三黄片中大黄酚检测方案(液相色谱仪)

三黄片中大黄素和大黄酚的测定 前言 三黄片具有清热解毒，泻火通便等作用。用于三焦热盛所致的目赤肿痛、口鼻生疮、咽喉肿痛、牙龈肿痛、心烦口渴、尿黄便秘。本实验采用日立超高效液相色谱仪 ChromasterUltra Rs 直接转换药典方法，对三黄片中的主要成分大黄素和大黄酚进行分析。 分析条件与仪器配置 样 品 三黄片 (4.2mg/mL， 乙醇：乙酸乙酯=2：1溶解) 方法来源 2010年版《中国药典》一部 修改 仪器设备 日立 UPLC： 6170 泵，6270自动进样器，6310 柱温箱， 6430 DAD 二极管阵列检测器 色谱柱 Hitachi LaChromUltra II C18 (2*100 mm， 1.9 um) 检测波长 254nm 柱 温 50℃ 流动相 A-甲醇； B-0.1%磷酸溶液 等度方法 0-7min，71%A 流 速 0.6 mL/min 进样量 1uL 前处理 样品适量去皮研碎粉末样品适量加入 25 mL乙醇，加热回流1h取续滤液10 mL加入30%乙醇-盐酸(10：1)15mL，加热回流1h三氯甲烷萃取4次，每次15 mL合并溶液并蒸干，残渣用无水乙醇-乙酸乙酯(2：1)溶解转移至25 mL量瓶，定容过 0.22 um 滤膜后分析 供试品测定谱图 结果 名称 保留时间 峰面积 峰高 理论塔板数 最高反压 min uV*sec uV MPa 大黄素 2.527 48193 13752 11401 72.6 大黄酚 3.222 287177 68279 13354 72.6 注意事项 本实验流动相中含磷酸试剂，对色谱柱伤害较大，实验结束后应及时、正确清洗色谱柱以免影响柱寿命。 总结 采用日立超高效液相色谱仪 ChromasterUltra Rs 和日立 LaChromUltra II C18色谱柱，直接转化药典方法分析三黄片，大黄素出峰时间为 2.53 min， 理论塔板数为11401，大黄酚出峰时间为 3.22 min， 理论塔板数为13354，满足分析要求，顺利地完成了从 HPLC 到 UHPLC 的方法转换，实现了三黄片中大黄素和大黄酚快速、高效的分离分析。