小麦中谷蛋白检测方案(激光光散射仪)

用反相色谱RPC-MALS表征麦蛋白 谷蛋白是小麦中含有的一种蛋白质，它是良种蛋白的混合（麦醇溶蛋白和麦谷蛋白）。由麦类所做的面包的质量就和谷蛋白有关，在面团揉捏过程中，谷蛋白形成一个粘弹网络。几十年来，人们为了表征这些蛋白质做了大量的研究，但因它们很低的溶解性和很强的共轭性，它们确切的分子结构和分子尺寸很难测得，更何况又缺乏合适的分析表征技术。 因为反相色谱能让麦蛋白有很高的溶解性，RPC用于分析麦蛋白已经很广泛而有效。这篇文章用多角激光光散射检测器MALLS和反相色谱RPC这一新方法有效地测量了麦蛋白TAM105的分子量和分子尺寸。 采用HP 1050（Palo Alto, CA）系统、DAWN DSP检测器、UV检测器、线性乙腈—水系ODS硅胶柱。 已知蛋白的消光系数，可检测其分子量。下表列出了用光散射和cDNA技术检测的4个蛋白的分子量。直接由DAWN测得的旋转半径值表明蛋白在反相色谱条件下是以棒状的形态存在的。 蛋白 分子量（KD） 旋转半径（nm） cDNA DAWN DSP DAWN DSP 1 68.7 67.6±0.3 11.7±1.5 2 87.2 87.4±0.4 11.4±1.5 3 83.1 79.7±0.4 11.7±1.5 4 N/A 70.6±0.7 13.8±2.6 表1。麦蛋白的分子量和分子大小值。 EMBED Photoshop.Image.6 \s 图1 这是麦蛋白的色谱图。 图2 选择四个峰进行研究，这是其中一个片段的Debye图，我们可以知道分子量、分子尺寸等信息。