食品中糖类检测方案

使用氨基柱分析食品中的糖类 摘要 对几种常见的低分子量的糖类进行了分析，实验采用了比较便宜的常规分析柱氨基柱作为分离手段，并研究了该方法的稳定性。 关键词 HPLC 低分子量糖类氨基柱 糖是自然界分布最广泛的有机化合物群之一，是生物的能源，具有非常重要的作用。糖主要分布在植物、食品中，是决定食品风味的最主要的成分之一，因此，糖类的分析具有非常重要的意义。目前，糖类分离的手段主要是采用液相色谱，检测手段主要为示差折光检测器。 糖的种类非常的庞大，从分子量来看，有从分子量仅为180的单糖到分子量为几百万的多糖，即使同样的单糖，还包含各种各样的不同糖类，如葡萄糖，氨基糖，山梨糖醇，糖醛酸等，而且它们还有多种异构体。因此，分析糖类有不同的分离方法和检测方法。多糖主要采用凝胶色谱法；分离单糖和低聚糖主要采用分配色谱法和配位体交换色谱法。检测手段绝大部分为示差折光检测器。本实验采用了比较便宜的分离柱氨基柱 Asahipak NH2-50 4E为分离手段，并研究了该方法的稳定性。 仪器 LC-Vp系统 包括脱气机 DGU14A； 泵LC-10ADvp (1 台)； 自动进样器 SIL-HTC； 柱温箱 CTO-10Avp；示差折光检测器 RID-10A 分析条件 分析柱： Asahipak NH2-50 4E (内径 4.6mm×长250mm) 保护柱： Asahipak NH2-50G 4A (内径4.6mm×长10mm) 流动相：乙睛：水 (7：3) 流量：0.8mL/min 柱温：40℃ RID池温：40C 检测时间：：15min 进样体积：10uL 标 葡萄糖，果糖，蔗糖，棉子糖 标样配制 将葡萄糖，果糖，蔗糖，棉子糖标样溶解于水中，配制成 25mg/mL、20mg/mL、15mg/mL、10mg/mL 和 5mg/mL 的混标进。各进样10pL， 各重复2次。分别制作各组分的标准曲线。并计算各组分的相关系数和最低检出限。结果见表1。 精密度试验 取 15mg/mL的混标样，进样10pL，连续测定6次，色谱图如图1。各组分保留时间和面积的相对标准偏差见表2。 实际样品分析 称取样品大枣提取液 50mg， 溶解于1mL水中，0.45um膜过滤后，进样10pL， 重复3次。色谱图见图2. 结果讨论 表1糖标准样品线性及最低检出限 回归方程 相关系数 最低检测限 LOD (mg/ml) 果糖 Y=1.46×10X-0.035 0.9997 0.18 葡萄糖 Y=1.89×10*X-0.14 0.99996 0.57 蔗糖 Y=1.946×10X-0.26 0.99991 0.03 棉子糖 Y=0.31×10X+0.12 0.99997 0.14 实验可以看出，该方法的稳定性良好，对实际样品进行检测也得到了很好的结果。 号 图1糖标准样品的色谱 图2实际样品色谱图 表2 精密度实验结果 重复性 果糖 葡萄糖 蔗糖 棉子糖 保留时间 1 5.804 6.875 8.299 12.035 2 5.797 6.878 8.296 12.014 3 5.785 6.859 8.280 12.026 4 5.772 6.848 8.272 12.026 5 5.862 6.933 8.267 11.943 6 5.862 6.874 8.283 12.067 平均 5.813 6.876 8.283 12.014 RSD/% 0.668 0.429 0.152 0.314 面积 1 869505 801027 918445 747302 2 887332 829150 935894 772964 3 870326 812294 921689 756541 4 880015 809956 919942 770132 5 875419 814235 932021 759981 6 869991 802516 923510 760213 平均 875431 811529 925250 761189 RSD/% 1.44 2.44 1.33 2.39