单克隆抗体表征中建立专用内部实验室检测方案(LIMS系统)

[商业解决方案]WatersTHE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. [商业解决方案] Polpharma Biologics子公司Bioceros为单克隆抗体表征建立专用内部实验室 为实现工业规模的高通量分析，该公司选择了沃特世UNIFI生物制药平台解决方案 简介 荷兰乌得勒支的Bioceros是Polpharma Biologics的一家子公司。 PolpharmaBiologics是东欧最大的制药公司之一，在波兰格但斯克和Duchnice设有生产基地，并且在德国、意大利和荷兰均设有分公司。Bioceros应用其专有的CHOBC°平台技术生成高产的生物类似药和原研药生产细胞系。此外，该公司专有的SPOT效价扩增技术也广为人知，这项技术能够提高操作效率并改善生物工艺性能。 作为这些平台的补充，该公司还提供一系列完善的翻译后修饰靶向调节工具，协助用户获得指纹图谱水平的生物相似性，且所得结果的质量可媲美其可靠的内部生物检测。该公司还为启动新临床项目的客户开发了一系列创新治疗性单克隆隆体和新型分子。 在公司内部完成分析开发 在2015年建立自己的分析实验室之前， Bioceros委托合同制研究机构(CRO)检测其单克隆抗体产品的关键质量属性，包括二硫键、骨架异质性和聚集体情况等。为了发展业务、扩展产品线并加强控制， Bioceros制定了一项战略决策-以上所有检测今后均由公司内部完成，并在乌得勒支建立分析开发实验室。 Bioceros首席发展官Emile van Corven博士任命Gideon Oudgenoeg博士负责该实验室的设计、装备及人员配置。随后， Oudgenoeg博士聘请了数名高水平的资深分析化学家，青年研究者奖得主Jeroen de Keijzer就是其中之一。 如今该实验室配备一流的分析仪器，专为五个内部团队的研发项目提供支持：1.克隆构建和细胞系开发，2.上游加工，3.下游加工，4.生物检测，5.制剂。目前，该实马室采用两套Waters° ACQUITY° UPLC°H-Class系统和一套ACQUITY UPLCI-Class系统进行各种模式的色谱分析，包括疏水作用、亲水作用(HILIC)色谱、阳离子和阴离子交换色谱、体积排阻色谱、亲和色谱以及反相色谱。此外，实验室还结合GlycoWorks RapiFluor-MS°N-糖试剂盒与UNIFI生物制药平台解决方案工作流程开展亚基质谱分析、肽图分析和游离寡糖分析。 66"运用RapiFluor-MS技术的沃特世UNIFI生物制药平台解决方案是采用成熟分析方法开展工业规模高通量应用的理想之选，这套解决方案能够满足实验室支持生物学家开展上游、下游加工或克隆筛选研究的各项需求。 GIDEON OUDGENOEG博士Bioceros分析实验室主任 适用于GXP实验室的游离寡糖精简分析方法 Bioceros基于沃特世UNIFI生物制药平台解决方案建立了自己的蛋白质表征工作流程(包括完整蛋白质质谱分析和肽图分析)。不过，这套解决方案最大的贡献当属高通量游离寡糖分析。 Oudgenoeg博士决定引进UNIFI生物制药平台解决方案的一个关键原因是采用RapiFluor-MSN-糖试剂盒的游离寡糖分析工作流程。 他表示： “整个游离寡糖分析工作流程非常完善，是经过精精心设计的。与此同时，由于确信所得结果值得信赖，我们还能在一定程度上进行创造。22 “结合样品制备、HILIC色谱柱分离、荧光检测与精确质量检测，我们可以基于GU指数鉴定丰度极低(<1%)的复杂游离寡糖，可以使用荧光标记获得良好的定量结果，并通过精确质量测定完成最终确认，”Oudgenoeg博士说道， ：“另外，UNIFI的报告功能也令我为之震撼。我认为，相较于传统游离寡糖分析方法，这种涵盖样品制备到报告的整体解决方案是我们朝着正确发展方向跨越的一大步。22 Oudgenoeg博士以另一个项目为例阐述了他的观点，该项目要求实验室测定唾液酸Neu5Ac/NANA、Neu5Gc/NGNA以及它们的连接信息。 “在这个项目中，我们证明自己能够高度可靠地测定这两种唾液酸，成功地为上游加工团队提供了最有力的支持。 为了确保UNIFI工作流程的最佳性能， Oudgenoeg博士从实验室建立之初就让Bioceros的IT部门也参与相关工作，确保他们获取必需的培训及资料，以便能够提供适当的支持。 Oudgenoeg回忆，他的实验室曾经必须在两周内完成200个样品的分析，并给出包含所有200次分析结果的报告。 “我们一般分批次运行分析，每个批次最多48个样品，这是一组生物反应器的典型配置。整体而言，如果我们在分析游离寡糖时使用其他非标记分析方法进行基于精确质量的游离寡糖分配，可能需要两个月才能完才UNIFI平台和 RapiFluor-MSKit试剂盒在两周内就能完成的工作。 借助UNIFI通过严格的审计 Bioceros分析团队的职责是开发产品理化表征分析方法，为上游工艺开发、生物检测和下游加工提供支持。随后，这些方法会被转移至Polpharma Biologics的格但斯克生产基地，该基地负责工艺放大、GMP生产以及工艺表征和验证。这里也是进行分析方法检定和验证的地方。 Oudgenoeg博士与Bioceros分析开发实验室团队的成员(从左到右：Claudia KempGideon Oudgenoeg、Jeroen de Keijzer、 AnjaBoumeester、Peter van Maurik)。 "我们在半小时内就能生成审计人员要求提供的所有资料，包括数据在数据库中的存储方式和存储结构，以及与每个样品组相关的数据采集和数据处理方法等等。审计人员对UNIFI的可追溯性和用户管理功能赞不绝口。99 GIDEON OUDGENOEG博士 实验室必须对自己开发的方法充满信心。“Bioceros的质量标准非常严格，为此我们必须遵守成文工作规范所规定的通用规则，，”Oudgenoeg博士说道， “一旦乌得勒支的QA团队签署了报告，就意味着该方法可以在整个PolPharma Biologics公司内部使用。为了让方法通过QA团队审核，我们所做的每一项工作都必须详细记录并且完全可追溯。22 位于格但斯克的PolPharma Biologics QA部门会定期审计实验室运营情况。 Oudgenoeg博士非常高兴地表示，最近一次审计得到了非常好的结果。 “我们在半小时内就能生成审计人员要求提供的所有资料，包括数据在数据库中的存储方式和存储结构，以及与每个样品组相关的数据采集和数据处理方法等等。审计人员对UNIFI的可追溯性和用户管理功能赞不绝口。” 作为数据完整性实践方案的一部分，Oudgenoeg博士为分析开发实验室以外的每个同事都创建了一个专用的用户帐户，例如，上游加工团队和克隆构建团队的项目经理可能需要通过该帐户访问结果，用于评估当前工作进展顺利与否、用于汇报工作，或者准备海报/演示文稿。授予这些用户的权限是有限权限，他们不能修改/重新处理数据或更改方法，这些专有权限只会授予特定的分析科学家，如分析开发实验室的Jeroen de Keijzer。这种方式不仅能保证数据安全而且对实验室工作效率产生了积极影响，之前需要由分析化学家代替实验室其他人员完成的简单工作(例如，收集数据并将其放入海报或演示文稿)现在可交由具有适当访问权限的人员来处理。 秉承协作和数据共享的精神 Bioceros部署的UNIFI科学信息系统在网络化的客户端/服务器环境中运行。数据采集、处理和归档、设备管理和审计追踪管理、帐户管理、访问权限分配以及仪器和方法检定都是以集中中方式实现的。UNIFI客户端安装在实验室之外，用于数据查看以及实验室仪器的远程操作和解析。 “我们团队是公司不可分割的一部分，而我们采用这套系统获得的结果对于各个团队都有非常重要的意义。举一个传奇的例子：在克隆构建团队的一个非常重要的项目中，他们将样品交给我们之后，表示希望能够实时跟踪我们分析析些样品的进度。我们使用UNIFI客户端向他们实时传送结果，同时在每台UNIFI客户端计算机旁边都安排了一名分析开发团队成员来回答他们的问题并解释结果。这次合作达到了一个全新的高度，如今已经成为Bioceros的一个传奇故事。” 扫一扫，关注沃特世微信 THE SCIENCE OF WHAT'S POSSIBLE. Waters、The Science of What’s Possible、UNIFI、RapiFluor-MS、ACQUITY和UPLC是沃特世公司的注册商标。其它所有商标均归各自的拥有者所有。 66借助UNIFI， 我们可以创建 自定义计算并将它们集成到我们的分析方法中，进而生成定制化报告，此外还能很好地满足合作团队的各项需求。 JEROEN DE KEIJZER biocerosMember of Polpharma Biologics Polpharma Biologics子公司Bioceros为单克隆抗体表征建立专用内部实验室 运用RapiFluor-MS技术的沃特世UNIFI生物制药平台解决方案是采用成熟分析方法开展工业规模高通量应用的理想之选，这套解决方案能够满足实验室支持生物学家开展上游、下游加工或克隆筛选研究的各项需求。