动物组织中尼卡巴嗪检测方案(液相色谱柱)

动物组织中尼卡巴嗪的测定 2010-07-02 方法： SPE/HPLC 基质： ：动物组织 应用编号：101302化合物：尼卡巴嗪SPE柱： ProElut AL-B 1000mg/6mL 30/pk 色谱柱： Diamonsil C18(2) 5pm 250x 4.6mm 样品前处理： 净化： ProElut Al-B 1 g/6mL(Cat.#65206) 1、提取5g样品、2g氯化钠、20mL乙腈混合： 10000 rpm 下均质2 min， 6000 rpm 下离心5 min，上清液转入另一离心管，20 mL 乙腈重复提取一次：合并提取液。向提取液中加入10 mL正己烷：剧烈振荡：4000 rpm 下离心1 min， 弃去正己烷：再加入10 mL正己烷重复上述操作，正己烷弃去。40 oC 下将乙腈提取液减压蒸馏至干： 5ml三氯甲烷溶解解渣：待净化。 2、净化 a活化：将5mL三氯甲烷加入ProElut AI-B 1 g/6mL(Cat.#65206)，流出液弃去；b上样：将待净化液加入小柱：并用6mL三氯甲烷洗涤蒸发瓶：洗涤液加入小柱：弃去全部流出液；c淋洗： 10 mL 三氯甲烷淋洗小柱：淋洗液弃去； d洗脱： 10 mL甲醇+三氯甲烷(1+9)洗脱，收集洗脱液； e重新溶解： 40oC 下氮气吹干洗脱液：1mL流动相重新溶解：微孔滤膜过滤后， HPLC分析 色谱条件 流动相：乙腈/甲醇=30/70 流速：1.0mL/min柱温：室温检测器： UV 340 nm 文章出处： P093 关键字： 动物组织：尼卡巴嗪， ProElut Al-B， Diamonsil C18(2)，钻石二代 摘要： 适用于动物组织中尼卡巴嗪的检测。 图谱： 1.尼卡巴嗪  净化：ProElut Al-B 1 g/6 mL(Cat.#65206)  1、提取 5 g 样品、2 g 氯化钠、20 mL 乙腈混合，10000 rpm 下均质2 min，6000 rpm 下离心5 min，上清液转入另一离心管，20 mL 乙腈重复提取一次，合并提取液。向提取液中加入10 mL 正己烷，剧烈振荡，4000 rpm 下离心1 min，弃去正己烷，再加入10 mL 正己烷重复上述操作，正己烷弃去。40 oC 下将乙腈提取液减压蒸馏至干，5 mL 三氯甲烷溶解残渣，待净化。2、净化a 活化： 将5 mL 三氯甲烷加入ProElut Al-B 1 g/6 mL(Cat.#65206)，流出液弃去；b 上样： 将待净化液加入小柱，并用6 mL 三氯甲烷洗涤蒸发瓶，洗涤液加入小柱，弃去全部流出液；c 淋洗： 10 mL 三氯甲烷淋洗小柱，淋洗液弃去；d 洗脱： 10 mL 甲醇+ 三氯甲烷（1+9）洗脱，收集洗脱液；e 重新溶解：40 oC 下氮气吹干洗脱液，1 mL 流动相重新溶解，微孔滤膜过滤后，HPLC 分析