人血白蛋白中蛋白氮检测方案(定氮仪)

K-231-20712 海能仪器：'：凯氏定氮法测定人血白蛋白中的蛋白氮含量 i前言 人血白蛋白是由健康人血浆，经过低温乙醇蛋白质分离法或经批准的其他分离法分离纯化，并经60℃10小时加温灭活病毒后制成。其中蛋白质含量是其需要检定的指标之一，本实验参照药典中的方法使用全自动凯氏定氮仪奴其蛋白质含量进行测定。 2仪器与试剂 2.1仪器 K1100F全自动凯氏定氮仪， SH420F 石墨消解仪，分析天平。 2.2试剂 硫酸(分析纯)， 20g/L硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠。 3实验方法 3.1样品制备 3.1.1非蛋白氮供试品溶液的制备 精密量取供取品2mL， 加水14mL， 10%钨酸钠溶液 2mL ， 0.33moL/L 硫酸溶液2mL，摇匀，静置30分钟，过滤，弃去初滤液，取续滤液作为非蛋白氮供试溶液。 3.1.2总氮供试品溶液的制备 取混合好的供试品，精确量取2.5mL， 置10mL容量瓶中，用水稀释到刻度，作为总氮供试品溶液. 3.2取样 分别精确量取1mL制备好的总总溶液及 1mL非蛋白氮溶液加入消化管中各加入0.3g硫酸钾与30%硫酸铜水溶液5滴，再沿瓶壁滴加硫酸2.0ml。 3.3消解 表1消解参数设置 阶段 温度/℃ 保持/min 200 20 2 300 20 3 420 60 3.4测试 待样品消解结束，上机测试。 表2定氮仪参数设置 硼酸 稀释水 碱液 蒸馏量 蒸汽流量 滴定酸 25mL 10mL 10mL 5min 100% 0.1010mol/L 4测试结果 4.1实验结果 表3人血白蛋白中氮含量的测试数据 样品名称 取样体积mL 滴定体积 mL 氮含量% 平均值% 含量 mg/mL 非蛋白氮试样 0.0539 0.0019 0.0029 0.29 0.0559 0.0022 0.0732 0.0046 0.0620 0.0030 5.7191 0.8021 总氮试样 5.7385 0.8048 0.8062 32.248 5.7537 0.8070 5.7822 0.8110 蛋白氮含量=(32.248-0.29)×6.25=199.7375mg/mL 4.2结论 从实验结果可以看到，采用 K1100F凯氏定氮仪可以准确的检测人血白蛋白中的总氮含量。样品中非蛋白氮含量较低，可能会影响结果平行性。 ( 参考文献 ) ( [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].四部.北京：中国医药科技出版社，2015：附录0731蛋白质含量测定第一法凯氏定氮法 ) -- -- 1 1 前言人血白蛋白是由健康人血浆，经过低温乙醇蛋白质分离法或经批准的其他分离法分离纯化，并经60℃10小时加温灭活病毒后制成。其中蛋白质含量是其需要检定的指标之一，本实验参照药典中的方法使用全自动凯氏定氮仪对其蛋白质含量进行测定。2 仪器与试剂2.1仪器K1100F全自动凯氏定氮仪，SH420F石墨消解仪，分析天平。2.2试剂硫酸（分析纯），20g/L硼酸溶液，溴甲酚绿-甲基红混合指示剂，40%氢氧化钠。