水杨酸中工艺杂质检测方案(液相色谱柱)

摘要采用由 12.01 版 ACD/AutoChrom 软件控制的 Agilent 1200 系列方法开发解决方案开发的分析方法，分离含水杨酸及其已报道工艺杂质的样品。在 AutoChrom 的控制下，将色谱柱置于 4 个温控区域中时，色谱仪能够筛选最多 7 种色谱柱、13 种缓冲液和 2 种有机溶剂。该软件可帮助安排最佳的后续实验，使分析人员能够获取成功几率最高的实验条件，专注于快速开发方 法。本研究采用五种流动相改性剂对三种色谱柱（Agilent ZORBAX StableBond SB-C18、ZORBAX Eclipse Plus C18 和 StableBond SB-Aq）进行了筛选。在整个实 验过程中，温度保持在 25 °C。首先对 15 种溶剂柱实验进行了筛选。随后开展了若干次实验来建立保留模型。最终获得了在 3 分钟内完成等度分离的解决方案。前言快速分离高通量色谱柱(RRHT) 旨在用50 mm, 1.8 μm 色谱柱产生150 mm, 5 μm 色谱柱的分离效果。可以在更高流速下获得同等分离度，分离速度提高3 至5 倍。分析方法开发是一项具有挑战性的耗时工作。它需要制定实验计划、配制多种流动相、将大量方法输入到色谱软件中并进行数据分析。流动相组成的细微变化会影响洗脱顺序，因此整个方法开发过程中的峰追踪也是一项重要的任务。选择性是分析方法开发的一项重要参数。使用较短的 1.8 μm 色谱柱快速筛查不同的选择性改性剂是一种值得关注的方法，因为该方法能够节省时间和溶剂。在这些 RRHT 色谱柱上开发的分离方法可轻松转移至可在400-1200 bar 范围内运行的其他仪器。一般来讲，使用4.6 ×50 mm RRHT 色谱柱时，完成多次分析所需的时间仅为 4.6 × 150 mm, 5 μm 色谱柱的十分之一至三分之一。由此，可在较短的时间内探索更多的方法开发选项。水杨酸也称为2-羟基苯甲酸，是几种β-羟基酸中的一种。它是多种护肤品中的重要添加剂，也存在于中药采用的多种植物中。由苯酚钠和二氧化碳在高压和高温下通过科尔贝-施密特(Kolbe-Schmitt) 反应批量制得水杨酸钠。将水杨酸钠酸化，即得到所需的水杨酸。本研究将采用RRHT 色谱柱、Autochrom 和Agilent 1200 SL 方法开发解决方案快速评估方法开发选择。结论借助AutoChrom 可在20 小时内开发出一种用于分析水杨酸及相关化合物的快速等度方法。其中大部分时间都花费在筛选15 种初始条件的数据采集上。使用Agilent 1200 系列方法开发解决方案，一夜之间即可完成色谱柱与缓冲液筛选过程。较短的运行时间（5 分钟以内）使等度色谱方法的开发只需3 分钟以内。AutoChrom 软件管理并记录了方法开发过程中所用的所有色谱条件。采用配备 ACD/AutoChrom 的Agilent 1200 系列方法开发解决方案大大缩短了方法开发时间。由于在筛选和优化过程中实现了色谱柱和溶剂的无人值守自动切换，因此用户可以投入更多时间开展更重要的工作，而不是持续不断地操作HPLC 系统。