辣椒油中辣椒油中罗丹明B检测方案

Agela Technologies博纳艾杰尔产品应用案例 辣椒油中罗丹明B的分析方法 AF10129 应用及技术服务部 摘要：本实验采用固相萃取结合高效液相色谱的方法，建立了辣椒油中罗丹明B的检测方法。样品经20%丙酮的正己烷溶液(V/V)提取， Cleanert Alumina-N 固相萃取柱净化， Venusil MP C18 色谱柱(4.6×150mm， 5 um， 100A)分离，水和甲醇为流动相进行洗脱，外标法进行定量。结果表明，罗丹明B添加量为 0.05 mg/kg时，回收率在90%~100%之间，能够满足检测要求。 关键词：罗丹明B； Venusil MP C18色谱柱； Cleanert Alumina-N 前言 罗丹明 B(Rhodamine B)又称玫瑰红B，或碱性玫瑰精，俗称花粉红，是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。经老鼠试验发现，罗丹明B会引致皮下组织生肉瘤，被怀疑是致癌物质。罗丹明B在溶液中有强烈的荧光，用作实验室中细胞荧光染色剂、有色玻璃、特色烟花爆竹等行业。曾经用作食品添加剂，但后来实验证明罗丹明B会致癌，现在已不允许用作食品染色。 因此通过有效的实验技术手段，对辣椒油中的有关罗丹明B残留进行监控，以确保消费者对辣椒油消费的安全具有重要意义。 本实验通过优化前处理方法建立了罗丹明B在辣椒油中的高效液相色谱的检测方法。 实验部分 仪器、试剂与材料 主要仪器设备 高效液相色谱仪(紫外检测器)； 博纳艾杰尔12位负压 SPE 装置。 试剂材料 ( 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：3 0 0462 ) ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： serv i ce@agela . com.c n 网址： w w w.agela.c o m.cn 客服：400-606-8099 ) 丙酮、甲醇、正己烷为色谱纯；实验用水为超纯水；罗丹明B标准品(纯度99%)；一次性无菌注射器； Nylon 针式过滤器(0.45 um， 直径13 mm)； Cleanert Alumina-N 固相萃取柱：2000mg/6mL 样品制备 样品提取 称取1g辣椒油于40 mL 玻璃瓶中，加入10 mL 20%丙酮的正己烷溶液(V/V)，振荡摇匀后待净化。 样品净化 先将小柱用6mL正己烷活化平衡，然后将待净化液过柱，弃去全部流出液，然后用 10 mL 20%丙酮的正己烷溶液(V/V)进行淋洗，最后用10 mL 2%氨化甲醇(V/V)洗脱。收集洗脱液于40℃氮气吹干，用1mL甲醇溶解残留物，过 0.45 um Nylon 针式过滤器后待测。 以上净化步骤可用卓睿全自动固相萃取仪完成。 实验条件 液相条件 色谱柱：Venusil MP C18， 5 um， 1100A，， 4.6×150mm 流动相：甲醇：水=75：25(V/V) 柱温：30℃ 进样量：20uL 检测波长：550 nm 结果与讨论 实验结果 由表1可知，采用固相萃取结合液相色谱法检测罗丹明B，辣椒油基质加标回收率在90%以上，能够满足标准要求。 表1.辣椒油中罗丹明B加标回收实验结果 ( 地址：天津经济开发区西区南大街179号 邮编：3 0 0462 ) ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： serv i ce@agela . com.c n 网址： w w w .agela.c o m.cn 客服：400-606-8099 ) 物质名称 保留时间 添加水平/mg/kg 平均回收率 RSD /% /% 罗丹明B 5.578 0.05 95.7 1.3 图1.0.05ug/mL罗丹明B标准溶液液相色谱图 图2.辣椒油基质空白液相色谱图 电话：022-25321032 传真：022-25321033 图3.0.05 mg/kg辣椒油基质加标液相色谱图 结论 本实验建立了辣椒油中罗丹明B残留量的检测方法，并结合高效液相色谱对辣椒油中罗丹明B的含量进行了测定。对于加标量为 0.05 mg/kg 的辣椒油样品，回收率在90%~100%之间，符合实验要求。 附：相关产品 产品名称 规格描述 包装数量 订货号 Venusil MP C18 5 um， 100 A， 4.6×150 mm 1支 VA951505-0 Cleanert Alumina-N 2000 mg/6 mL 30 支/包 AL20006N Qdaura卓睿全自动固相萃取系统 4通道 1台 SPE-40 15位氮吹仪 15位 1台 NV15-M 保护柱套 适用于4.6×10 mm 和2.1×10 mm 1支 SH-100 直联式保护柱芯 5 um， 100 A； 4.6×10 mm 4支/包 VA950105-0S 1.5 mL样品瓶 短螺纹透明带书写处32×11.6 mm 100/pk 1109-0519 1.5 mL 样品瓶盖 9mm 中心孔蓝盖，红色橡胶/米色 PTFE 隔垫 45°Shore A； 1.0mm 100/pk 0915-1819 Nylon针式过滤器 单膜， 13mm， 0.45 u.m 200个/包 AS021345 一次性注射器 2 mL无针头 100支/包 LZSQ-2ML ( 电话：022-25321032 传真：022-25321033 ) ( Email： serv i ce@agela . com.c n 网址： w w w.agela.c o m.cn 客服：400-606-8099 ) 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：mail： service@agela.com.cn 网址： www.agela.com.cn 客服： 地址：天津经济开发区西区南大街 邮编：