妥布霉素中有关物质检测方案(液相色谱仪)

上海通微分析技术有限公司Unimicro (Shanghai) Technologies Co.， Ltd.邮箱：info@unimicrotech.com.cn 网址 ： www.unimicrotech.com.cn 妥布霉素有关物质的测定 1.背景介绍 妥布霉素为O-3-氨基-3-脱氧-α-O-葡吡喃糖基-(1→6)-O-[2，6-二氨基-2，3，6-三脱氧-α-D-核-己吡喃糖基-(1→4)-2-脱氧-D-链霉胺。妥布霉素属于氨基糖苷类抗生素，化学构构中缺少强紫外吸收特征官能团，采用常规液相色谱紫外检测器检测存在诸多弊端。采用通用型的蒸发光散射检测器(ELSD)不需物质具有光学吸收特性，可以很好的实现妥布霉素的检测。因此本实验按照《中国药典》2015版的要求，采用液相色谱蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)建立了妥布霉素中有关物质的测定方法，方法准确、灵敏、简便快速，可以有效实现妥布霉素的质量控制。 2.样品制备 取本品适量，加水溶解并定量稀释制成每1mL中约含4mg的溶液，作为供试品溶液；精密量取适量，用水定量稀释制成每1mL中约含12 pg、24 pg、48 pg的溶液，作为对照溶液(1)、(2)、(3)。 3.测试条件 色谱柱 Bischoff ProntoSIL C18 AQ PLUS， 250×4.6 mm， 5 pm 流速 0.4 mL/min 柱温 35°C 流动相 0.2 moL/L三氟乙酸溶液 载气流量 2.5 L/min 漂移管温度 85℃ 4.测试结果 1)色普图 图1对照溶液(1)色谱图 图2对照溶液(2)色谱图 图3对照溶液(3)色谱图 图4供试品溶液色谱图 2)线性关系考察 精密量取对照溶液(1)、(2)、(3)各10pL，分别注入液相色谱仪(每一浓度连续进样3针)，记录色谱图。以对照溶液浓度的对数值与相应峰面积的对数值计算线性回归方程： 表1妥布霉素标准曲线 图5妥布霉素标准曲线 5.结论 采用 EasySep@-1020液相色谱系统，配备 ELSD检测器，可以实现妥布霉素有关物质分析，方法准确、灵敏度高，可以满足日常分析要求。 6.配置列表 仪器配置 EasySep@-1020二元梯度液相色谱仪 AS1020自动进样器 AT-330 柱温箱 ELSD-UM5800 检测器 Unimicro 色谱工作站 融液 地址：上海市浦东新区张江高科技园区松涛路489号C01座 邮编：201203 ( 电话：021-3895358850801569(技术服务专线) 传真：021-38953636 ) 妥布霉素属于氨基糖苷类抗生素，化学结构中缺少强紫外吸收特征官能团，采用通用型蒸发光散射检测器（ELSD）不需物质具有光学吸收特性，可以很好的实现妥布霉素的检测，《中国药典》2015版规定采用液相色谱蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD）测定布霉素中有关物质，以实现妥布霉素的质量控制。本实验按照《中国药典》2015版的要求建立了妥布霉素中有关物质的测定方法，采用EasySep®-1020液相色谱系统，配备ELSD检测器，方法准确、灵敏、简便快速，可以有效实现妥布霉素的质量控制。