药用辅料中苯甲醇检测方案(毛细管柱)

网络出版时京豫维科技有限公司联系人：水先生电话：18911849923j.is中南药学2014年10月第12卷第10期Central South Pharmacy. October 2014， Vol. 12 No.10 药典规定乌药药材去甲异波尔定含量≥0.4%，3批乌药药材中去甲异波尔定平均转移率为92.3%，1g缩泉丸中含0.3g乌药，以药典规定应≥0.4%计算，缩泉丸中去甲异波尔定含量限度拟定为 1.1 mg'g 3.4 小结 本方法简便、准确、可靠，检测指标更丰富、更全面，对缩泉丸质量控制具有一定参考价值。 ( 参考文献 ) ( [1] 邓义 卫 ，韦国麟.缩泉丸治疗遗尿症临床应 用 和实验研究 概况[ J]. 黑龙 江 医药，20 1 2， 2 5 (1) ： 1 2 9 -1 3 2 . ) ( [2 ] 杨素梅.缩 泉 丸加味联合针刺夜尿点治疗小 儿 遗尿20例[] . ) ( 内蒙古中医 药 ，201 3，3 2 ( 6 ) ： 2 0 . ) ( [3 ]陈建超.加味缩泉丸治疗女性特发性膀胱过度活动症4 6 例 [] . 中 国民族民间医 药 ，201 0， 1 9 (1 0 ) ： 1 1 7 . ) ( [4 ] 吴 勘辉，庄洪涛.缩泉丸治疗儿童 遗 尿症60 例 [] .陕 西中医， 20 0 7 ， 2 8 (1 1) ：15 21 - 15 2 2 . ) ( [5 ] 张金龙.张士卿教授运用 桑 螺峭散合缩泉丸治疗小儿遗尿 经验[] . 中 医 儿科杂志，200 9 ，5(3) ：20 0 - 20 3 . ) ( [6 ] 张红旗，李全香.缩泉 丸 合桑螺加减治疗肾虚型小儿遗尿尿频39例[. 中国 民间疗法 ， 2011， 19( 1 1)：3 4-3 5 . ) ( [7 ] 张华本.研究缩泉丸治疗儿童儿尿症60例 [ ] .陕西 中 医 ， 20 0 7， 1 ( 1 1) ： 2 0 -2 1 . ) ( [8] 中 国药典2010 年版. 一 部 [S]. 20 10 ： 71 -7 2 ， 1218. ) ( ( 收 稿 日期 ：20 13-1 2 -2 5 ；修 回 日期 ： 201 4 - 0 2-05 ) ) 气相色谱法测定苯甲醇的含量 李兰1.2，刘雁鸣12，龙海燕'，粟贵'(1.湖南药用辅料检验检测中心，长沙少410014；2.中南大学药学院，长沙410013) 摘要：目的 建立气相色谱法测定苯甲醇的含量。方法 采用 Rtx-Wax 气相毛细管柱(0.25mm×30 m， 0.25um)， FID检测器，柱温130℃；进样口温度为200℃；检测器温度230℃。结果 苯甲醇在0.5433~1.6298mg·mL内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9995)，低、中、高浓度的平均回收率在100.0%~101.4%，RSD 均<2.2%(n=3)。结论 本方法准确度高、重现性好，适用于苯甲醇的含量测定。 关键词：气相色谱法；苯甲醇；含量测定 中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：1672-2981(2014)10-1013-03 doi：10.7539/j.issn.1672-2981.2014.10.020 Determination of benzyl alcohol by GC LI Lan’，LIU Yan-ming，LONG Hai-yan'， SU Gui' (1. Hunan Pharmaceutical Excipients Testing and Insepec-tion Center； Changsha 410014；2. School of Pharmaceutical science， Central South University， Changsho410013) Abstract： Objective To establish a GC method to determine benzyl alcohol. Methods The chromatographicseparation was carried out on the capillary column Rtx-Wax (0.25 mm×30 m， 0.25 um)， and FID was used as thedetector. The column temperature was 130℃ ， the temperature of inlet and detector was 200℃ and 230℃， re-spectively. Results TThe benzyl alcohol has a good linearity at 0.543 3-1.6298mg·mL(r=0.999 5). Theaverage recoveries were at 100.0%-101.4%， with RSDs were less than 2.2%(n =3).Conclusion This method isreproducible and accurate to determine the content of benzyl alcohol. Key words： GC； benzyl alcohol； content determination 苯甲醇作为药用辅料，原来在制剂中主要作用是止痛、防腐，因不良反应，其止痛作用已经弱化，主要用作防腐剂，应用于液体制剂及半固体制剂"。本品的现行标准为中国药典2010年版二部正文第一部分，为原料 药品种，含量测定采用经典的滴定法，该方法存在一些缺陷：①吡啶-醋酐溶液不能使用太长时间，需临时配制，而且吡啶毒性较大，气味难闻；②标准中要求水浴加热回流 30 min， 但是研究发现，水浴回流不能出现 ( 主任药师，主 要 从 事药品 质 量分析与质量评价， E-m a i l ： y m liu68@ y a hoo .com.cn ) “连续下滴的冷凝液”，影响实验人员对回流时间的判断。同时所用滴定液浓度较大(1mol·L的氢氧化钠滴定液)，产生的综合影响体现在样品测试时平行性较差，相对偏差超过了滴定法一般要求的0.1%。另外，酰化剂回流操作复杂，专属性不强。因此，拟参考该品种“苯甲醛”项下色谱条件，建立 GC 法测定本品的含量，该方法准确度高、重现性好，适用于苯甲醇的含量测定。 1仪器与试药 1.1仪器 SHIMADZU GC-2010气相色谱仪(日本岛津，GCsolution 工作站， FID检测器)。 1.2试药 苯甲醇对照品(批号：00112，德国Dr. Ehrenstorfer公司，纯度为99.5%)；苯甲醇样品来自国内被抽验单位的18批样品(批号为121107、104020131001、104020130901、121205、121103、130410、130710、130602、121104、104020130201、104020121201、120902、104020131003、130709、130611，其中3批为不同抽样点的同批号样品)，4批化工级别样品(批号为10174711、LH60N35、WXBB1716V、20130122)，一共22批苯甲醇样品；甲醇为色谱纯。 2方法与结果 2.1 色谱条件 采用键合交联聚乙二醇为固定液的毛细管柱； FID检测器；进样口温度200℃；检测器温度230℃；柱温130℃；载气流速：氮气为1.0mL· min；氢气为40mL·min，空气为400 mL· min1；分流进样，分流比为100：1，进样羊：1pL。 2.2溶液的配制 2.2.1对照品溶液的制备取苯甲醇对照品适量，置棕色量瓶中，精密称定，加甲醇溶解并稀释，制得1mg·mL的苯甲醇溶液，摇匀，即得。 2.2.2!份供试品溶液的制备取本品适量，置棕色量瓶中，精密称定，加甲醇溶解并稀释制成1mg·mL'的苯甲醇溶液，摇匀，即得。 2.2.3空白溶液的制备 取甲醇，即得。 2.3方法学考察 2.3.1专属性考察 取对照品、供试品及空白溶液，分别进样测定，结果见图1。由图1A可以看出在空白溶液色谱图中，苯甲醇主峰位置未出现干扰峰，说明空白溶剂不干扰苯甲醇含量的测定。 图1苯甲醇气相色谱图 Fig 1 Gas chromatogram of benzyl alcohol A. 空白溶液(blank solution)； B. 对照品溶液 (reference solution) ； C.供试品溶液 (test solution)； 1.苯甲醇(benzyl alcohol) 2.3.2标准曲线的制备 取苯甲醇对照品 109.20 mg， 置10 mL 棕色量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，使成每mL含苯甲醇10.865 mg 的对照品储备液。精密量取对照品储备液1.5、1.2、1.0、0.8、0.5 mL 置10 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成不同浓度的对照品溶液。分别精密量取上述溶液1 pL， 注入气相色谱仪，记录色谱图，以进样浓度(C， mg·mL~)为横坐标，峰面积(A)为纵坐标，绘制标准曲线，并计算回归方程为y=2.57×10x-2.00×10*， r=0.999 5。结果表明苯甲醇浓度在0.5433~1.6298 mg·mL与峰面积呈良好的线性关系(n=5)。 2.3.3苯甲醇的定量限 精密配制苯甲醇对照品系列浓度溶液，注入气相色谱仪，记录色谱图，使苯甲醇峰高约为仪器响应噪声的10倍，测得苯甲醇的定量限为 0.804 ng。 2.3.4精密度试验按“2.2.1”项中方法制备苯甲醇对照品溶液，依法测定，连续进样6次，以苯甲醇峰面积计算，RSD 为 0.41%。表明本法精密度好。 2.3.5 重复性试验取 WXBB1716V批(以下均为该批苯甲醇样品)样品6份，按“2.2.2”项中方法制备供试品溶液，依法测定，计算每份苯甲醇的含量，平均含量为99.49%， RSD 为 0.72%。表明本法重复性好。 2.3.6稳定性试验按“2.2.2”项中方法制备供试品溶液， 分别在0、0.5、1、2、4、8、16h依法测定，测得苯甲醇峰面积RSD 为 0.32%，表明供试品溶液在16h 内稳定。2.3.7回收试验 取本品(批号WXBB1716V，含量为99.5%)适量，精密称定，分别置50 mL棕色量瓶中，加入苯甲醇对照品适量，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，依法测定，计算回收率，结果见表1。 表1加样回收收验结果(n=3) Tab 1 Recovery (n=3) 取样量 加入量 测得量 回收率 平均回收率 (sample (added ( detected RSD (recovery) ((average weight) amount) amount) /% /% recovery)/% /mg /mg /mg 23.07 22.34 45.79 101.6 101.4 1.2 21.45 21.66 43.4] 101.4 20.43 20.51 40.97 100.1 27.79 27.93 56.37 102.3 100.0 2.0 27.27 27.07 54.11 99.1 26.97 25.64 52.29 98.7 34.40 33.52 68.34 101.3 100.1 1.1 32.95 32.48 65.15 99.2 33.21 30.77 63.94 99.9 北京豫维科技有限公司联系人：系先生电话：18911849923 中南药学2014年10月第12卷第10期Central South Pharmacy. October 2014， Vol. 12 No.10 2.3.8 耐用性试验 按“2.2.2”项下方法制备供式品溶液，另选用DB-Wax气相毛细管柱(0.32mm×30m， 0.25um)和 DB-FFAP气相毛细管柱(0.32mm×30 m， 0.50um)。分别取同一批号供试品溶液，3种型号色谱柱测定，结果 RSD 为 0.48%，说明不同型号色谱柱的测定本品的含量结果相近，本法色谱柱耐用性好。 2.4 样品含量测定 取22批苯甲醇样品，按“2.2.2”项下方法制备供试品溶液，各精密量取1pL，注入气相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算供试品中苯甲醇的含量。测定结果为98.6%~100.9%。 3 结论与讨论 3.1与原标准方法的比较 原方法原理为：苯甲醇与酰化剂(醋酐-吡啶)在加热条件下反应，生成乙酸苯甲酯和乙酸，再用氢氧化钠滴定乙酸。通过得到的乙酸含量计算苯甲醇含量。将GC法测定结果与滴定法测定结果绘成曲线图(见图2)。结果显示2种方法测定结果曲线未表现出相同的变化趋势，提示滴定法专属性存在问题，而GC法操作相对简单、快速、环保，易于掌握。 3.2方法的确定 图22种方法含量测定结果的比较 Fig 2 Comparison of two methods of content determination 本文建立的 GC测定苯甲醇的含量，经专属性、线性、精密度、重复性、稳定性、回收试验等方法学验证，得出本方法操作简单、结果准确、重现性好，适用于测定苯甲醇的含量。 ( 参考文献 ) ( [1] 药 用辅 料 手册[M ] . Rowe RC， S h e s ke y P J ， W eller P J编.郑 俊 民 主译.北 京： 化 学 工 业 出 版 社，20 0 4： 64-66. ) ( [2 ] 中 国药典20 1 0 年版. 二部[ S ] . 2010： 4 3 9. ) ( ( 收 稿 日 期：20 1 4 -03-20 ； 修 回 日期 ：2 01 4 -0 4- 2 0) ) 国产酚磺乙胺的有关物质研究 兰文，易必新，张珂*(湖南省食品药品检验研究院，长沙410001) 摘要：目的 建立测定酚磺乙胺中有关物质的 HPLC方法，并对主要未知杂质进行定性研究。方法 采用Agilent ZORBAX NH，(4.6 mm×250 mm， 5 um)色谱柱，以甲醇-0.2%磷酸二氢钾溶液(10：90)为流动相，检测波长220 nm， 流速1.0mL·min；对已知杂质进行定性、定量分析；未知杂质用制备液相色谱纯化，再采集质谱和核磁共振谱的数据，用于结构确定。结果 在选定的色谱条件下，酚磺乙胺与各杂质峰均能良好地分离，方法学考察符合分析检测要求。根据质谱和核磁共振谱数据，分离提纯的未知杂质的结构得到初步确认。结论 建立的方法简便、灵敏，专属性好，，可同时测定酚磺乙胺中的已知杂质及其他未知杂质；未知杂质结构的确定，为酚磺乙胺的质量控制提供了理论依据。 关键词：酚磺乙胺；有关物质；高效液相色谱法；结构确认 中图分类号： R917 文献标识码：A 文章编号：1672-2981(2014)10-1015-04 doi：10.7539/j.issn.1672-2981.2014.10.021 Related substances of domestic etamsylate LAN Wen， YI Bi-xin， ZHANG Ke’(Hunan Institute for Food and Drug Control， Changsha 410001) Abstract： Objective To establish an HPLC method to determine the related substances ofetamsylate， and to determinethe structure of unknown impurity. Methods The Agilent ZORBAX NH， (4.6 mm×250 mm， 5 um) column was used，and the mobile phase was consisted of methanol-0.2% potassium dihydrogen phosphate solution (10 ：90). The flowrate was 1.0 mL· minwith UV detective wavelength at 220 nm. Preparative liquid chromatograph was used to ( 基金项目： 国家药品药准提高研究课题(No.20 10 22 4) ； 国 家药品评价抽验计划质 量评 价分析项目(No.20 1 11 8 5 ) 。 ) ( 作 者 简介：兰 文 ，女，主 管 药师，主 要 从 事药品 检 验工作， Te l： ( 07 3 1 ) 8 2275 86 1， 13 3 1 9 50 2 168， E- m ail： l a n - wen@q q. com ) ( 通讯作者 ：张，女 ， 主 管 药师，主 要 从事药品检验工作， Te l： l ： ( 07 3 1 ) 8 2 2 758 61， E -ma i l ：5 115568 7@q q. c om ) 址：： www. yuweichina.com日邮箱watercom 气相色谱法测定苯甲醇的含量建立气相色谱法测定苯甲醇的含量。方法 采用Rtx-Wax气相毛细管柱(0.25 mm×30 m,0.25μm),FID检测器,柱温130℃;进样口温度为200℃;检测器温度230℃。结果 苯甲醇在0.543 3~1.629 8mg·mL-1内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 5),低、中、高浓度的平均回收率在100.0%~101.4%,RSD均<2.2%(n=3)。结论 本方法准确度高、重现性好,适用于苯甲醇的含量测定。