ChromasterUltra Rs超高效液相色谱仪是日立高新技术公司于2013年11月18日在中国发布了的一款全新超高效液相色谱仪。ChromasterUltra Rs具有目前世界最高的耐压水平:140 MPa,可真正实现超高速分析;新开发的色谱柱理论塔板数高达50,000以上,耐压高达140MPa,实现了真正的超高分辨分析;二极管阵列(DAD)检测器的65 mm流通池、新型光学系统可实现真正的超高灵敏度分析。
氯霉素滴眼液中氯霉素类物质的测定 前言 氯霉素是由委内瑞拉链丝菌产生的抗生素,属广谱抑菌剂,曾广泛用于治疗各种敏感菌感染,后因对造血系统有严重不良反应,对其临床应用已做出严格控制。。目前,其常作为外用滴眼剂用于防治眼部感染,如沙眼、结膜炎、角膜炎、眼睑缘炎等。本实验采用日立 UHPLC-ChromasterUltra RS 直接转换药典方法,对氯霉素滴眼液中的主要成分氯霉素和氯霉素二醇物进行分析。 分析条件与仪器配置 样 品 氯霉素滴眼液(0.5&0.1 mg/mL, 初始流动相稀释) 方法来源 2010年版《中国药典》二部 仪器设备 日立 UPLC-ChromasterUltra RS: 6170泵,6270自动进样器, 6310柱温箱,6430DAD 二极管阵列检测器 色谱柱 Hitachi LaChromUltra II C18 (2*100 mm, 1.9 um) 检测波长 277 nm 柱 温 30℃ 流动相 A-甲醇; B-0.01 mol/L 庚烷磺酸钠缓冲液 (pH2.5) 梯度方法 0-2 min, 32% A; 2-3.5 min, 32-45%A; 3.5-5.5 min, 45-75% A;5.5-5.6 min, 75-32%A;5.6-7.5 min, 32% A 流 速 0.6 mL/min 进样量 1.4uL 前处理(样品来源:市售成药) 样品适量 初始流动相稀释 过 0.22 um 过膜后分析 供试品测定谱图 空白 结果(含量测定下的浓度) 名称 保留时间 峰面积 峰高 分离度 理论塔板数 最高反压 min uV sec uV MPa 氯霉素二醇物 1.771 61059 20862 / 9397 113 氯霉素 3.209 368191 96910 16.78 16617 113 注意事项 本实验流动相中含庚烷磺酸钠离子对试剂,对色谱柱伤害较大,实验结束后应及时、正确清洗色谱柱以免影响寿命。 总结 采用日立 UHPLC-ChromasterUltra RS 和日立LaChromUltra II C18 色谱柱,直接转化药典方法分析氯霉素滴眼液,氯霉素出峰时间为3.2 min, 理论塔板数高达16617,且与氯霉素二醇物的分离度为16.78,满足分析要求,顺利地完成了从 HPLC 到 UHPLC的方法转换,实现了氯霉素快速、高效的分离分析。
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