蒙药中硒的含量检测方案(原子吸收光谱)

流动注射氢化物发生原子吸收光谱法测定蒙药中的硒 关键词：流动注射；氢化物发生；原子吸收光谱法；蒙药中硒； 美析仪器：AA-1800C型原子吸收分光光度计；   随着科学技术的发展，蒙药和中草药中硒的含量与药效密切相关响。因此，测定药物试样中硒含量具有十分重要意义。目前测定硒的方法较多。荧光法是经典方法，灵敏度高，操作繁琐费时；催化光度法和极谱法的稳定性差；石墨炉原子吸收法又存在硒的挥发损失；氢化物发生原子吸收法具有高灵敏度和高选择性的优点，手工操作是其缺点。本文采用流动注射氢化物发生电原子吸收光谱法测定蒙药中硒，对测试条件进行研究，取得较好效果。 1  试验部分 1.1  仪器与试剂 AA-1800C型原子吸收分光光度计；WHG-102A2型流动注射氢化物发生器及电加热石英管；硒空心阴极灯；控温电热板；回流三角烧瓶。 硒标准储备液（1mg/ml）：用亚硒酸配制；硒标准应用液（500ng/ml）：用3mol/L盐酸稀释储备液配制；硼氢化钾溶液（5g/L）：用4g/L氢氧化钠溶液配制，于4℃冷藏保存，可用1个月；混合酸：硝酸与高氯酸为4:1（体积比）；载液：0.3mol/L盐酸；稀释液：3.0 mol/L 盐酸；载气：高纯氩气；盐酸、硝酸及氢氧化钠为优级纯，其它试剂为分析纯，实验用水为去离子水，实验所用玻璃器皿用硝酸（1:4）浸泡24h。 1.2  方法原理 测试液是经盐酸还原将六价硒转化为四价硒的酸性溶液。该方法用载气压力作为自动化能源，自动定量吸入硼氢化钾、测试液和载液三种溶液，吸满后，载带测试液的载液和硼氢化钾溶液开始稳流流动，汇合后发生化学反应，反应液和生成的气体氢化物被载气带入气液分离管，混合气进入电热石英管被原子化，由主机测定吸光度。 1.3  实验方法 取一定量硒标准应用液于10ml比色管中，用3mol/L盐酸稀释至刻度，摇匀，作为测试液。将三根塑料毛细管分别插入载液、测试液和硼氢化钾溶液，按表1原子吸收光谱仪工作参数和表2流动注射氢化物发生器工作条件进行测定。   表1  原子吸收光谱仪工作参数 元素      波长        光谱通带         灯电流         测量方式            （nm）        （nm）          （mA）               Se        196.0          0.4             5.0             峰高       表2  流动注射氢化物发生器的工作条件 元素      载气流量       石英管电压       KBH4浓度     盐酸载液浓度          （ml/min）        （V）          （g/L）       （mol/L） Se           180              110               5              0.3 1.4  样品分析 称取样品0.3000g于100ml三角烧瓶中（带回流管），加4.0ml混合酸，置电热板上约100℃消化1h，后高温消化至溶液无色透明且产生高氯酸烟雾时止。溶液冷却后用 3mol/L HCl稀释至10.00ml，放置0.5h,按试验方法测定吸光度，用校正曲线法定量。                                                              2     结果与讨论 2.1  测试条件的选择 按试验方法，采用单因素变化法确定最佳试验条件。最佳条件为：硼氢化钾溶液浓度5g/L，盐酸稀释液浓度3.0 mol/L，盐酸载液浓度0.3mol/L，石英管加热电压110V，氩气流量180ml/min。 2.2  预还原条件的选择 样品经消化处理后，硒以四价和六价形式存在，而六价硒与硼氢化钾反应难生成气体氢化物，因此消化后的溶液需预还原处理，将六价硒还原为四价硒。试验了HCl、KI、抗坏血酸三种还原剂，灵敏度、稳定性均以HCl为好，且与试液用酸相同。本试验以3mol/L HCl为预还原剂。 2.3  共存离子的影响 按试验方法，试验了多种共存离子的影响。结果表明（相对误差不超过±5%）：至少30000倍K+、Na+，20000倍Ca2+、Mg2+，1000倍Fe3+、Fe2+、Zn2+、Al3+、Mn2+、Pb2+、Cd2+、I-、Cr2O72-，400倍Co2+、Ni2+，300倍Cu2+、Ag+，100倍As（Ⅴ），70倍As（Ⅲ）不干扰测定。 2.4 线性范围与检出限 按试验方法测定不同浓度硒标准溶液的吸光度，绘制硒浓度与吸光度关系曲线，得硒浓度在0.60—35ng/ml范围内与吸光度呈线性关系，直线回归方程为A=0.0168x + 0.0051, A为吸光度，x为硒浓度（ng/ml），相关系数r=0.9998。  按试验方法对20个试剂空白溶液进行测定，根据公式L=3Sb/S（Sb为空白溶液的标准偏差，S为回归直线的斜率，即方法的灵敏度，L为检出限）求得方法的检出限为0.12ng/ml。 2.5  精密度与准确度 按样品分析方法对三份蒙药进行分析，同时做加标回收率试验，结果见表3。 表3   样品分析结果（n=6） 样品       测得值       RSD       加标量          测得总量        回收率          （ng/g）    （%）     （ng/g）       （ng/g）         （%） 1        38.0         6.4        50.0           86.3            96.6 2        54.2         4.7        50.0           105.2           102.1 3        74.3         5.2        50.0            123.7            98.8 实验结果表明，本法测定蒙药中硒，灵敏度高，选择性好，简便快速，试剂和样品用量少，精密度和准确度均较高，有推广应用价值。 关键词：流动注射；氢化物发生；原子吸收光谱法；蒙药中硒； 关键词：流动注射；氢化物发生；原子吸收光谱法；蒙药中硒；美析仪器：AA-1800C型原子吸收分光光度计； 随着科学技术的发展，蒙药和中草药中硒的含量与药效密切相关响。因此，测定药物试样中硒含量具有十分重要意义。目前测定硒的方法较多。荧光法是经典方法，灵敏度高，操作繁琐费时；催化光度法和极谱法的稳定性差；石墨炉原子吸收法又存在硒的挥发损失；氢化物发生原子吸收法具有高灵敏度和高选择性的优点，手工操作是其缺点。本文采用流动注射氢化物发生电原子吸收光谱法测定蒙药中硒，对测试条件进行研究，取得较好效果。1  试验部分1.1  仪器与试剂AA-1800C型原子吸收分光光度计；WHG-102A2型流动注射氢化物发生器及电加热石英管；硒空心阴极灯；控温电热板；回流三角烧瓶。硒标准储备液（1mg/ml）：用亚硒酸配制；硒标准应用液（500ng/ml）：用3mol/L盐酸稀释储备液配制；硼氢化钾溶液（5g/L）：用4g/L氢氧化钠溶液配制，于4℃冷藏保存，可用1个月；混合酸：硝酸与高氯酸为4:1（体积比）；载液：0.3mol/L盐酸；稀释液：3.0 mol/L 盐酸；载气：高纯氩气；盐酸、硝酸及氢氧化钠为优级纯，其它试剂为分析纯，实验用水为去离子水，实验所用玻璃器皿用硝酸（1:4）浸泡24h。1.2  方法原理测试液是经盐酸还原将六价硒转化为四价硒的酸性溶液。该方法用载气压力作为自动化能源，自动定量吸入硼氢化钾、测试液和载液三种溶液，吸满后，载带测试液的载液和硼氢化钾溶液开始稳流流动，汇合后发生化学反应，反应液和生成的气体氢化物被载气带入气液分离管，混合气进入电热石英管被原子化，由主机测定吸光度。1.3  实验方法取一定量硒标准应用液于10ml比色管中，用3mol/L盐酸稀释至刻度，摇匀，作为测试液。将三根塑料毛细管分别插入载液、测试液和硼氢化钾溶液，按表1原子吸收光谱仪工作参数和表2流动注射氢化物发生器工作条件进行测定。 表1  原子吸收光谱仪工作参数   元素波长（nm） 光谱通带（nm）灯电流（mA）测量方式Se196.00.45.0峰高        表2  流动注射氢化物发生器的工作条件元素载气流量（ml/min）石英管电压（V）KBH4浓度（g/L）盐酸载液浓度（mol/L）Se18011050.31.4  样品分析称取样品0.3000g于100ml三角烧瓶中（带回流管），加4.0ml混合酸，置电热板上约100℃消化1h，后高温消化至溶液无色透明且产生高氯酸烟雾时止。溶液冷却后用 3mol/L HCl稀释至10.00ml，放置0.5h,按试验方法测定吸光度，用校正曲线法定量。                                                             2     结果与讨论2.1  测试条件的选择按试验方法，采用单因素变化法确定最佳试验条件。最佳条件为：硼氢化钾溶液浓度5g/L，盐酸稀释液浓度3.0 mol/L，盐酸载液浓度0.3mol/L，石英管加热电压110V，氩气流量180ml/min。2.2  预还原条件的选择样品经消化处理后，硒以四价和六价形式存在，而六价硒与硼氢化钾反应难生成气体氢化物，因此消化后的溶液需预还原处理，将六价硒还原为四价硒。试验了HCl、KI、抗坏血酸三种还原剂，灵敏度、稳定性均以HCl为好，且与试液用酸相同。本试验以3mol/L HCl为预还原剂。2.3  共存离子的影响按试验方法，试验了多种共存离子的影响。结果表明（相对误差不超过±5%）：至少30000倍K+、Na+，20000倍Ca2+、Mg2+，1000倍Fe3+、Fe2+、Zn2+、Al3+、Mn2+、Pb2+、Cd2+、I-、Cr2O72-，400倍Co2+、Ni2+，300倍Cu2+、Ag+，100倍As（Ⅴ），70倍As（Ⅲ）不干扰测定。2.4 线性范围与检出限按试验方法测定不同浓度硒标准溶液的吸光度，绘制硒浓度与吸光度关系曲线，得硒浓度在0.60—35ng/ml范围内与吸光度呈线性关系，直线回归方程为A=0.0168x + 0.0051, A为吸光度，x为硒浓度（ng/ml），相关系数r=0.9998。 按试验方法对20个试剂空白溶液进行测定，根据公式L=3Sb/S（Sb为空白溶液的标准偏差，S为回归直线的斜率，即方法的灵敏度，L为检出限）求得方法的检出限为0.12ng/ml。2.5  精密度与准确度按样品分析方法对三份蒙药进行分析，同时做加标回收率试验，结果见表3。表3   样品分析结果（n=6）样品测得值（ng/g）RSD（%）加标量（ng/g）测得总值（ng/g） 回收率（%）138.06.450.086.396.6254.24.750.0105.2102.1374.35.250.0123.798.8实验结果表明，本法测定蒙药中硒，灵敏度高，选择性好，简便快速，试剂和样品用量少，精密度和准确度均较高，有推广应用价值。 关键词：流动注射；氢化物发生；原子吸收光谱法；蒙药中硒；