20.0min)->2%(23.0min) ->2%(30.0min) 流速：1.0 mL/min温检 度：30℃ 测：UV 220 nm 进样量： 20pL 样品浓度：1.0mg/mL，溶剂为A相 色谱条件 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5； 4.6 mm i.d.x250 mm流动相：水-3.86%醋酸钠-4%醋酸 (742：15：3)/甲醇=83/17(药典方法甲醇含量为24%) 流速：1.0mL/min温检 度：35℃ 测：UV 254 nm 进样量：20pL 样品浓度：以头孢氨苄计1 mg/mL， 在80℃水浴中加热60min，冷却。 NH， 色谱条件 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5；4.6mmi.d.x250mm 流动相： A) 0.23%磷酸二氢铵 B)甲醇 B) 6%(0min)→6%(6min)→9%(11min)→11%(15min)→13%(30min)→20%(35min)→6%(40min)→6%(50min) 流速：1.0mL/min温检 度：35℃ 测：UV225 nm 进样量： 20pL 样品：0.75mg/mL， 溶剂为0.23%磷酸二二铵-甲醇(94：6) Minutes 色谱条件 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5； 4.6 mm i.d.x250 mm 流动相：磷酸二氢铵溶液(磷酸二氢铵20.7g溶于1800mL水，磷酸调pH=4.4)/乙腈=90/10 速：11..00 mL/min 度：35℃ 检测：UV 280nm 进样量： 10pL 样品浓度： 0.1mg/mL，溶剂为水 色谱条件 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6mm i.d.x250mm 流动相：水/甲醇/3.86%醋醋钠溶液14%醋酸溶液 =1564/400/30/6 流温检 速： 0.7mL/min 度： 40℃ 测： PDA220 nm 进样量： 50 pL 色谱条件 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5； 4.6 mm i.d.×250 mm流动相：磷酸盐缓冲液(取无水磷酸氢二钠2.76g， 枸橼酸1.29g，加水溶解并稀释成1000mL)/乙腈=86/14 流速：1.0mL/min温检 度：35℃ ：测： UV 254 nm 进样量：10pL 样品：取对照品适量，加水溶解并定容稀释制成释1mL中约含0.5mg的溶液，在90℃水浴中加热30mins， 放冷。 HO ic 1.头孢硫脒(M.W.472.58)Cefathiamidine 0 色谱条件 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MG S5；4.6 mm i.d.x250 mm 流动相：磷酸盐缓冲液(取无水磷酸氢二钠2.76g， 枸橼酸1.29g， 加水溶解并稀释成1000mL)/乙腈=80/20 流速： 1.0 mL/min温检 度：35℃ 测： UV 254 nm 进样量： 10pL 样品：取对照品适量，加水溶解并定容稀释制成每1mL中约含0.5mg的溶液，在90℃水浴中加热30mins，放冷。 色谱条件 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6mm i.d.×250mm 流动相：A0.05mol/L磷酸缓冲盐溶液/甲醇=86/14B 0.05mol/L磷酸缓冲盐溶液/甲醇=60/40先以A/B=95：5等度洗脱，待头孢噻肟洗脱完毕之后立即执行下列梯度B 5%(0min)-25%(2min)-25%(8min)-100%(23min)-100%(28min)-5%(33min)-5%(43min) 进样量：10pL 色谱条件 色谱柱： CAPCELL PAK C18 MGII S5； 4.6 mm i.d.×150 mm 流动相：A)磷酸氢二钠2.91g，磷酸二氢钾0.71g溶于1000mL水中，B)乙腈，B 2%(0min)->2%(2.0min)->15%(4.0min)->40%(10.0min) ->65%(11.5min)->65%(12.0min)->2%(15.0min)->2%(21.0min) 速： 1.2mL/min 月度：45℃ 检测： UV 254 nm 进样量：10pL 样品浓度：0.1mg/mL，溶剂为流动相 O 0H 色谱条件 色谱柱： CAPCELL PAK C18 AQ ；4.6mm i.d.x250mm 流动相：A0)0.25%四甲基氢氧化铵(磷酸调pH至5.5)，每1000ml加入0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠0.4mL B)0.25%四甲基氢氧化铵(磷酸调pH至5.5)：乙腈：甲醇=500：300：200，每1000ml加入0.1mol/L乙二胺四醋酸二钠0.4ml B) 5%(0min)-5%(2min)-25%(25min)-50%(42min)-5%(43min)-5%(60min) 流速： 0.85 mL/min温检 度：40℃ 测：PDA 254 nm 进样量：20pL 注：头孢地尼峰保留时间约为22min， 与破解所得杂质J质分离度为1.23大于药典标准1.2. 杂质I和杂质J分离度为2.35，杂质K和杂质L分离度为1.84，头孢地尼峰与杂质K峰分离度为2.68 H.N N 色谱条件 色谱柱： CAPCELL PAK MG II S3；4.6 mm i.d.×150 mm流动相：A：四丁基氢氧化铵溶液(10%四丁基氢氧化铵25mL， 加水1000mL，摇匀，用1.5mol/L磷酸溶液调节pH至7.0) B： 乙腈 A：B=76：24(原条件为72：28) 流速：1.0mL/min温检 度：40℃ 测： PDA254nm 进抹量： 20pL 注：图中所示数字为分离度，系统适用性和有关物质实验中主峰与主蜂前(E)异构体分离度均满足药典要求： Na' 色谱条件 色谱柱： CAPCELL PAK C8 UG120 S5；4.6mm i.d.×250mm 流动相：A)醋酸盐缓冲液 B)乙腈B)5%(0min)-20%(40min)-40%(50min)-5%(51min)-5%(55min) 流速：：1.5mL/min温度：35℃检测： PDA 273 nm 进样量：20pL 注：图上数字所示为分离度，头孢包辛峰与破解所得去氨甲酰头孢呋辛分离度大于3.0，头孢呋辛与后相邻杂质质分离度大于1.5，均满足药典要求。 Na T 0.0 Minutes 色谱条件 色谱柱： CAPCELL PAK C8 UG120 S5；4.6mm i.d.x250mm 流动相：醋酸盐缓冲液/乙腈=88/12(药典方法为85/15) 流速： 1.0mL/min温检 度：35℃ 测： UV 273 nm 进样量：20pL 注：图上数字所示为分离度，头孢呋辛辛与去氨甲酰头孢孢辛的分离度达到3.0，头孢呋辛峰与相对保留时间为1.1处杂质峰分离度符合要求。 2020版《中国药典》 头孢菌素类抗生素的测定 《2020版中国药典》中头孢菌素类抗生素的测定方法。头孢菌素类抗生素是广泛使用的一种抗生素，属于β-内酰胺类，是7-氨基头孢烷酸(7-ACA)的衍生物，因此它们具有相似的杀菌机制。 本期测定项目如下： 1. 头孢氨苄  2. 头孢丙烯  3. 头孢拉定  4. 头孢硫脒5. 头孢噻肟钠6. 头孢唑林钠7. 头孢地尼8. 头孢克肟9. 头孢呋辛钠 1.头孢氨苄有关物质测定： 含量测定： 2.头孢丙烯(E)/(Z)异构体有关物质测定： 含量测定： 3.头孢拉定有关物质测定： 4.头孢硫脒有关物质测定： 含量测定： 5.头孢噻肟钠有关物质测定： 6.头孢唑林钠有关物质测定： 7.头孢地尼有关物质测定： 8.头孢克肟有关物质测定&含量测定 9．头孢呋辛钠有关物质测定： 含量测定：