薏苡仁中甘油三油酸酯检测方案(液相色谱仪)

结论AN_C_LC-70 引言 薏苡 (Coix lacryma-jobi L. var. ma-yuen Stapf) 为禾本科薏苡属草本植物。其干燥成熟种仁称薏苡仁 (Coix seed)，又名薏米、菩提子、六各米和胶念珠等；收载于中国药典2005年版一部，具健脾渗湿，除痹止泻，清热排脓之功效。薏苡仁中脂肪油含量为7.2%。对薏苡仁的抗癌研究始于20世纪50年代，1995年薏苡仁油注射用乳剂即康莱特注射液(含含苡仁油10.0%)被国家正式批准用于抗癌治疗，现已作为一种较为理想的抗肿瘤药物广泛应用于临床“。目前普遍认为薏苡仁油中起主要作用的成分为甘油三酯，，它是首先被发现的具有抗肿瘤活性的成分，也是最受关注的化学成分。本文使用 CAD 检测器对薏苡仁中的甘油三油酸酯含量进行测定，方法学各项指标均满足测定要求，各成分分离较好。并通过6批不同来源的薏苡仁药材生成了薏苡仁的对照指纹图谱，对薏苡仁药材鉴别与质量控制有一定的指导意义。 图1.甘油三油酸酯结构 仪器 Thermo U3000 高效液相色谱仪 (Thermo Scientific)， CoronaVEO RS 检测器 (Thermo Scientific)。超声振荡器 (ThermoScientific)。 Thermo Scientific Chromeleon 6.80 色谱系统控制软件。 试剂与标准品 二氯甲烷和乙腈均为色谱纯级别 (Fisher Scientific)。所有试剂均作空白实验，符合质量控制要求方可使用。水为超纯水机制备 (Thermo Scientific)。 标准溶液的制备 精密称取甘油三油酸酯对照品适量，加流动相制成每1mL含0.1mg 的溶液，即得。 供试品溶液制备 取本品粉末0.6g，精密称定，加入流动相50mL， 称定重量，浸泡1h，超声处理30 min， 取出，放冷，称重，用流动相补足损失的重量，摇匀，滤纸过滤。收集续滤液过微孔滤膜(0.45pm)， 进液相色谱仪进行测定。 色谱柱： Acclaim 120 C18 (250×4.6mm， 5pm) (PN059149. 进样体积：5pLSN004806) 柱温：30℃ 流动相：乙腈-二氯甲烷(70：30)，流速 0.6mL/min。 检测器条件：采集频率：10Hz，雾化温度：35℃，Filter： 3。 标准品测定谱图 图2.标准品测定谱图 供试品溶液测定谱图 图3.供试品溶液测定谱图 取 0.10 mg/mL 的对照品溶液，连续进样6次，峰面积 RSD值1.26%。精密称取对照品适量，用流动相配制成浓度为0.06、0.16、0.20、0.30和0.40 mg/mL 的系列标准溶液，供高效液相色谱测定。使用 CAD 检测器 Power Function 功能，设置 power factor数值为1.1，标准曲线方程为y=72.0403x+4.3161，相关系数R=0.9999。该方法定量限(以信噪比S/N=10计)为10ng。 样品测定结果 取不同来源的薏苡仁药材，按照供试品溶液制备方法制备供试溶液，进液相色谱仪进行测定。测定结果见表1。 指纹图谱计算结果 使用2012版中药指纹图谱相似度计算软件对现有6批不 Sample Name 称样量(g) Area (pA*min) 含量(%) 金龙鱼 0.611 8.8019 1.02 古船 0.607 7.8616 0.81 百姓药业 0.593 8.1833 0.90 同仁堂药房 0.608 8.8317 1.03 天客隆超市 0.578 7.3253 0.72 保龙仓超市 0.605 8.4030 0.94 同来源的薏苡仁药材进行相似度计算。匹配图谱与计算结果分别见图4和表2。显示不同来源的薏苡仁药材具有较高的相似度，可以以此建立其指纹图谱，作为其真伪药材的判定标准。 图4.指纹图谱匹配谱图 表2.6个不同来源药材指纹图谱匹配结果 1 2 3 4 5 6 对照指纹图谱 1 1 0.994 0.992 0.997 0.998 0.999 0.999 2 0.994 1 0.977 0.995 0.995 0.994 0.995 3 0.992 0.977 1 0.99 0.99 0.992 0.993 4 0.997 0.995 0.990 1 0.998 0.998 0.999 5 0.998 0.995 0.990 0.998 1 0.996 0.999 6 0.999 0.994 0.992 0.998 0.996 1 0.999 对照指纹图谱 0.999 0.995 0.993 0.999 0.999 0.999 1 针对甘油三油酸酯在紫外下吸收较弱，本实验采用 U3000液相色谱仪和CAD测定薏苡仁中的甘油三油酸酯的含量。CAD 是一种通用型检测器，参数设置较少，较蒸发光检测器使用简便，灵敏度高。建立的方法各项指标均满足法规要求，色谱峰分离较好。根据6批薏苡仁药材建立了薏苡仁药材的 CAD 对照指纹图谱，可用于药材鉴定和质量控制。 ( [1]金黎明，刘垠孜，赵晓蕾，等.薏苡仁有效成分研究 进展[J].安徽农业科学，2011 ， 39(10)：5734，5750. ) ( [2]李大鹏， 黄洁敏，苏维埃，等.薏苡仁油脂的化学成 分分析[J].中药新药与临床药理，1999，2(10)：99. ) 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 免费服务热线：800810 5118400 6505118(支持手机用户)      薏苡（Coix lacryma-jobi L．var．ma-yuen Stapf）为禾本科薏苡属草本植物。其干燥成熟种仁称薏苡仁（Coix seed），又名薏米、菩提子、六各米和胶念珠等；收载于中国药典2005 年版一部，具健脾渗湿，除痹止泻，清热排脓之功效。薏苡仁中脂肪油含量为7.2%。对薏苡仁的抗癌研究始于20 世纪50 年代，1995 年薏苡仁油注射用乳剂即康莱特注射液（含薏苡仁油10.0%）被国家正式批准用于抗癌治疗，现已作为一种较为理想的抗肿瘤药物广泛应用于临床 [1]。目前普遍认为薏苡仁油中起主要作用的成分为甘油三酯，它是首先被发现的具有抗肿瘤活性的成分，也是最受关注的化学成分 。