水产品中腹泻性贝毒-鳍藻毒素-1检测方案(液相色谱仪)

LAAN-A-LM-C015 ApplicationnNo.C104News岛津企业管理(中国)有限公司岛津(香港)有限公司http：//www.shimadzu.com.cn用户服务热线电话： 800-810-0439第一版发行行：2015年4月400-650-0439 ApplicationNeWsNo.C104 LC/MSLiquid Chromatography Mass Spectrometry 使用三重四极杆LC/MS/MS 测定腹泻性贝毒 Analysis of Diarrhetic Shellfish Toxin Using Triple Quadrupole LC/MS/MS [LCMS-8050] 日本厚生劳动省于1980年7月规定，将小白鼠生物检测法(Mouse Bioassay，以下简称为 MBA 法)作为检测腹泻性贝毒(Diarrhetic Shellfish Toxin) 的法定方法，并且还规定了允许暴露值(每克可食部分的含量为 0.05MU*)。对于超过此允许暴露值的贝类，根据日本食品卫生法第6条第2号的规定，将禁止销售。 从1980后仪器技术取得了长足发展，MBA 方法的灵敏度与准确性远不如目前用的高准确、高灵敏度的液相色谱-质谱分析仪器法。整个欧盟于2015年1月将用仪器分析法取代 MBA 法来测试DST。 基于这种国际趋势下，日本厚生劳动省正在考虑建立一种仪器分析法，并设定新的参考值以适用于仪器分析法；还有国际食品法典标准中冈田酸的介绍(OA，参考资料1)。 表1国际食品法典标准CODEX STAN 292-2008 OA群(OA及 DTX群) 图1为使用LC/MS/MS 法对冈田酸(OA)、鳍藻毒素-1(DTX1)、扇贝毒素群(PTX1、2、6)和虾夷扇贝毒素-1(YTX1)进行高灵敏度分析的结果。由图可知，可对各成分进行高效分离。 图2为OA的标准样品色谱图(MRM)；图3为 DTX1的标准样品色谱图(MRM)。 *小白鼠食用20g可食部分后，24小时以内3只老鼠中有2只以上死亡的毒量。 图3鳍藻毒素-1(DTX1) 的 MRM色谱图 MRM Chromatograms of Dinophysistoxin1 (DTX1) 图4为OA 和 DTX1的示准曲线。由图可知，回归系数为0.9999以上，表示线性良好。其他4种成分也得到了类似的线性。 综上所述，使用 LC/MS/MS 可以对贝毒进行高灵敏度高精度分析，这是非常有效的分析方法。今后有望成为主要的分析方法以替代当前的 MBA 法。 图4冈田酸和鳍藻毒素-1的标准曲线 Calibration Curves of OA and DTX1 表2分析条件 Analytical Conditions 色谱柱 ： InertSustain C8 (50 mm L.×2.1 mm l.D.， 3 um) 流动相 ：AA2 mmol/L甲酸铵-水(用氨水将 pH值调整为8.5) ：B甲醇 时间程序 ：20%B(0 min)-100 %B (10 min)-20 %B(10.01 min)- STOP (15 min) 流速 ： 0.2 mL/min 柱温 ：40℃ 进样体积 ： 10pL 离子源电压 ： +4.0 kV/-3.0 kV(ESI-正离子/负离子模式) DL 温度 ：200°C 加热模块温度 ：400℃ 接口温度 ：350℃ 雾化气流速 ： 3L/min 干燥气流速 ： 10L/min 加热气流速 ： 10L/min MRM 离子对 ：(+)PTX6 906.50>835.40， PTX1 892.60>821.40， PTX2 876.50>805.40 ：(-)OA 803.50>255.20，YTX1 1141.50>1061.30， DTX1 817.50>255.20 腹泻性贝毒标准样品由日本独立行政法人水产综合研究中心中央水产研究所的铃木敏之博士提供。 引用资料1：2014年7月日本食品安全委员会《自然毒评价书双壳贝类中的冈田酸群》 http：//www.fsc.go.jp/fsciis/evaluationDocument/list?itemCategory=009 免责声明： *本资料未经许可不得擅自修改、转载、销售； ( *本资料中的所有信息仅供参考，不予任何保证。 ) ( 如有变动，恕不另行通知。 ) 使用LCMSMS可以对贝毒进行高灵敏度、高精度分析。这是非常有效分析方法。今后有望成为主要分析方法以代替当前MBA法。使用LCMSMS对冈田酸、鳍藻毒素-1、扇贝毒素群、虾夷扇贝毒素-1进行高效分离检测。