肉制品中β-受体激动剂检测方案(液相色谱柱)

引领分析科技尽在北京谱朋-企业QQ：4006 165163使用UPCC-M5/MS检测肉制品中常见的受-受体激动剂的残留量 使用UPLC-M5/MS检测肉制品中常见的β-受体激动剂的残留量 简介 与当前所采用的GB/T22286-2008LC法相比，采用本UPLC-MS/MS法时，样品制备步骤更为简单、运行时间可减少73%(本法运行一次仅需7分钟，而目前的GB法运行时间为26分钟)、溶剂使用量更少。相当于节省了1，925小时的仪器运行时间。 图1.1A)盐酸克伦特罗、1B)莱克多巴胺、1C)沙丁胺醇。 样品制备 图2说明了样品制备步骤。 图2.样品制备步骤一览。 色谱条件 液相色谱系统： ACQUITY UPLC运行时间： 7.0min色谱柱： ACQUITY UPLC HSS T3， 1.8 pm， 2.1x100 mm柱温： 30℃进样器温度： 10℃进样量： 5uL流速： 0.4mL/min 流动相 A：含0.1%(v/v)甲酸的水溶液 B：含0.1%(v/v)甲酸的乙腈溶液梯度 时间 流速 B% 梯度线型 初值 5 初值 1.2 5 59 41 6 59 41 0 100 6 0 100 95 5 6 质谱条件 质谱系统： Xevo TQ-S MS 电离模式： ESI+ 毛细管电压： 3.5kV锥孔电压： 30V离子源温度： 150℃ 脱溶剂温度： 550℃ 脱溶剂气体流速：900L/H 碰撞气体流速： 0.19 mL/min 化合物名称 母离子 子离子 锥孔电压 碰撞能量 (m/z) (m/z) (V) (eV) 盐酸克伦特罗 276.9 167.8 25 25 202.9 15 D9-盐酸克伦 286.1 168.6 25 35 特罗 203.9 15 莱克多巴胺 302.1 106.9 30 32 164.0 15 D5-莱克多巴按 307.1 107.1 30 32 167.0 15 沙丁胺醇 239.9 147.8 25 20 165.9 12 D3-沙丁胺醇 243.0 150.7 25 18 168.8 12 表1.分析β-受体激动剂及其稳定同位素内标物的MRM参数。 结果 图3.对-受体激动剂的肉加标样品进行UPLC-MS/MS分析时所得到的色谱图实例(β-受体激动剂的加标浓度为1ng/mL，相当于每kg肉样中含有0.2pg/kg)。 图4.肉样品的UPLC-MS/MS色谱图。在样品中仅检测到盐酸克伦特罗。检测到盐酸克伦特罗样品的含量为1.9 pg/kg。 加标量 盐酸克伦特罗 莱克多巴胺 沙丁胺醇 回收率 相对 回收率 相对 回收率 相对 标准偏 标准偏 标准偏 % 差% % 差% % 差% 0.10 ug/kg 92.8 5.5 81.0 4.3 90.4 10.5 1.0ug/kg 98.7 4.3 99.1 5.0 98.1 4.8 10.0ug/kg 99.2 4.6 96.6 4.0 100.0 6.9 表2.三种浓度下的回收率。 图5.比较了在进行β-受体激动剂混标分析时，不同进样次数的UPLC-MS/MS色谱图。三种-受体激动剂的浓度均为1.0 ng/mL。每两个色谱图分别是在第1，600次进样及第5，500次进样时，由同一根ACQUITY UPLC色谱柱上采集的数据(如色谱图中所示)。 ( 参考文献 ) ( 1. Illegal use of beta-adrenergic agonists： European Community， J. Anim. Sci.1998， 76：195-207. ) ( 2 . 7 0 ill after eating tainted pig organs， China Daily， February 23， 2009http：//www.chinadaily.com.cn/china/2009-02/23/content_7501017.htm ) ( 3 . C hinese Ministry of Agriculture Bulletin 1 76， February 9th， 2002.4. C hinese M i nistry of Agriculture B u lletin 235， December 24th， 2002. ) ( 5 . Determination of beta-agonists residues in foodstuff of animal origin， liquid c hromatography with tandem-mass spectrometric m e thod， China National standard GB/T 22286-2008. ) ( 6 . Controlling Contamination i n UltraPerformance LC/MS and H P LC/MS Systems，Waters Literature 715001307EN，Rev. F. ) [ 色谱条件液相色谱系统： ACQUITY UPLC运行时间： 7.0 min色谱柱： ACQUITY UPLC HSS T3, 1.8 μm, 2.1 x 100 mm柱温： 30 °C进样器温度： 10 °C进样量： 5 μL流速： 0.4 mL/min流动相A：含0.1%(v/v)甲酸的水溶液B：含0.1%(v/v)甲酸的乙腈溶液梯度