赶黄草杆中没食子酸检测方案(液相色谱仪)

高效液相色谱法分析赶黄草杆中的没食子酸 赶黄草，学名扯根菜，属于古蔺道地药材，是苗族民间治疗肝病的经验方，称为"神仙草”具有清热解毒、退黄化湿、活血化瘀、利水消肿之功效。现代研究表明，赶黄草含有没食子酸和皮素，有抗肝病毒和保护肝脏、恢复肝功能、减低饮酒和药物对肝脏的损害之功效，可预防酒精肝、脂肪肝、抑制肝纤维化、肝硬化，并对甲、乙肝炎、慢性肝炎具有良好的治疗作用。本文选取赶黄草的茎，即赶黄草杆作为研究对象，用高效液相色谱法对其没食子酸含量进行测定。该方法操作简单，成本低，对设备要求低，可作为赶黄草的鉴定和质量评价的有效方法之一。 1材料与方法 1.1主要材料与试剂 赶黄草杆(四川风味特产专营店)没食子酸标准品(北京北纳创联生物技术研究院)；甲醇(色谱纯)；磷酸(分析纯)；碳酸氢钠(分析纯)；氨水(分析纯)；乙酸乙酯(分析纯)。 1.2主要仪器与设备 LC5510 高效液相色谱仪(配有紫外检测器)，北京东西分析仪器有限公司；在线脱气机，北京东西分析仪器有限公司；水浴锅；高速万能粉碎机等。 1.3试验条件 1.3.1色谱条件 色谱普：EWAI C18-2 柱(250mmX4.6mm，5pm) 缓冲液：0.05%磷酸溶液； 流动相：甲醇：缓冲液=15：85； 流速：1.0ml/min，进样量 10pL， 柱温：室温； 检测波长：273nm 1.3.2标准溶液配制 取没食子酸标准品适量用水稀释制成1000mg/L的母液，用水稀释成浓度为0.1 mg/L、0.5mg/L、1.5mg/L、2mg/L的标准溶液，依次进高效液相色谱仪进行分析，标准品色谱图如图2，校准曲线如图1，线性关系为Y=24734.39X+0.00，相关系数为 0.99985。 [峰面积] 图1没食子酸的校准曲线 1.3.3样品制备与测定 赶黄草杆样品烘干后进行粉碎，称取粉末适量，向其中倒入适量沸水，然后恒温水浴 1小时，过滤，向滤液中加入适量0.15%碳酸氢钠溶液并用水定容至刻度，吸取该液适量至分液漏斗中，加等体本乙酸乙酯，振荡，静止，吸取下层溶液经0.45pm 滤膜过滤后进LC-510色谱仪分析，得到样品色谱图如图3. 2结果与分析 2.1色谱图及含量测定 图2没食子酸标准品谱图 [吸光度] 图3赶黄草杆提取液谱图 重复测量三次后，对谱图进行积分，由LC5510操作软件经校准曲线计算获得赶黄草杆样品中没食子酸含量为10.15 mg/Kg。见下表： 测量序号 峰高 峰面积 测量浓度(mg/L) 样品中含量(mg/Kg) 样品中含量平均值(mg/Kg) RSD/% 1 228 5136 0.2076 10.34 10.15 1.999 2 225 5056 0.2044 10.18 3 223 4936 0.1995 9.94 3结论 高效液相色谱仪对复杂样品具有优越的分析能力，尤其适用于中药提取物的分析。本文采用该方法对赶黄草杆中的没食子酸进行分析。试验表明，本方法具有线性好，精密度高，峰型好，成本低，操作简单，分析速度快等优点。 -- --