食品中β-胡萝卜素含量检测方案(液相色谱仪)

液相色谱仪测定食品中β-胡萝卜素含量 样品中的β-胡萝卜素，用石油醚-丙酮（80:20）混合液提取，经氧化铝柱纯化，然后以高效液相色谱仪测定，以保留时间定性，峰高或峰面积定量。 测定所需仪器：高效液相色谱仪、具可调波长紫外可见检测器；离心机；旋转蒸发器。 测定步骤： 1 样品提取 淀粉类食品。称取10.0g样品于25mL带塞量筒中混合液提取，吸取上层黄色液体并转入蒸发器中，重复提取直至提取液无色，合并提取液，于旋转蒸发器上蒸发至干。 液体样品。吸取10.0mL样品于250mL分液漏斗中，加入石油醚-丙酮（80:20）20mL提取，然后静置分层，将下层水溶液放入另一分液漏斗中再提取，直至提取液无色为止。合并提取液，在旋转蒸发器上蒸发至干。 油类食品。称取10.0g样品于25mL带塞量筒中，加入石油醚-丙酮（80:20）提取，反复提取，直至上层提取液无色，合并提取液，于旋转蒸发器蒸发至干。 2 纯化 将上述样品提取液残渣，用少量石油醚溶解，然后进行氧化铝柱色谱。先用洗脱液丙酮-石油醚洗氧化铝柱，然后再加入溶解样品提取液的溶液，用丙酮-石油醚洗脱β-胡罗素，控制流速为20滴/min，收集于10mL容量瓶中，用洗脱液定容至刻度。用0.45µm微孔滤膜过滤，滤液作HPLC分析用。 3 HPLC参考条件 流动相：甲醇+乙腈（90+10）；流速1.2ml/min；波长448nm。 4 样品测定 吸取已纯化的溶液20µL，注入高效液相色谱仪 (​http:​/​​/​www.kj17.com​)，依法操作，从标准曲线查得或回归求得被测液中所含β-胡罗卜素的量。 样品中的β-胡萝卜素，用石油醚-丙酮（80:20）混合液提取，经氧化铝柱纯化，然后以高效液相色谱仪测定，以保留时间定性，峰高或峰面积定量。测定所需仪器：高效液相色谱仪、具可调波长紫外可见检测器；离心机；旋转蒸发器。测定步骤：1  样品提取淀粉类食品。称取10.0g样品于25mL带塞量筒中混合液提取，吸取上层黄色液体并转入蒸发器中，重复提取直至提取液无色，合并提取液，于旋转蒸发器上蒸发至干。液体样品。吸取10.0mL样品于250mL分液漏斗中，加入石油醚-丙酮（80:20）20mL提取，然后静置分层，将下层水溶液放入另一分液漏斗中再提取，直至提取液无色为止。合并提取液，在旋转蒸发器上蒸发至干。油类食品。称取10.0g样品于25mL带塞量筒中，加入石油醚-丙酮（80:20）提取，反复提取，直至上层提取液无色，合并提取液，于旋转蒸发器蒸发至干。2  纯化将上述样品提取液残渣，用少量石油醚溶解，然后进行氧化铝柱色谱。先用洗脱液丙酮-石油醚洗氧化铝柱，然后再加入溶解样品提取液的溶液，用丙酮-石油醚洗脱β-胡罗素，控制流速为20滴/min，收集于10mL容量瓶中，用洗脱液定容至刻度。用0.45µm微孔滤膜过滤，滤液作HPLC分析用。3  HPLC参考条件流动相：甲醇+乙腈（90+10）；流速1.2ml/min；波长448nm。4  样品测定吸取已纯化的溶液20µL，注入高效液相色谱仪，依法操作，从标准曲线查得或回归求得被测液中所含β-胡罗卜素的量。