食品接触材料中三聚氰胺检测方案(液相色谱柱)

高效液相色谱法检测食品接触材料中三聚氰胺的迁移量 三聚氰胺 Melamine 【基本信息】 三聚氰胺俗称密胺、蛋白精，对身体有害，不可用于食品加工或食品添加物。按照食品国家安全标准(GB31604.15-2016)，在用做食品包装材料时，需要测定三聚氰胺的迁移量，在此用自来水、0.1%柠檬酸、65%乙醇作为水性、酸性、酒精类食品模拟物对三聚氰胺进行高效液相色谱的检测。 【溶液的配制】 1、磷酸二氢钠缓冲溶液(0.005mol/L， pH=6.5)配制：称取 0.78 g 二水合磷酸二氢钠，用900mL水溶解，用100 g/L 的氢氧化钠溶液调整其 pH至6.5，之后用水定容至1000mL。 2、液相色谱流动相配制：用上述磷酸二氢钠缓冲溶液与乙腈相混合，乙腈磷酸缓冲溶液(75-25，体积比)。 3、称取1 mg 三聚氰胺粉末标准品，加入10mL水，常温下超声溶解，获得0.1 mg/mL 溶液作为对照品，用0.22 um 有机相微孔滤膜过滤后进样。 4、将上述 0.1 mg/mL 三聚氰胺水溶液稀释500倍，浓度为 0.2 ug/mL，用0.22 um 有机相微孔滤膜过滤后进样。 5、水性食品模拟物：用自来水稀释上述0.1 mg/mL 三聚氰胺水溶液至 10 ug/mL， 用 0.22 pm有机相微孔滤膜过滤后进样。 6、酸性食品模拟物：用1g/L柠檬酸水溶液稀释上述 0.1 mg/mL 三聚氰胺水溶液至 10 ug/mL， 用0.22 u.m 有机相微孔滤膜过滤后进样。 7、酒精类食品模拟物：用65%乙醇水溶液稀释上述 0.1 mg/mL 三聚氰胺水溶液至 10 ug/mL， 用0.22 um 有机相微孔滤膜过滤后进样。 【分析条件】 仪器： Agilent 1220 色谱柱：-TSKgel Amide-80 HR (4.6mm I.D.×25 cm， 5pm)流动相：十乙腈--磷酸二氢钠缓冲溶液 流速：1.0mL/min 柱温：：室温 进样体积：20uL 检测器：紫紫检测器，230nm 忆园 图1. 10 ug/mL三聚氰胺水溶液的色谱图 图3. (10 ug/mL三聚氰胺)水性食品模拟物的色谱图 图4. (10 ug/mL三聚氰胺)酸性食品模拟物的色谱图 图5. (10 ug/mL三聚氰胺)酒精类食品模拟物的色谱图 色谱图序号 峰序号 物质名称 保留时间 对称因子 理论塔板数 拖尾因子 1 1 三聚氰胺 6.268 0.80 8492 1.06 2 1 三聚氰胺 6.264 0.80 8475 1.18 3 1 三聚氰胺 6.268 0.80 8410 1.19 4 1 三聚氰胺 6.277 0.77 7657 1.19 5 1 三聚氰胺 6.302 0.86 9655 1.15 结论： TSKgel Amide-80 HR (4.6mmI.D.×25 cm， 5 um) 可以检测出0.2 ppm 浓度的三聚氰胺，满足食品安全国家标准(GB31604.15-2016)检出限要求。在国家标准附录的色谱图中，其三聚氰胺的保留时间差异较大(分别约为5.2 min、5.6 min、5.6 min)， RSD=4.22%， 因此 TSKgel Amide-80HR色谱柱相比之下拥有更好的出峰重现性 (RSD=0.25%)。 附 录 (GB31604.15-2016中的色谱图) A.1 水性食品模拟物的三聚氰胺标准色谱图 水性食品模拟物试液中三聚氰胺标准色谱图(10 mg/L)见图 A.1。 图A.1水性食品模拟物试液中三聚氰胺标准色谱图(10mg/L) A.2 酸性食品模拟物的三聚氰胺标准色谱图 酸性食品模拟物试液中三聚氰胺标准色谱图(10 mg/L)见图 A.2。 图A.2 酸性食品模拟物中三聚氰聚标准色谱图(10mg/L) A.3 酒精类食品模拟物的三聚氰胺标准色谱图 酒精类食品模拟物试液中三聚氰胺标准色谱图(10 mg/L)见图A.3。 mAU 图A.3 酒精类食品模拟物试液中三聚氰胺标准色谱图(10 mg/L) 采用HILIC色谱柱TSKgel Amide-80HR（4.6 mm IDX25cm,5μm）参照食品安全国家标准GB31604.15-2016对食品接触材料中三聚氰胺的迁移量进行检测，可以检测出0.2ppm浓度的三聚氰胺，满足该标准中的检出限要求。在国家标准附录的色谱图中，其三聚氰胺的保留时间差异较大（分别约为5.2min、5.6min、5.6min），RSD=4.22%。而TSKgel Amide-80HR色谱柱相比之下拥有更好的出峰重现性（RSD=0.25%）。