蜂蜜中羟甲基糠醛检测方案(紫外分光光度)

原理 结果 使用LAMBDA分光光度计检测蜂蜜中羟甲基糠醛 前言 羟甲基糠康 (HMF)的含量是蜂蜜质量的一个关键指标。在这篇应用文献中，将使用LAMBDATM 465 UV/Vis分光光度计和UV LabTM软件中的方程计算模式测定HMF的含量。 通常情况下，HMF是由果糖在酸性条件下分解产生的。在大多数蜂蜜中它自然而然的产生并且对蜂蜜进行热处理会迅速增加。因此，在更高的温度下它可以作为加热和储存时间的一项指标。优质的蜂蜜含有极少量的HMF。尽管HMF不是有害物质，但是许多国家限制了蜂蜜中HMF最大允许含量： 韩国食品代码：80mg/kg 欧盟理事会指令2001：40mg/kg或者80mg/kg(炎热气候下) 图1.羟甲基糠醛(HMF) 可通过测试澄清的蜂蜜水溶液的吸光度与相同蜂蜜参比溶液比值的方法测定HMF含量，因为HMF284nm处的生色团可以被酸性亚硫酸盐破坏。HMF的含量可通过如下方程进行计算： W Where ： 16830= molar absorptivity of HMF at 284 nm 试剂和仪器 1. Carrez solution I-用蒸馏水溶解15g亚铁氰化钾(K4Fe(CN)6·3H2O)并稀释到100ml 2. Carrez solution Il-用蒸馏水溶解30g醋酸锌(Zn(CH3-CO2)22H2O)并稀释到100ml 3.0.20%的亚硫酸氢钠(NaHSO3) 4.蜂蜜1，蜂蜜2 5.蒸馏水 6. LAMBDA 465(PDA UV/Vis分光光度计) 7.UVLab软件 操作步骤 1.将蜂蜜(5g：在一个小烧杯中，考虑到1mg的误差)溶解到25ml蒸馏水中，然后将所有溶液转移到50ml容量瓶中(包含冲洗烧杯残留液所用的少量蒸馏水) ( 2.加入0.5ml Carrez solution l并混合 ) 3.加入0.5ml Carrez solution I并混合 4.用蒸馏水填满容量瓶(有可能需要加入一滴酒精抑制溶液表面泡沫) 5.通过滤纸过滤出最开始的10ml滤液 6.分别吸取5ml滤液于2个试管中 7.吸取5ml蒸馏水于其中一个试管中(样品)，另一个试管中加入5ml 0.20%亚硫酸盐(参比) 8.使用漩涡混合器混合均匀 LAMBDA 465仪器参数设置如下。实验方法如图2所示。 仪器设置 Data type：AbsorbanceSampling：Single cellMode：Scan no.： 30， Integration no.： 1 计算方程 Equation Name： HMF Equation Unit： mg/100 g Wavelength： 284 nm， 336 nm Equation Expression：(Wave1-Wave2)*74.87/5 图2.实验方法 结论 蜂蜜样品的吸收光谱如图3所示。每个样品HMF含量和吸收值如表1所示。每100g蜂蜜样品所计算得到HMF的含量分别为63.625mg(蜂蜜1)和16.981mg(蜂蜜2)。 使用LAMBDA 465分光光度计和UVLab软件可以测试HMF含量进而判断蜂蜜的质量。测试结果表明，蜂蜜2的HMF含量比蜂蜜1更低。蜂蜜1超出了欧盟的HMF含量限制。UV Lab软件中方程计算模式使得HMF含量测定更加简单快速。使用LAMBDA 465可以更加快速地收集到从190nm到1100nm全波段范围内的数据。 1. White， J W(1979) Spectrophotometric method forhydroxymethylfurfural in honey. J Assoc Off Anal ChemVol 62 509-514 图3.蜂蜜吸收光谱 表1.蜂蜜中HMF含量 (mg/kg) Name HMF (mg/kg) 284 nm 336 nm Honey 1 63.625 0.4295 0.0046 Honey 2 16.981 0.1177 0.0043 珀金埃尔默企业管理(上海)有限公司 地址：上海张江高科技园区张衡路1670号 邮编：201203 电话：021-60645888 传真：021-60645999 www.perkinelmer.com.cn 要获取全球办事处的完整列表，请访问http：// www.perkinelmer.com.cn/AboutUs/ContactUs/ContactUs 版权所有 ◎2014， PerkinElmer， Inc. 保留所有权利。PerkinElmer@ 是PerkinElmer， Inc. 的注册商标。其它所有商标均为其各自持有者或所有者的财产。