妆品中中羟基喹啉检测方案

黄雄风刘绿叶 金燕许群赛默飞世尔科技(中国)有限公司 引言 羟基喹啉(hydroxyquinoline) 常用作沉淀和分离金属离子的沉淀剂和萃取剂，以及用于制造染料、农药及医药中间体，其结构式见图1。在化妆品中羟基喹啉常用作过氧化氢的稳定剂，但因其具有一有的毒性，目前欧盟 EEC 和我国《化妆品卫生规范》均规定羟基喹啉在淋洗类护发产品中限用质量分数为0.3%，在非淋洗类护发产品中限用质量分数为0.03%²。因此，建立一种快速、灵敏测定化妆品中的羟基喹啉是十分必要的。 目前检测羟基喹啉的方法主要有 HPLC法147、TLC法°分光光度法°和伏安法"等，其中TLC法和伏安法较复杂，分光光度法误差较大， HPLC 是常用的一种方法。本文拟通过优化实验条件，建立一种快速、准确测定化妆品中 8-羟基喹啉的方法。 图1.8-羟基喹啉的结构式 仪器 Thermo ScientificM DionexTM UltiMateM 3000RS 四元系统，包括： -LPG-3400RS四元分析泵(具备溶剂脱气功能) - WPS-3000RS 自动进样器(配置100pL定量环) -TCC-3000RS 柱温箱(具备控温功能) -DAD-3000RS(检测池体积 SST 2.5pL) Thermo Scientific Chromeleon 色谱系统控制软件，版本6.80或以上 试剂与标准品 去离子水，18.2 MQ-cm (Thermo Scientific GenPure Pro UV-TOC，P/N 50131948) 甲醇 (CH3CN)， HPLC 级 (Fisher Chemical， P/N AC610010040) 十二烷基磺酸钠，电子纯，含量99%(香港迪韵科技有限公司) 8-羟基喹啉，纯度99.5%(上海安谱科学仪器有限公司) 标准溶液的制备 ( 标准储备液1 ) 准确陈取0.01g8-羟基喹啉标准品于 10 mL 容量瓶中，并用甲醇定容至10mL，得到浓度为1000mg/L 的标准储备液1。 标准工作溶液 5mL，按照样品前处理步骤与样品同步处理，样品中的理论加标浓度分别为 0.5 mg/L 和 10 mg/L。 将标准储备液1用甲醇进行逐级稀释，得到浓度为0.05，0.1，0.5， 1， 5， 10， 50， 100， 200 mg/L的标准溶液，用于标线的建立。 色谱条件 样品前处理 样品 分别称取两种不同的化妆品试样0.1g，用甲醇定容至5ml，摇匀，超声提取20 min， 转移至离心管仲，在5000 r/min 速度离心10min， 用孔径为0.45 pm 的滤膜(Thermo ScientificTarget2 Nylon Syringe Filters， 0.45 pm， 30 mm， P/N F2500-1)过滤后直接进样。 色谱柱： Acclaim 120， C18， 2.2 pm (3.0×50mm)(P/N 071605)流动相：年甲醇+0.01M磷酸二氢钾(含0.01M十二烷基磺酸钠， pH2.25) =60+40(体积比)进样体积：1pL流速：0.35mL/min柱温：30℃检测：紫外吸收波长，入253nm结果与讨论 样品加标 称取两个同种化妆化试样0.1g，分别加入0.5 mL 浓度为5 mg/L 和 100 mg/L的8-羟基喹啉标准品，用甲醇定容至 为使目标化合物获得较好的信号，本文对其进行了光谱扫描，见图2。由图2可以看出，8-羟基喹啉在 253 nm 左右具有最大的紫外吸收。因此，采用253 nm 作为检测波长。 图2.8-羟基喹啉的标样谱图(5ppm)及其光谱图 方法的重现性、线性范围和检出限 为考察方法的重现性，通过连续进样7次浓度为 10mg/L的标准溶液，得到8-羟基喹啉的保留时间和峰面积的相对标准偏差 (RSD) 分别是0.059%和1.32%，见图3。在所述的色谱条件下，8-羟基喹啉在0.05-200 mg/L范围内具有良好的线性，得到的标准曲线方程为 A=0.3723c-0.2377。其中，c代8-羟基喹啉的浓度(mg/L)，A代表8-羟基喹啉所对应的峰面积。线性相关系数R=0.9997。分别以 S/N=3和S/N=10 作为检出限(LOD)和定量线(LOQ)， 得到其 LOD为 13ug/L， LOQ 为 44ug/L。 样品分析 为考察方法的可靠性，本文对实际样品进行了0.5mg/L和10mg/L两个浓度的加标，得到的回收率分别为94%和101%，说明该方法具有良好的回收率，适用于化妆品中8-羟基喹啉的测定，见图4。 为考察8-羟基喹啉在化妆品中的使用情况，本文对两种不同的化妆品进行测试，见图5。由图5可以看出，8-羟基喹啉在所测试的两个化妆品中均未检出，符合我国《化妆品卫生规范》。 图3.连续进样7针8-羟基喹啉标准品的重叠色谱图(n=7，浓度为 10mg/L) 样品分析 图4.空白、标样、样品加标(加标浓度：0.5mg/L(左)和10mg/L(右))的色谱图 图5.空白、标样(0.5mg/L)和样品的谱图 本文通过高效液相色谱-紫外检测法建立了一种快速、准确测定化妆品中8-羟基喹啉的方法，为控制化妆品等行业中8-羟基喹啉的使用提供了技术支持。 ( 参考文献 ) ( 1. Agbaba D， Mihajlovic A. Be l jhanski P， e t al. Determination of 8 -hydroxyquinoline s ulfate i n tuberculin solutionsby p lanar a nd high performance liquid chromatography.Chromatographia，1997，45，145-148. ) ( 2. D epartment f o r business enterprise & r egulatory re f orm.URN 0 8 /689 consolidation of the existing r e gulations a n dimplementation of 3 technical directives amending directive76/768/EEC on t h e s a fety of c osmetics products. L ondon：Consumer and Completition Pollcy Directorate，2008. ) ( 3. 中华人民共和国卫生部.化妆品卫生规范，北京：军 事医学科学出版社，2007. ) ( .4 . Kenji Miura， H iroshi Nakamura， Hi r oshi Tanaka， et a l. Fluorescence detection of 8-hydroxyquinoline and so m e of i tshalogented d e rivatives u s ing post-column der i vation in h ig h performance liquid chromatography， Journal of Chromatography，1981，210，536-539. ) ( 5 . 引 张培志，吴军，刘继东.高效液相色谱法分离8-羟基喹啉和8-羟基喹啉铜，分析化学，2003，31，1150 ) ( 6 .A lekssndar Mihajlovic，Danica Agbaba， D obrila Z ivanov- Stakic， et al. High-performance liquid chromatographic assay of 9 -hydro x yquinoline su l fate and its stability in im m unobiologicalpreparations， Journal of Chromatography A， 1998，798，173- 1 77. ) ( 7. 中国人民共和国国家质量监督检验检疫总局.SN/T2111-2008化妆品中8-羟基喹啉及其硫酸盐的测定方 法，北京：中国标准出版社，2008. ) ( 8 D e Kruijf N ， R ij f M A ， Pranoto-Soetardhi L A，et al.Determination o f p r eservatives in cosmetics pro d ucts：1.Thin - layer c hromatographic procedure f o r the identification ofpreservatives in cosmetics p roducts，Journal of ChromatographyA， 1987，410，395-411. ) ( 9. Josephand J A， Sezkers L. Determination of 8-hydroxyquinoline with N，2，6-trichloro-p-benzoquinoneimine，Talan ta，1976，23，558-559. ) ( 10. Guo Sujuan，Wu Xianli ， Zhou Jian， et a l .MWNT/Nafioncomposite modified g l assy carbon eletrode as the voltammetricsensor for s ensitive determiantion of 8-hydeoxyquiline i n cosmetic， Journal of Electroanalytical C hemistry，2011，655， 45- ) SCIENTIFIC AN_C_LC-