染发剂中苯二胺检测方案(气相色谱仪)

染发剂中苯二胺的气相色谱分析 刘茜余独天 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 目标 通过对化妆品中的染发剂采取前处理来达到对其中苯二胺的分析方法，使用GC-FID完成国标中对苯二胺限量的方法开发。 引言 苯二胺是一种简单的芳香二胺，为一种广泛应用的中间体，主要用于染料制备，也常用于生产毛皮染色剂，因此他是一种常见的染发剂中的有机化合物，目前市场上的染发剂标出的成分中都含有对苯二胺。 苯二胺具有三种同分异构体，邻、间、对苯二胺，它可以经过皮肤吸收，引起皮疹、地过敏等症状。由于其为染发剂中的必要组成成份，其属于化妆品中限用化学物质，GB7916-87中规定其最大允许量为6%，卫生部卫生监督中心<化妆品卫生规范》中也对其限量有明确限制。本方法采赛默飞世尔科技气相色谱(FID)，建立了一种对染发剂中苯二胺的分析方法。 仪器 仪器条件见表1. 表1仪器参数设置 仪器型号及配置 Trace 1310-FID SSL进样口 Triplus-RSH自动进样器 色谱柱类型尺寸、S/N号及柱温 TG-5 MS， 30 m， 0.25 mm， 0.25 um 柱温：1100℃(1min)， 10℃/min 到200℃(0 min)， 20℃/min 到280℃(3min) P/N： 26098-1420； S/N：1081026 检测器类型、工作参数 FID：300℃ 尾吹气：15mL/min 载气类型及流速 氮气，恒流模式，流速：1.0mL/min 进样方式及进样体积(如使用顶空、吹扫捕集需增加具体参数) 进样模式： split，分流比：10：1，进样口温度：250℃； 进样体积：1uL 样品的前处理 称取0.5g样品，溶于1 mL 5%亚硫酸钠水溶液，涡悬震荡，加入10 mL二氯甲烷，超声提取10 min， 提取后取下层有机相以10000r/min离心15min， 离心后取上层清液2mL加氮吹至尽干，溶于2mL乙酸乙酯，待分析。 结果讨论 前处理方法的选择 参考《化妆品中苯二胺的测定>GB24800 12-2009的要求，对染发剂中的苯二胺进行分析。本方法中主要考察了五种溶剂对染发剂中苯二胺的提取回收率，考察发现其中二氯甲烷的提取效率最好。如下图1为五种染发剂对苯二胺提取的色谱图。 当采用直接用二氯甲烷提取的结果分析发现，其中对苯二胺回收率极低，该物质极易被氧化，通过实验发现，标准品储备液在放置超过3天时颜色由无色变为黑色，因此对于苯二胺的分析过程中要求标准品即配即用。因此对于易氧化的氧化剂提取方法中采用加入5%亚硫酸钠避免其氧化为对苯醌，如下图2为加入5%亚硫酸钠与未加入的对比图。 上L 图1.五种不同提取溶剂提取苯二胺的效率对比 DH4z-ppmenyeneunalme -4.04mi3.62.804.004.204.404.604.80.05.205.4G5.605.806.006.206.406.606.8194 图2.亚硫酸对对苯二胺回收影响，其中4.85处为对苯二胺 标准品色谱图及样品加标色谱图 对苯二胺为染发剂中的主要组成成份，故本方法中样品中无其它物质对所分析物质干扰，如图2为6种菊酯标准品色谱图。其中图3为样品加标色谱图。 图3标准溶液、样品、样品加标色谱图， 其中4.532为邻苯二胺，4.830为对苯二胺， 5.043为间苯二二 线性、检出限及 RSD 配制浓度分别为： 2.0、5.0、10.0、20.0、100.0、200.0、400 ug/mL的校准溶液，采用上述方法分别进样分析，考察各组分在 2.0-400.0 pg/mL 浓度范围内的线性。实验结果表明3种组分在2.0-400.0 ug/mL线性关系良好，线性相关系数均大于0.999(见表3)。 对某品牌染发剂样品添加混合标准溶液(加标浓度为 100 ug/g、60000 ug/g)，考察三种苯胺的加标回收情况。实验结果表明各组分的加标回收率均在 86.9-103.5%之间，符合日常分析检测的要求。对100、60000ug/g 加标水平平行测定6次，平均 RSD 值在4.5-8.1%，符合稳定性要求。同时以三倍信噪比计算各组分检出限，各组分仪器检出限为 2.0pg/mL(见表2)。 表2线性、检出限及RSD 数据(n=3) 化合物 线性方程 R²/% 加标100ug/g 回收率/% 加标60000 ng/g 回收率/% 仪器检出限/pg/mL RSD/% 邻苯二胺 Y=-0.0762+0.0195X 0.99945 87.5 89.4 2.0 4.5 对苯二胺 Y=-0.0857+0.0184X 0.99914 93.4 103.5 2.0 5.6 间苯二胺 Y=-0.0403+0.0176X 0.99942 86.9 93.3 2.0 8.1 总结 本实验采用赛默飞世尔科技 GC-FID 测定染发剂中的苯二胺，样品通过采用二氯甲烷提取，方法准确，灵敏度高，满足检测要求。 ( 参考文献 ) ( [1] 张 辉 .细细管气相色谱法测定氧化型染发剂中的邻、间、对苯二 胺 现代预防医学，2007，34(15)： 2835-2836. ) ( [2] Mari L uia D i G ioia， Antonella L eggio， A dolfo Le Pera， and e t c. D e termination By gas chromatography/mass spectrometry of p-phenylenediamine i n h air dyes after c onversion to a n imine d e rivative. j ournal o fchromatography A. 2 005，(1066)：143-148 ) ( [3] Mehmet Akyuz， Sevket At a . Determination of aromatic ami n es in h a ir dye and henn a sampl e s by ion - pa i r extraction and gas chromatography-mass spectrometry.journal of pharmaceutical and Biomedical analy s is .2008， (47)：68-80 ) ( [4] GB24800 12-2009，<化妆品 中 对苯二胺、邻 苯 二胺和间苯二胺 的 测定>[S]. )