农产品中农药残留检测方案(气相色谱仪)

食品中有毒有害物质的测定 1.农药残留量的测定： 农药是农业生产中使用的各种药剂的总称，种类很多，但常用的有有机氯农药和有机磷农药两称，种类很多，但常用的有有机氯农药和有机磷农药两类。 实验的目的：随着科学技术的发展，人们对食品质量要求的提高，食品中有害有毒物质不断地被发现，其产生的机理、对人体有害剂量的大小及清除污染的方法不断被人们所认识。食品中的有害有毒物质，不同程度地危害着人类健康。对食品中的有害有毒物质进行分析检测，有利于加强食品质量的监督管理，保障人民的身体健康。 农药在防治农作物病虫害、制人畜传染病、提高类。农药在防治农作物病虫害、控制人畜传染病、提高农畜产品的产量和质量以及确保人体健康等方面，都起农畜产品的产量和质量以及确保人体健康等方面，都起着重要的作用。 农药对食物的污染途径主要有： 农田施用农物的污染。农药对食物的污染途径主要有：农田施用农药时，直接污染农作物；因水质的污染进一步污染水产药时，直接污染农作物；因水质的污染进一步污染水产品；土壤中沉积的农药通过农作物的根系吸收到作物组品；土壤中沉积的农药通过农作物的根系吸收到作物组织内部而造成污染；大气中漂浮的农药随风向、雨水对织内部而造成污染；大气中漂浮的农药随风向、雨水对地面作物、水生生物产生影响；饲料中残留的农药转入 地面作物、水生生物产生影响；饲料中残留的农药转入禽畜体内，造成此类加工食品的污染。 农药残留是指一部分农药由于其很强的化学稳定性，施用后不易分解，仍有部分或大部分残留在土壤中、作物上及环境中。食品中普遍存在农药残留，残留量随食品种类及农药的种类不同而有很大差异，由于农药的毒性都很大，有的还可在人体内蓄积，对人体造成危害。为提高食品的卫生质量，保证食品的安全性，保障消费者的身体健康，许多国家都对食品中农药允许残留量做了规定。  测定方法： 气相色谱法是常用的检测农药残留的方法，具有很高的专一性和灵敏度，对于非挥发性或热 不稳定的农药，如部分有机磷农药可选用ＨＰＬＣ法。 ２．１有机氯农药残留量的测定－－－－气相色谱法  有机氯农药的性质及常见品种有机氯农药（ＯＣＰｓ）是农药中一类有机含氯化合 物。常见的有机氯农药有六六六（ＢＨＣ）、滴滴涕（ＤＤＴ），均为神经毒性物质，脂溶性很强，不溶或微溶于水。在生物体内的蓄积具有高度选择性，多贮存于机体脂肪组织或脂肪多的部位。对光、热、酸均很稳定。在碱性环境中易分解失效。从２０世纪７０年代开始，许多工业化国家相继限用或禁用某些ＯＣＰｓ，其中主要是ＤＤＴ、六六六。我国早已停止 生产和使用有机氯农药。但由于其性质稳定，在自然界不易分解，属高残留品种，因此在世界许多地方的空气、水域和土壤中仍能够检测出微量ＯＣＰｓ的存在，并会在相当长时间内继续影响食品的安全性，危害人类健康。  原理： 样品中六六六、滴滴涕经提取、净化与浓缩后用气相色谱法测定，与标准比较定量。电子捕获检测器对于负电极强的化合物具有较高的灵敏度，利用这一特点，可分别测出微量的六六六和滴滴涕。不同异构体和代谢物可同时分别测定。此法为国家标准检验方法，适用于土壤、粮食、果蔬、肉、蛋、乳等及其制品中的有机氯农药的测定。  仪器与试剂： （１）仪器小型粉碎机小型绞肉机组织捣碎机电动振荡器旋转浓缩蒸发器吹氮浓缩器 气相色谱仪：具有电子捕获检测器（ＥＣＤ）　　　　　　（２）　试剂①丙酮②正己烷； ③石油醚：沸程３０～６０℃；④苯；⑤硫酸；⑥无水硫酸钠；⑦硫酸钠溶液（２０ｇ／Ｌ）； ⑧六六六、滴滴涕标准溶液：作为储备液存于冰箱中。⑨六六六、滴滴涕标准使用液 操作步骤： （１）提取：由于大多数有机氯农药是弱极性化合物，其脂溶性高，故可用弱极性的有机溶剂进行提取，如丙酮、已烷、乙醚及石油醚等。由于食品种类繁多、组成复杂，故需根据样品种类及其含水量选择恰当的提取剂，并采用不同的提取方法。对于粮食及脂肪含量高的食品如动植物油脂、奶油等，可直接用石油醚或环己烷提取。对于蔬菜、水果及蛋与蛋制品，可先用亲水性溶剂丙酮提取，然后加硫酸钠溶液稀释，再以石油醚提取有机氯农药。加硫钠的目的是增大丙酮液的极性，降低有机氯农药在丙酮中溶解度，使其更完全地转移到石 油醚中，而水溶性杂质则留在丙酮层中。对于乳及乳制品，由于脂肪球外包围一层脂肪球 膜，为利于脂肪与有机氯农药被有机溶剂提取，应先加入乙醇与草酸钾并振摇，以破坏脂肪球膜，然后以乙醚—石油醚提取，提取的醚层应经无水硫酸钠脱水去杂。对于鱼、禽、肉类及其制品，可采用如下两种方法提取，一是先加入无水硫酸钠研磨至干粉状以脱水，然后用己烷或石油醚提取； 二是加入高氯酸—冰醋酸（１：１）进行水浴消化处理，再用石油醚提取，提取的醚层应经无水硫酸钠脱水去杂（２）净化：原因：由于提取液中常含有脂肪、蜡质及色素等干扰测定的杂质，如ＧＣ分析中，会引起峰拖尾、色谱柱分离效能下降等，故须对样品提取液进行净化，方法：对于在酸中稳定的ＢＨＣ及ＤＤＴ等农药，常采用加入浓硫酸磺化的方法进行净化，常用的操作方法是于提取液中加相当于提取液量１／１０　的浓酸，轻轻振摇并静置分层，则提取液中干扰杂质由于浓硫酸的磺化作用而生成极性大，且易溶于酸、水的化合物，便与有机氯农药分离而除去。操作时，浓硫酸加入量不宜过多，否则会降低有机氯农药回收率；加入硫酸磺化净化的次数应以提取液中干扰杂质多少而定，般１～３次，以观察到振摇后硫酸层清亮力度。（３）浓缩：净化洗涤后的石油醚提取液，通过无水硫酸钠脱水后于浓缩器中减压蒸馏浓缩至０．２～１．０ｍＬ，然后再用石油醚定容，供测定用。但注意的是绝不可将净化液蒸干，否则会带来很大误差  测定 ①气相色谱参考条件 色谱柱：内径３～４ｍｍ，长１．２～２ｍ的玻璃柱，内装涂以ＯＶ－７　（１５ｇ／Ｌ　）和ＱＦ－１（２０ｇ／Ｌ）的混合固定液的８０～１００目硅藻土。②Ｎｉ一电子捕获检测器：汽化室温度：２１５℃；色谱柱温度；１９５℃；检测器温度：２２５℃；载气（氮气） 流速：９０ｍＬ／ｍｉｎ；③标准曲线的绘制：分别吸取ＢＨＣ、ＤＤＴ　标准混合溶液１、２、３、４、５µＬ进样，根据各农药组分含量（ｎｇ）与其相对应的峰面积（或峰高），绘制各农药组分的标准曲线。④样品的测定：吸取样品处理液１．０￣５．０　µＬ进样，记录色谱峰，根据其峰面积在ＢＨＣ、ＤＤＴ各异构体的标准曲线上查得相应的组分含量。 食品中有毒有害物质的测定1.农药残留量的测定：农药是农业生产中使用的各种药剂的总称，种类很多，但常用的有有机氯农药和有机磷农药两称，种类很多，但常用的有有机氯农药和有机磷农药两类。 实验的目的：随着科学技术的发展，人们对食品质量要求的提高，食品中有害有毒物质不断地被发现，其产生的机理、对人体有害剂量的大小及清除污染的方法不断被人们所认识。食品中的有害有毒物质，不同程度地危害着人类健康。对食品中的有害有毒物质进行分析检测，有利于加强食品质量的监督管理，保障人民的身体健康。 农药在防治农作物病虫害、制人畜传染病、提高类。农药在防治农作物病虫害、控制人畜传染病、提高农畜产品的产量和质量以及确保人体健康等方面，都起农畜产品的产量和质量以及确保人体健康等方面，都起着重要的作用。 农药对食物的污染途径主要有：农田施用农物的污染。农药对食物的污染途径主要有：农田施用农药时，直接污染农作物；因水质的污染进一步污染水产药时，直接污染农作物；因水质的污染进一步污染水产品；土壤中沉积的农药通过农作物的根系吸收到作物组品；土壤中沉积的农药通过农作物的根系吸收到作物组织内部而造成污染；大气中漂浮的农药随风向、雨水对织内部而造成污染；大气中漂浮的农药随风向、雨水对地面作物、水生生物产生影响；饲料中残留的农药转入地面作物、水生生物产生影响；饲料中残留的农药转入禽畜体内，造成此类加工食品的污染。农药残留是指一部分农药由于其很强的化学稳定性，施用后不易分解，仍有部分或大部分残留在土壤中、作物上及环境中。食品中普遍存在农药残留，残留量随食品种类及农药的种类不同而有很大差异，由于农药的毒性都很大，有的还可在人体内蓄积，对人体造成危害。为提高食品的卫生质量，保证食品的安全性，保障消费者的身体健康，许多国家都对食品中农药允许残留量做了规定。Ø测定方法：气相色谱法是常用的检测农药残留的方法，具有很高的专一性和灵敏度，对于非挥发性或热不稳定的农药，如部分有机磷农药可选用ＨＰＬＣ法。２．１有机氯农药残留量的测定－－－－气相色谱法Ø有机氯农药的性质及常见品种有机氯农药（ＯＣＰｓ）是农药中一类有机含氯化合物。常见的有机氯农药有六六六（ＢＨＣ）、滴滴涕（ＤＤＴ），均为神经毒性物质，脂溶性很强，不溶或微溶于水。在生物体内的蓄积具有高度选择性，多贮存于机体脂肪组织或脂肪多的部位。对光、热、酸均很稳定。在碱性环境中易分解失效。从２０世纪７０年代开始，许多工业化国家相继限用或禁用某些ＯＣＰｓ，其中主要是ＤＤＴ、六六六。我国早已停止生产和使用有机氯农药。但由于其性质稳定，在自然界不易分解，属高残留品种，因此在世界许多地方的空气、水域和土壤中仍能够检测出微量ＯＣＰｓ的存在，并会在相当长时间内继续影响食品的安全性，危害人类健康。Ø原理：样品中六六六、滴滴涕经提取、净化与浓缩后用气相色谱法测定，与标准比较定量。电子捕获检测器对于负电极强的化合物具有较高的灵敏度，利用这一特点，可分别测出微量的六六六和滴滴涕。不同异构体和代谢物可同时分别测定。此法为国家标准检验方法，适用于土壤、粮食、果蔬、肉、蛋、乳等及其制品中的有机氯农药的测定。Ø仪器与试剂：（１）仪器小型粉碎机小型绞肉机组织捣碎机电动振荡器旋转浓缩蒸发器吹氮浓缩器气相色谱仪：具有电子捕获检测器（ＥＣＤ）　　　　　　（２）　试剂①丙酮②正己烷；③石油醚：沸程３０～６０℃；④苯；⑤硫酸；⑥无水硫酸钠；⑦硫酸钠溶液（２０ｇ／Ｌ）；⑧六六六、滴滴涕标准溶液：作为储备液存于冰箱中。⑨六六六、滴滴涕标准使用液操作步骤：（１）提取：由于大多数有机氯农药是弱极性化合物，其脂溶性高，故可用弱极性的有机溶剂进行提取，如丙酮、已烷、乙醚及石油醚等。由于食品种类繁多、组成复杂，故需根据样品种类及其含水量选择恰当的提取剂，并采用不同的提取方法。对于粮食及脂肪含量高的食品如动植物油脂、奶油等，可直接用石油醚或环己烷提取。对于蔬菜、水果及蛋与蛋制品，可先用亲水性溶剂丙酮提取，然后加硫酸钠溶液稀释，再以石油醚提取有机氯农药。加硫钠的目的是增大丙酮液的极性，降低有机氯农药在丙酮中溶解度，使其更完全地转移到石油醚中，而水溶性杂质则留在丙酮层中。对于乳及乳制品，由于脂肪球外包围一层脂肪球膜，为利于脂肪与有机氯农药被有机溶剂提取，应先加入乙醇与草酸钾并振摇，以破坏脂肪球膜，然后以乙醚—石油醚提取，提取的醚层应经无水硫酸钠脱水去杂。对于鱼、禽、肉类及其制品，可采用如下两种方法提取，一是先加入无水硫酸钠研磨至干粉状以脱水，然后用己烷或石油醚提取； 二是加入高氯酸—冰醋酸（１：１）进行水浴消化处理，再用石油醚提取，提取的醚层应经无水硫酸钠脱水去杂（２）净化：原因：由于提取液中常含有脂肪、蜡质及色素等干扰测定的杂质，如ＧＣ分析中，会引起峰拖尾、色谱柱分离效能下降等，故须对样品提取液进行净化，方法：对于在酸中稳定的ＢＨＣ及ＤＤＴ等农药，常采用加入浓硫酸磺化的方法进行净化，常用的操作方法是于提取液中加相当于提取液量１／１０　的浓酸，轻轻振摇并静置分层，则提取液中干扰杂质由于浓硫酸的磺化作用而生成极性大，且易溶于酸、水的化合物，便与有机氯农药分离而除去。操作时，浓硫酸加入量不宜过多，否则会降低有机氯农药回收率；加入硫酸磺化净化的次数应以提取液中干扰杂质多少而定，般１～３次，以观察到振摇后硫酸层清亮力度。（３）浓缩：净化洗涤后的石油醚提取液，通过无水硫酸钠脱水后于浓缩器中减压蒸馏浓缩至０．２～１．０ｍＬ，然后再用石油醚定容，供测定用。但注意的是绝不可将净化液蒸干，否则会带来很大误差ØØ测定①气相色谱参考条件色谱柱：内径３～４ｍｍ，长１．２～２ｍ的玻璃柱，内装涂以ＯＶ－７　（１５ｇ／Ｌ　）和ＱＦ－１（２０ｇ／Ｌ）的混合固定液的８０～１００目硅藻土。②Ｎｉ一电子捕获检测器：汽化室温度：２１５℃；色谱柱温度；１９５℃；检测器温度：２２５℃；载气（氮气）流速：９０ｍＬ／ｍｉｎ；③标准曲线的绘制：分别吸取ＢＨＣ、ＤＤＴ　标准混合溶液１、２、３、４、５µＬ进样，根据各农药组分含量（ｎｇ）与其相对应的峰面积（或峰高），绘制各农药组分的标准曲线。④样品的测定：吸取样品处理液１．０￣５．０　µＬ进样，记录色谱峰，根据其峰面积在ＢＨＣ、ＤＤＴ各异构体的标准曲线上查得相应的组分含量。