饮用水中微囊藻毒素检测方案(液质联用仪)

应用通讯#704424 利用EVOQTM Elite LC-MS/MS分析饮用水中的微囊藻毒素 摘要 建立了应用EVOQTM Elite三重四级杆质谱仪直接进样分析饮用水中微囊藻毒素的LC-MS/MS法。方法灵敏度可达到检测出水中0.05 ppb的藻毒素，方法重现性良好， RSDs10%(n=7)，在0.05到50 ppb范围内线性极佳。 前言 微囊藻毒素(MCs) 是一种藻类富营养化的湖泊和水库中，由蓝藻自然生成的环状多肽类物质(图1)。众所周知，MCs对动物和人类具有肝毒性，所以世界健康组织(WHO) 已经建立了一个1 pg/L的标准来控制饮用水中MC-LR(蓝藻细菌的标记物)的含量，这个限制值目前已经被很多国家应用。112] 本研究建立立一种直接进样的LC-MS/MS方法用于检测和定量饮用水中三种常见的蓝藻细菌毒素(MC-LR， -YR，和-RR)。 实验 样品制备 微囊藻毒素MC-LR，YR和RR的混合标准溶液(5 ug/mL溶于甲醇)购于Sigma-Aldrich公司，用超纯水稀释制备0.05到50 ppb的标准系列溶液。 色谱条件(Advance UHPLC) ·色谱柱： ACE Excel 2 C18(100 mm x 2.1 mm i.d) 进样体积：50pL 流速：0.4mL/min 柱温：40°C 流动相A：0.1%甲酸水溶液 流动相B：乙腈 梯度条件： ● 0.00 min 30% B 1.00 min 30% B 7.00 min 95% B 7.10 min 30%B 10.00 min 30% B 质谱条件(EVOQ Elite) 喷雾电压： +4500v 真空隔层加热电喷雾源(VIP-HESI) 加热温度：350℃ ●加热气体流量：50 unit ●雾化气流量：50 units 锥孔气温度：200℃ 锥孔气流量：15 units ●主动排空： on 碰撞气：气气1.5 mTorr ●优化MRM条件： . MC RR (MW： 1038)： m/z 520>135 (CE=24V) . MC LR (MW： 995)： m/z 498>135(CE=11V) MC YR (MW： 1045)： m/z 523>135 (CE=9V) 结果与讨论 三种藻毒素的全扫描质谱图如图2所示，主要特征离子为二价离子。由于他们的高灵敏度而被用于MRM方法建立中的前体离子。藻毒素都有共同的产物离子m/z 135。[PhCH，CH (OCH，)]*是ADDA残基丢失甲氧基产生的。 通过LC-MS/MS法检验，灵敏度达到可以检测水体中0.05ppb的藻毒素，重现性良好 (RSDs10%，n=7)。0.05 ppb的标准溶液的典型色谱图如图3所示，表1为0.05 ppb的标准溶液重复进样7针的数据汇总。图4显示了在0.05到50ppb 范围内藻毒素的标准曲线，表明线性良好R>0.997。 藻毒素LR，YR和RR在EVOQTM Elite三重四极杆质谱系统上进行分析，可覆盖三个数量级的动态范围(0.05-50ppb)。该方法无疑符合了监测饮用水中的微囊藻毒素的需要。 图4藻毒素MCs的标准曲线 For research use only. Not for use in diagnostic procedures.本产品仅用于研究，不能用于诊断过程 Bruker Daltonik GmbH Bremen· GermanyPhone +49 (0)421-2205-0Fax +49 (0)421-2205-103sales@bdal.de www.bruker.com/ms Bruker Daltonics Inc. Billerica，MA·USAPhone +1 (978) 663-3660Fax +1 (978) 667-5993ms-sales@bdal.com ( Fremont， CA· USA P hone +1 ( 510) 683-4300Fax +1 (510) 490-6586 ms-sales@bdal.com ) 变体MC-RR和MC-YR的结构式 Bruker Daltonics Inc.