乳酸菌中活性检测方案(喷雾干燥机)

来亨科学仪器Laiheng Lab-Equipment 多孔淀粉在喷雾干燥乳酸菌微胶囊制剂上的应用 定义： 多孔淀粉又名微孔淀粉，是一种新型的变性淀粉，它是具有生淀粉酶活力的酶在低于糊化温度下作用于生淀粉而形成的多孔性蜂窝状产物。 微孔淀粉表面布满直径为 1pm左右的小孔，小孔由表面向中心深入，孔的容积占颗粒体积的50%左右。 将天然生淀粉经过水解外理以后，在其颗料表面形成小孔，并一直延伸到颗粒内部，是一种类似马蜂窝状的中空颗粒，可以盛装各种物质于其中，具有良好的吸附性。 景盛南二街33号4号楼4层 多孔淀粉是一直在自然界中存在的物质，上世纪七、八十年代，学者们在动物粪便、淀粉发酵生产酒精、葡萄糖等的剩余物中存在成孔状的淀粉颗粒。 用途 多孔淀粉是一种具有高科技含量的新型有机吸附剂和包埋材料，广泛用于医药、农药、印刷、日用化工、化妆品和食品行业。 常用制备方法 ①物理方法：超声波照射法和喷雾法； ②机械方法：机械撞击法； ③生化方法：醇变性法、酸水解法、和酶水解法。 一、实验材料 玉米淀粉 糖化酶 色拉油淀粉酶 柠檬酸 二、实验试剂 磷酸氢二钠氢氧化钠 甲苯表乙醇 三、实验仪器 喷雾干燥机 电子天平 真空泵 旋转蒸发仪 水浴锅 分光光度计 销售中心：北京丰台区丰北路甲45号鼎恒中心6A 景盛南二街33号4号楼4层 四、实验方法 1.生淀粉酶活力测定 2.5%生玉米淀粉悬液 2.0ml 加入到50ml三角瓶，加PH3.5的0.2%磷酸氢二钠和 0.1%柠檬酸缓冲液 2.0ml， 40度预热10min， 加入1.0ml适当稀释的酶液，在40度恒温下振荡反应 30min 后，加4%氢氮化钠溶液 0.5ml终止反应，反应液用 3000r/min 离心 20min，上层清液用DNS 法测还原糖。 酶活定义：在以上分析条件下，1h释放1mg葡萄糖的酶量为一个洛力单位。 2.多孔淀粉产物得率测定 称取表面培养皿重量，加入水解得到的湿多孔淀粉，在60度常压干燥，称取总重量，两者的重量差即为反应后多孔淀粉的重量，再除以反应前淀粉的重量，即可得到多孔淀粉产物得率。 3.多孔淀粉吸油率测定 称取多孔淀粉B克，恒温下与5ml大豆色拉油混合搅拌30min，置于已知重量Cgr砂漏斗抽滤，直至没有液滴滴下，根据砂芯忍埚重量D克，计算吸油率A%： A%=(D-B-C)/B 4.酶作用的协同效应 分另经糖化酶、淀粉酶和复合酶伤脑筋淀粉颗粒，每隔4h 取样，测定各自在不同反应时间的吸油率，比较淀粉颗粒在不同酶作用下成孔情况，验证双酶复合作用。 销售中心：北京丰台区丰北路甲45号鼎恒中心6A 5.多孔淀粉酶解工艺 20g生淀粉加入到 250ml 三角瓶中，加PH4.6的0.2mol/L磷酸氢二钠和 0.1mol/L柠檬酸缓冲液 40ml，滴入1滴甲苯，加入适当稀释酶液，在40度恒温下振荡反应 24h后，离心分离上清液，沉淀在60度下常压干燥，粉碎即可。 结论： 低温时酶反应速度缓慢，随温度升高而反应加剧，55度时吸油率最高，由于酶的热变使酶失活，在65度时酶大部分失活，最佳反应温度为55度，由于双酶的最高耐受温度不一样，耐高温淀粉酶在60时反应增强，但糖化酶逐渐失活，总体上看60时酶解不充分，多也淀粉吸油率下降。 淀粉酶和糖化酶双酶比为8：1，温度55度，反应时间28h， PH5.6，喷雾干燥进风口112度，出风口52度。 从电镜SEM图片分析，包被后乳酸菌被藏在多孔淀粉的孔穴中，外边的孔被封住，大部分多孔淀粉颗粒被包上一层膜，从而双重保护了孔穴中的乳酸菌。这种喷雾干燥法生产的微胶囊化乳酸菌粉抗逆能力、货架时间明显好于直接吸附形成的微胶囊乳酸菌产品。 北京来亨科学仪器有限公司 销售中心：北京丰台区丰北路甲45号鼎恒中心6A 技术中心：北京金桥科技产业基地 景盛南二街33号4号楼4层 北京来亨科学仪器有限公司销售中心：北京丰台区丰北路甲鼎恒中心A技术中心：北京金桥科技产业基地 北京来亨科学仪器有限公司技术中心：北京金桥科技产业基地  定义：多孔淀粉又名微孔淀粉，是一种新型的变性淀粉，它是具有生淀粉酶活力的酶在低于糊化温度下作用于生淀粉而形成 的多孔性蜂窝状产物。 微孔淀粉表面布满直径为1μm左右的小孔，小孔由表面向中心深入，孔的容积占颗粒体积的50%左右。 将天然生淀粉经过水解外理以后，在其颗料表面形成小孔，并一直延伸到颗粒内部，是一种类似马蜂窝状的中空颗粒，可以盛装各种物质于其中，具有良好的吸附性。多孔淀粉是一直在自然界中存在的物质，上世纪七、八十年代，学者们在动物粪便、淀粉发酵生产酒精、葡萄糖等的剩余物中存在成孔状的淀粉颗粒。 用途多孔淀粉是一种具有高科技含量的新型有机吸附剂和包埋材料，广泛用于医药、农药、印刷、日用化工、化妆品和食品行业。 常用制备方法①物理方法:超声波照射法和喷雾法;②机械方法:机械撞击法;③生化方法:醇变性法、酸水解法、和酶水解法。 一、实验材料玉米淀粉    糖化酶  色拉油  淀粉酶   柠檬酸     二、实验试剂       磷酸氢二钠  氢氧化钠  甲苯  乙醇 三、实验仪器喷雾干燥机       电子天平    真空泵   旋转蒸发仪   水浴锅   分光光度计 四、实验方法1.生淀粉酶活力测定   2.5%生玉米淀粉悬液2.0ml加入到50ml三角瓶，加PH3.5的0.2%磷酸氢二钠和0.1%柠檬酸缓冲液2.0ml，40度预热10min，加入1.0ml适当稀释的酶液，在40度恒温下振荡反应30min后，加4%氢氮化钠溶液0.5ml终止反应，反应液用3000r/min离心20min，上层清液用DNS法测还原糖。 酶活定义：在以上分析条件下，1h释放1mg葡萄糖的酶量为一个洛力单位。 2.多孔淀粉产物得率测定 称取表面培养皿重量，加入水解得到的湿多孔淀粉，在60度常压干燥，称取总重量，两者的重量差即为反应后多孔淀粉的重量，再除以反应前淀粉的重量，即可得到多孔淀粉产物得率。 3.多孔淀粉吸油率测定称取多孔淀粉B克，恒温下与5ml大豆色拉油混合搅拌30min,置于已知重量Cgr砂漏斗抽滤，直至没有液滴滴下，根据砂芯坩埚重量D克，计算吸油率A%：A%=（D-B-C)/B 4.酶作用的协同效应分另经糖化酶、淀粉酶和复合酶伤脑筋淀粉颗粒，每隔4h取样,测定各自在不同反应时间的吸油率，比较淀粉颗粒在不同酶作用下成孔情况，验证双酶复合作用。5.多孔淀粉酶解工艺20g生淀粉加入到250ml三角瓶中，加PH4.6的0.2mol/L 磷酸氢二钠和0.1mol/L柠檬酸缓冲液40ml,滴入1滴甲苯，加入适当稀释酶液，在40度恒温下振荡反应24h后，离心分离上清液，沉淀在60度下常压干燥，粉碎即可。 结论：低温时酶反应速度缓慢，随温度升高而反应加剧，55度时吸油率最高，由于酶的热变使酶失活，在65度时酶大部分失活，最佳反应温度为55度，由于双酶的最高耐受温度不一样，耐高温淀粉酶在60时反应增强，但糖化酶逐渐失活，总体上看60时酶解不充分，多也淀粉吸油率下降。 淀粉酶和糖化酶双酶比为8：1，温度55度，反应时间28h，PH5.6,喷雾干燥进风口112度，出风口52度。 从电镜SEM图片分析，包被后乳酸菌被藏在多孔淀粉的孔穴中，外边的孔被封住，大部分多孔淀粉颗粒被包上一层膜，从而双重保护了孔穴中的乳酸菌。这种喷雾干燥法生产的微胶囊化乳酸菌粉抗逆能力、货架时间明显好于直接吸附形成的微胶囊乳酸菌产品。