白酒中邻苯二甲酸二甲酯检测方案(气质联用仪)

2 3 吕建霞李景林胡永彪梁立娜赛默飞世尔科技(中国)有限公司 Key words： GCMS； distilled spirit； PAEs 摘要 建立了白酒中16种邻苯二甲酸酯类物质的气相色谱质谱检测方法。样品去除乙醇后采用正己烷提取，使用GC-MS检测。在0.10~4.0mg/L范围内，目标物的峰面积与其质量浓度的线性关系良好(R²>0.99)。在0.10、0.30mg/L的添加水平，样品添加平均回收率为83.2-110%，相对标准偏差(RSD， n=5)为1.3-8.4%。检出限除邻苯二甲酸二壬酯为50pg/L外，其余15种化合物为0.1~0.5ug/L，定量限为0.3~1.5ug/L。该方法具有灵敏、简单快速、准确、线性范围宽等优点，可满足白酒中邻苯二甲酸酯类物质的检测需要。 引言 邻苯二甲酸酯类化合物( Phthalate Acid Esters， 缩写PAEs，又称酞酸酯，俗称塑化剂)，普遍用于塑料工业的主要增塑剂和软化剂，其作用是增大塑料的可塑性和韧性，提高塑料强度。 PAEs 是一种环境激素，可以模拟体内的天然荷尔蒙，会干扰正常荷尔蒙的作用，影响身体内的最基本的生理调节机能，具有致癌、致畸、致突变性作用，对人体健康已构成危害。2011年6月1日卫生部发布公告，邻苯二甲酸酯类物质被明确为违禁添加的非食用物质，禁止在食品中使用。PAEs主要通过食品包装材料进入食品，而白酒中的乙醇对PAEs具有很好的溶解性，因此白酒中也存在这类化合物污染的风险。2012年11月19日，有媒体报道称，据第三方检测显示，国内某知名品牌的白酒中的塑化剂含量超标高达260%，存在意想不到的致命危险。 目前国内颁布了GB/T 21911-2008《食品中邻苯二甲酸酯的测定》检测方法。本实验根据此标准，进行优化，采用去除乙醇后，正己烷提取，，气相色谱质谱联用仪检测，建立了白酒中邻苯二甲酸酯类物质残留的检测方法。该方法具有灵敏、快速、准确、线性范围宽等优点，可满足白酒中邻苯二甲酸酯类物质的检测需要。 仪器： Trace 1310-ISQ气相色谱质谱联用仪(ThermoFisher)。 试剂：正己烷，色谱纯(ThermoFisher)；16种邻苯二甲酸酯标准混合溶液(美国o2si公司)。 样品：8种品牌白酒，购于超市。 准确量取5.0mL白酒样品于10mL具塞玻璃离心管中，在沸水浴中加热除去样品中的乙醇，冷却至室温后加入2.0mL正己烷，振荡提取，静置后取上清液检测。 样品的测定 仪器条件见表1。 表1仪器参数设置 色谱柱及柱温 TR-35 MS， 30m， 0.25mm，0.25um柱温：80℃(1min)， 10℃/min到280℃，保持10min。 检测器类型、工作参数 MS，EI源， scan模式，扫描范围50-350 传输线温度：280℃ 离子源温度：280℃。 载气类型及流速 氦气，恒流模式，流速： 1mL/min 进样方式及进样体积 进样模式： splitless， 进样口温度：280℃；进样体积：1pL 结果与讨论 样品提取条件的选择 白酒中含有30~60%vol的乙醇，由于乙醇对邻苯二甲酸酯类化合物的溶解性很好，因此在使用正己烷溶剂萃取白酒中的邻苯二甲酸酯类化合物时效果较差。采用先除去酒中乙醇后再用正己烷提取分析测定可避免乙醇带来的误差。准确量取5.0mL白酒样品，添加水平为0.80mg/L，平行3次，采用去除乙醇和不去除乙醇两种提取方法做样品加标回收实验，添加回收实验结果见表2。实验结果表明，采用去除乙醇提取法的样品添加回收实验具有较好的回收率。 化合物 简称 不去除乙醇回收率(%) 去除乙醇回收率(%) 邻苯二甲酸二甲酯 DMP 60 102 邻苯二甲酸二乙酯 DEP 35.4 107 邻苯二甲酸二异丁酯 DIBP 99.5 94.4 邻苯二甲酸二丁酯 DBP 106 104 邻苯二甲酸二(4-甲基-2-戊基)酯 DMPP 99.7 95.1 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 DMEP 3.38 88.8 邻苯二甲酸二戊酯 DAP 109 108 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 DEEP 13.6 103 邻苯二甲酸二己酯 DHP 104 101 邻苯二甲酸丁基苄基酯 BBP 88.4 108 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 DEHP 106 108 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 DBEP 83.1 104 邻苯二甲酸二环己酯 DCHP 94.8 102 邻苯二甲酸二辛酯 DOP 103 106 邻苯二甲酸二苯酯 DPP 77.1 112 邻苯二甲酸二壬酯 DNP 110 109 方法的线性关系、检出限和定量限 配制系列浓度0.00、0.10、0.20、0.40、0.80、1.00、2.00、4.00 mg/L的基质标准溶液，由低浓度至高浓度依次进样检测，以质量浓度与峰面积作标准曲线线性回归。结果表明，在0.10~4.00mg/L范围内15种邻苯二 甲酸酯类物质显良好线性关系。DNP响应较差，线性范围为0.40~4.00mg/L。采用样品添加目标化合物的方法，依据特征离子质量色谱峰信噪比Rsn=3计算方法检出限，Rsm=10计算方法定量限，结果见表3。 化合物 保留时间min 定量离子 线性范围mg/L 相关系数r2 检出限ug/L 定量限ug/L DMP 11.53 163 0.1-4 0.9994 0.1 0.3 DEP 13.02 149 0.1-4 0.9999 0.1 0.3 DIBP 15.64 149 0.1-4 0.9981 0.1 0.3 DBP 16.72 149 0.1-4 0.9986 0.1 0.3 DMPP 17.33/17.36 149 0.1-4 0.9993 0.2 0.6 DMEP 17.74 59 0.1-4 0.9984 0.2 0.6 DAP 18.43 149 0.1-4 0.9996 0.1 0.3 DEEP 18.59 72 0.1-4 0.9996 0.1 0.3 DHP 20.02 149 0.1-4 0.9990 0.1 0.3 BBP 20.94 149 0.1-4 0.9998 0.2 0.6 DEHP 21.37 149 0.1-4 0.9969 0.2 0.6 DBEP 21.45 149 0.1-4 0.9993 0.5 1.5 DCHP 22.50 149 0.1-4 0.9985 0.2 0.6 DOP 23.43 149 0.1-4 0.9998 0.5 1.5 DPP 23.70 225 0.1-4 0.9988 0.2 0.6 DNP 24.0-24.4 149 0.4-4 0.9983 50 150 方法精密度和回收率的测定 称取白酒样品，分别添加2个水平浓度的标准品，每 110%，相对标准偏差(RSD， n=5)为1.3-8.4%。回收率个浓度水平平行测定5次。结果表明，平均回收率为83.2- 和精密度数据结果见表4。 表4方法回收率和精密度数据 化合物 添加水平 (0.1mg/L) 添加水平(0.3mg/L) 回收率(%) RSD(%) 回收率(%) RSD (%) DMP 95.0 5.4 99.0 4.7 DEP 103 5.5 108 2.2 DIBP 101 2.0 101 3.2 DBP 107 6.6 101 1.3 DMPP 105 3.3 107 5.7 DMEP 86.3 5.3 83.2 3.4 DAP 109 6.0 104 1.6 DEEP 103 4.1 104 3.2 DHP 104 4.6 109 3.7 BBP 110 3.6 103 3.7 DEHP 102 1.4 105 4.1 DBEP 104 5.0 108 4.6 DCHP 103 4.1 103 3.6 DOP 105 5.8 104 2.6 DPP 108 4.2 109 1.8 DNP 107 8.4 101 5.4 对市售8个白酒样品中邻苯二甲酸酯类物质的测定 按上述前处理方法测定了8个市售白酒样品中的邻苯二甲酸酯类物质残留量，测定结果见表5。标准品、样品 添加谱图见图1。谱图采用全扫描方式得到，不存在杂质峰干扰，无需进一步的净化操作。 表5白酒样品中邻苯二甲酸酯类物质含量(mg/L) 化合物 样品1 样品2 样品3 样品4 样品5 样品6 样品7 样品8 DMP ND 0.303 ND ND 0.005 ND ND 0.025 DEP ND ND ND ND 0.011 ND ND ND DIBP ND 1.526 ND 1.373 0.106 ND ND ND DBP ND 1.024 0.045 0.656 0.133 ND 0.469 0.064 DMPP ND ND ND ND ND ND ND ND DMEP ND ND ND ND ND ND ND ND DAP ND ND ND ND ND ND ND ND DEEP ND ND ND ND ND ND ND ND DHP ND ND ND ND ND ND ND ND BBP ND ND ND ND ND ND ND ND DEHP 0.086 0.029 0.010 0.236 0.014 0.006 0.017 0.016 DBEP ND ND ND ND ND ND ND ND DCHP ND ND ND ND ND ND ND ND DOP ND ND ND ND ND ND ND ND DPP ND ND ND ND ND ND ND ND DNP ND ND ND ND ND ND ND ND 样品测定结果表明， DIBP、DBP、DEHP在白酒中普遍存在， DIBP和DBP含量较高。GB9685-2008《食品容器、包装材料用添加剂使用卫生标准》规定了DEHP、DINP、DBP的最大残留量分别为1.5mg/Kg、9.0mg/Kg、0.3mg/Kg。有3个样品中DBP的含量超过规定，最高的样品中DBP含量达1.024mg/L， 超标241%。 图1样品加标与标准溶液谱图比较 本方法采用去除乙醇后正己烷提取，气相色谱质谱联用仪检测的技术，建立了白酒中16种邻苯二甲酸酯类物质残留的分析方法。在0.1、0.3mg/L两个添加水平下，回收率为83.2-110%，相对标准偏差(RSD， n=5)为1.3-8.4%；方法检出限除邻苯二甲酸二壬酯为50 pg/L外，其余15种化合物为0.1~0.5pg/L，定量限为0.3~1.5pg/L。该方法具有灵敏、简单快速、准确、线性范围宽等优点，可满足白酒中邻苯二甲酸酯类物质的检测需要。 ThermoFisherSCIENTIFIC Thermo FisherScientific， Austin， TXUSA is ISO Certified.