蜂蜜中杀虫脒及其代谢产物检测方案(浓缩仪)

自动化样品前处理解决方案-RK-2020 解决方案 蜂蜜中的杀虫脒及其代谢产物的测定 全自动固相萃取；高效液相色谱-串联质谱；杀虫脒 介绍 杀虫脒是一种高效广谱有机氮农业杀虫药和杀螨药，对有机磷、有机氯和氨基甲酸酯类杀虫药有抗药性的虫类均有效。杀虫脒在水中溶解度小，强酸中比较稳定，而在弱酸和弱碱溶液中迅速水解。2019年12月27日，杀虫脒被列入食品动物中禁止使用的药品及其他化合物清单。 对于蜂蜜中杀虫脒残留量的检测现主要依据GB 23200.96-2016 《蜂蜜中杀虫脒及其代谢产物残留量的测定液相色谱-质谱质谱法》。本方法参考上述标准，样品用氢氧化钠水溶液提取，固相萃取柱净化，最后用30%的乙腈水溶液复溶，经高效液相色谱-串联质谱进行检测。 图-1.杀虫脒的结构式 1.仪器和耗材 仪器 Raykol Fotector Plus 高通量全自动固相萃取 Agilent 1260+6410MSD 高效液相色谱-串联质仪 谱 Raykol Auto EVA mini 全自动平行浓缩仪 耗材 HLB 固相萃取柱(RayCureHLB， 60mg/3mL，货 号： RC-204-36473)试剂 甲醇(优级纯) 硫酸(优纯级) 乙腈(优级纯) 30%乙水溶液：将30mL乙腈与70mL水混 氢氧化钠(优级纯) 合 2.样品制备 准确称量1g(精确至0.01g)样品装装15mL离心管中，加入10 mL 0.02mol/L氢氧化钠溶液， 涡旋混匀，待净化。 2.1净化 用3mL甲醇和3mL水活化 HLB 固相萃取柱，上样弃去流出液，用3mL水清洗样品管，过柱。然后用3mL水和1 mL 10mmol/L硫酸溶液淋洗小柱，弃去流出液后吹干小柱。用2mL乙腈洗脱柱子，收集洗脱液于5 mL 离心管中。将洗脱液于室 温下用 Auto EVA mini 全自动平行浓缩仪吹至近干，然后准确加入1 mL 30%乙腈水溶液溶解残渣，过0.22 um 滤膜经 LCMSMS分析。具体的固相萃取方法见图3. 2.2固相萃取净化条件 全自动固相萃取仪 Raykol Fotector Plus 固相萃取柱 HLB (RayCure， 60mg/3mL) 活化 甲醇、水 洗脱 乙腈 序号 命令 溶剂 排出 (mL/min) 时间 1 清洗样品通道 甲醇 2.8 2 活化 甲醇 有机废液 2 3 1.9 3 活化 水 废水 2 3 1.9 4 上样 废水 2 11 6.4 5 清洗样品瓶 水 废水 60 3 2.3 6 淋洗 水 废水 2 3 1.9 7 淋洗 10 mmol/L硫酸 废水 1 1 1.3 8 气推 废水 80 30 2.2 9 清洗注射泵 乙腈 60 5 0.5 10 洗脱 乙腈 收集 1 2 2.4 11 气推 收集 1 2 2.4 12 气推 收集 30 5 0.7 13 结束 Fotector Plus 高通量全自动固相萃取仪 3.液质检测条件 3.1液相条件 Column 色谱柱 Eclipse SB C18， 50mm × 2.1mm， 1.8pm Column oven 柱温 30°C Flow rate 流速 0.5 mL/min Injection volume 进样量 10pL 3.2液相梯度洗脱条件 时间/min 流动相A(0.1%甲酸溶液) 流动相B(乙腈) 0.0 70% 30% 2.0 70% 30% 4.0 5% 95% 7.0 5% 95% 7.1 70% 30% 13.0 70% 30% 3.3质谱仪器参数 离子源 电喷雾源 电离模式 多离子反应监测(负)模式 喷雾针压力 45 psi 喷雾加热区电压 干燥气(氮气)温度 1500V 325℃ 干燥气流速 5L/min 鞘气温度 350℃ 鞘气流速 10L/min 毛细管电压 4000V 增益电压 600V 3.4 MRM参数 No. 序号 Compound Name化合物名称 Precursor Ion 母离子 Product Ion 子离子 Dwell离子监测时间 Fragmentor裂解电压 Collision Energy 碰撞能量 1 杀虫脒 197.1 117.1* 50 130 29 125 50 130 33 2 4-氯邻甲苯胺 142 125* 50 118 21 106.7 50 118 21 4. 结果与讨论 为了验证该方法的回收率，本实验向百花蜜样品(1 g)中加入杀虫脒和4-氯邻甲苯胺标准品进行加标回收验证(n=4)，数据如表-2所示。加标回收 率在84.0-103.5%之间， RSD 值控制在10%以内。说明该方法能够很好地运用于百花蜜样品中杀虫脒及其代谢物的检测。 表-2.百花蜜样品的的标回收率及 RSD 值 序号 化合物 添加浓度ug/kg 回收率(%)样品-1 回收率(%)样品-2 回收率(%)样品-3 回收率(%)样品-4 平均回收率(%) RSD(%) 1 杀虫脒 10 94.3% 86.6% 92.4% 84.0% 89.3% 5.4% 4-氯邻甲苯胺 10 88.1% 103.5% 93.9% 90.7% 94.1% 7.2% 5.总结 本解决方案操作方便、提取和浓缩效率高、回收率好。符合 GB 23200.96-2016《蜂蜜中杀虫脒及其代谢产物残留量的测定液相色谱-质谱质谱法》要求。 Auto EVA mini 全自动平行浓缩仪可以自动完成至多96个小体积样品的浓缩，独特的氮气加热模式可实现离心管(PP材质)中溶液的快速浓缩， 对于2 mL色谱瓶和1-2 mL 离心管中溶液的浓缩也能很好的支持； Fotector Plus 高通量全自动固相萃取仪采用全自动操作，可以排除人员操作带来的误差，从活化到上样、洗脱一步到位，六通道同时进行；同时Fotector Plus 能够实现高通量处理，最多一天能够处理180个样品，省时省力，真正为批量检测提供帮助。 全自动平行浓缩仪 浓缩 高通量全自动固相萃取仪净化 Raykol 睿科集团股份有限公司 RayKol Group Corp.， Ltd. 网址： www.raykol.com 电话：400-885-1816 邮箱： info@raykol.com 本文中的信息、说明和技术指标如有变更，恕不另行通知◎睿科集团股份有限公司 2020年10月版 邮箱： info@raykol.com网址：www.raykol.com热线： 网址：www.raykol.com邮箱： info@raykol.com热线： 杀虫脒是一种高效广谱有机氮农业杀虫药和杀螨药，对有机磷、有机氯和氨基甲酸酯类杀虫药有抗药性的虫类均有效。杀虫脒在水中溶解度小，强酸中比较稳定，而在弱酸和弱碱溶液中迅速水解。2019年12月27日，杀虫脒被列入食品动物中禁止使用的药品及其他化合物清单。对于蜂蜜中杀虫脒残留量的检测现主要依据GB 23200.96-2016 《蜂蜜中杀虫脒及其代谢产物残留量的测定 液相色谱-质谱 质谱法》。本方法参考上述标准，样品用氢氧化钠水溶液提取，固相萃取柱净化，最后用30%的乙腈水溶液复溶，经高效液相色谱-串联质谱进行检测。