植物油中脂肪酸检测方案(紫外分光光度)

分析测量与检测 11/2003 流程工业75 利用现代化的调节技术，在微波场中也可以在短时间内，进行比较困难的反应。用脂类化合物进行酸催化制造脂肪酸甲酯是一个验证调节系统能力的很好方法，特别是具有不稳定性的不饱和脂肪酸。 沂年年来，微波在制剂化学、医药和无机微量示踪分析的试样制备方面得到越来越多的应用。在有机化合物的分析方面，迄今为止，微波主要应用于物质的提取工艺。其快速并逐点升高的能量输入可以大大缩短反应或提取时间。应用微波技术的唯一条件是至少一部分反应混合物可以吸收微波的能量。随着设备技术的进步和随之而来的对反应参数控制精度的提高，微波技术开拓了，利用较不稳定物质衍生的方法进行有机物质分析的应用领域。这其中，有机锌化合物的衍生就是一个例子。 脂肪酸分析的概况 在食品分析中，总的脂肪含量除了可以使用光(频、波)谱等方法测定 ( P.Kettisch： Anton P aar 有限责任公司。 ) ( T.Wenzel 博士， E.P. Lankmayr教授： Graz 工业大学分析化学、微波和放射化学学院。 ) 系统的转子8SOLV. 这对于解决许多问题 是必不可少的。此外，通常情况下化合的脂肪酸必须变为可以用色谱法检测的形式。其出发点在于，将甘油酯皂化，在酸化之后将游离的脂肪酸(FFA)从含水的反应介质中萃取到一种有机溶剂中，并且用气相色谱法检测。但是游离脂肪酸的高极性限制了 分解，也从而限制了以这种方式记录的色谱信息内容。因此化合的脂肪酸更优先再酯化为脂肪酸甲酯(FAME)，而游离的脂肪酸直接酯化为脂肪酸甲酯。进行再酯化反应既可以用酸催化，也可以用碱催化。至今为止对各种各样的试剂和反应条件进行的描述中，这方面更详细的资料可以从各种评论文章中得到。甲醇钠是碱催化基中一种常用的试剂，它在温和 表1微波支持的再酯化和使用传统加热方法的再酯化的结果的比较。 微波 传统 MW* mg/g STABW* mg/g MW** mg/g STABW** mg/g C16：0-Me 107.06 2.35 107.18 2.02 C18：0-Me 62.39 1.49 60.08 1.41 C18：1-Me 317.58 7.56 321.35 6.21 C18：2-Me 483.95 18.49 479.06 12.37 总计 970.98 13.1331 967.67 12.8698 MW：平均值； STABW：标准偏差；*n=6， **n=12(C16：0-Me：棕榈酸(十六烷酸)甲酯， C18：0-Me：硬脂酸(十八烷酸)甲酯， C18：1-Me：油酸(十八碳烯-[9]酸)甲酯， C18：2-Me：亚油酸(十八碳二烯-[9，12]-酸)甲酯。 的条件下可以很快地反应，而其缺点是，和大多数碱性的催化剂一样，对潮湿环境特别敏感，并且不能酯化游离的脂肪酸。一种以质子作为催化剂的试剂可以通过甲醇加氯化氢气体的方法来制造。由于试剂的稳定性小并且制造困难，这种方法还很少被采用。一种在现场制造这种试剂的简单方法是在甲醇中添加乙酰氯。以此作为出发点， Lepage 和Roy描述了类脂化合物直接再酯化的方法。应用这种方法，提取和衍生过程将同时进行，其结果是使试样制备的费用大大降低。 在当前的工作中使用了 AntonPaar公司的Multiwave 3000微波分解仪(图2)。衍生反应在聚四氟乙烯容器中进行，聚四氟乙烯容器又放入PEEK支承容器中。这些容器放入包含八个位置的溶剂转子8SOLV中(图1)，并且在微波场中进行反应。转子和微波炉中的一种新型的安全系统可以使其所用的可燃溶剂进行不需维修的操 保留时间：5.59 min十三烷酸甲酯，7.71 min：棕椎酸(十六烷酸)甲酯，8.73min：十七烷酸甲酯，9.74min：硬脂酸(十八烷酸)甲酯，9.94 min：油酸(十八碳烯-[9]酸)甲酯，10.32 min亚油酸(十八碳二烯-[9，12]-酸)甲酯。 图3一个植物油试样的再酯化产品的色谱图。(试样在测量之前进行了稀释。) 器进行校准。内置盛水的收集瓶可以防止在反应条件设定得过高时，由于可能发生冷凝而产生试样损耗。使用适当的磁力搅拌器对所有的容器进行搅拌。压力/温度传感器具有特别重要的意义，借助于它们可以对一个标准容器中的反应条件进行精确的监测和控制。其余的容器使用红外测量进行温度监控。为了保证所有的试验具有相同的反应时间，，1可以对确定的四分 钟的加热阶段进行编程。 试样的制备 图2：Multiwave 3000微波平台系统 大约100mg的试样加入聚四氟乙烯反应容器中，加上10ml甲醇，5ml甲苯，按内部标准加十七碳烷酸甲酯以及一个磁力搅拌棒。在即将开始在调节的微波场中在80℃下进行30min的反应之前，用吸移管将200ul的乙酰氯加入试样。在反应结束和试样容器通过内装的空冷系统迅速冷却到约40℃之后，用移液管将20ml的某种中性的磷酸盐缓冲剂加入反应溶液中，用磁力搅拌器对混合液进行短时间的搅拌，接着进行1 min的离心分离。然 后将甲苯相的等分试样用巴斯德移液管吸起，并且根据脂肪酸甲酯的沐度进行稀释或者直接用气相色谱分离法进行测量。 结果 图3显示的是，在80℃下，一种植物油的试样进行30min 衍生反应后的色谱图。分析物的分离是在一个高纯度的游离脂肪酸毛细管柱上进行的(25m ×0.2mm内径，0.33um膜厚)，起始温度为110℃。保留1 min， 以20℃/min的速度加热到195℃，然后以2℃/min的速度加热到205℃，最后炉子温度以10℃/min的速度加热到230℃，并且保留一分钟。为了检测分析物，使用一台氢火焰离子化检测器。 在色谱分离图上只能看到期待的反应产品。找不到可能的分解产物和人为的产物。在表1中对通过在水浴反应制造的比较试样结果和微波支持的反应结果进行了比较。由于所使用的反应容器的耐压性的限制，反应温度不能超过65℃。两个试验系列的测量结果的变量分析在95%的概率水平上没有太大的区别。由此得出，和常规的方法相比较，在大约只有四分之一的反应时间内得到了同样的测量结果。 反馈服务编码P5019