珍珠米中酸水解氨基酸检测方案(氨基酸分析仪)

Biochrom30+氨基酸分析仪检测珍珠米中酸水解氨基酸 一、样品前处理 1、 所用试剂 1、1 浓盐酸：浓度≥36%，优级纯 1、2 6mol/L盐酸：取500mL盐酸加水稀释至1000ml， 混匀。 1、3 水：去离子水 1、 4 苯酚：须重蒸 1、、5 17种氨基酸标准品 行号 氨基酸 行号 氨基酸 1 Asp 天冬氨酸 2 Thr 苏氨酸 3 Ser 丝氨酸 4 Glu 谷氨酸 5 Pro 脯氨酸 6 Gly 甘氨酸 7 Ala 丙氨酸 8 Cys 胱氨酸 9 Val 缬氨酸 10 Met 蛋氨酸 11 lle 异亮氨酸 12 Leu 亮氨酸 13 Tyr 酪氨酸 14 Phe 苯丙氨酸 15 His 组氨酸 16 Lys 赖氨酸 17 Arg 精氨酸 2、 标样配置 氨基酸混合标准储备液：含有天冬氨酸、苏氨酸等17种常见组成蛋白质的氨基酸。 将17种氨基酸混合标准储备液与 PH2.2的柠檬酸缓冲液按照 1：9 配置成0.25umol/L 的标准品待用。 3、 前处理设备 1) 天平 2) 水解管 3) 量筒 4 无油真空泵 5) 电热鼓风恒温箱 6) 移液管 7 0.45um滤膜 4、 样品制备(参考国参 GB/T5009.124-2016) 酸水解法： 称取107.6mg的试样，于20mL安培瓶中，加入10mL6mol/L 盐酸置液氮中冷冻，然后，抽真空至至 OPa 后充入高纯氮，再抽真空充氮气3次，在充氮气情况下封口。将水解管放入电热鼓风恒温箱中，110℃水解22h， 冷却、混匀、开管、定容到50ml容量瓶中，用移液管取取 2ml 样品溶液在加热板上50℃蒸干，必要时加入少许水，重复吹干1-2次，用2mL PH2.2的上机用柠檬酸钠缓冲液溶解，混匀、过滤后上机。 二、分析方法描述(Biochrom 30+) 氨基酸分析仪分析方法参数： 1) 色谱柱： Biochrom Na 型阳离子交换树脂柱， 4.6×20cm 2) 分离程序： NO. Time Temp Buffer Pump Nin Rec Commands 1 01：00 43 1 35.0ml/h ON OFF 2 00：00 43 1 35.0ml/h ON OFF Reset 3 01：00 43 1 35.0ml/h ON OFF Load 4 06：40 43 1 35.0ml/h ON ON 5 13：00 52 2 35.0ml/h ON ON 6 01：00 52 5 35.0ml/h ON ON 7 16：00 95 5 35.0ml/h ON ON 8 04：00 95 6 35.0ml/h ON ON 9 04：00 95 1 35.0ml/h ON ON 10 09：00 43 1 40.0ml/h OFF OFF 11 02：00 43 1 35.0ml/h ON OFF End 3) 运行时间：经分析时间+再生时间 57min 4) 反应单元温度：135℃。 5) 检测波长：570nm、440nm同时检测。 附、珍珠米酸水解氨基酸分析图谱及做样结果 回 房 0 5 10 15 20 25 30 35 4 0 45Mmute= 570nm Resultg Pk # Name Retention Time Area ESTD concentration(mg/100g) 7 Asp 8.466 2414590 756.844 8 Thr 10.166 1046808 282.425 9 Ser 11.033 1838780 432.759 11 Glu 13.366 4687428 1528.548 15 Gly 19.299 2179992 354.574 16 Ala 20.532 2012980 442.607 18 Val 22.565 1621054 449.019 19 Met 24.432 646270 201.249 20 Ile 25.965 1051278 345.374 21 Leu 26.965 2321056 689.957 24 Tyr 29.931 996688 445.948 25 Phe 30.931 1195643 440.736 30 His 36.198 584867 170.662 32 Lys 38.064 941457 271.828 38 Arg 45.930 1976211 741.179 Totals 440nm Results Pk # Name Retention Time Area ESTD concentration(mg/100g) 3 Pro 14. 766 533031 349.892 Totals 533031 349.892 更多应用，关注“大昌华嘉科学仪器部公众号” 生命的产生、存在和消亡，无一不与蛋白质有关，可以说，它是生命的重要要素。而蛋白质的基本单位是氨基酸。氨基酸与生物的生命活动有着密切的关系，生物体需要摄入定量的氨基酸用以维持机体代谢的正常进行，所以氨基酸在食品、营养品、药品和饲料中的应用非常广泛。Biochrom公司具有40年专业氨基酸分析制造经验的生产；本文主要介绍如何应用英国Biochrom30+氨基酸分析仪检测珍珠米中酸水解氨基酸。