动植物组织中DNA或RNA检测方案(研磨机)

高通量组织研磨仪GT100 实验案例(快速提取DNA或 RNA) GT100是小型的采用研磨珠的破碎仪，可同时快速处理48个样品 优点： ■可同时破碎多至48个样品■样品适配器可在干冰或液氮中预冷，以避免生物分子降解■能处理多种样品，结果重现性高处理多至48个样品 GT100 (LT)装配上适配器就可以工作了，在2ml的离心管\中加入样品和一粒研磨珠，多至24个样品，然后将管子放入适配器，将适配器拧紧到 GT100的活塞上，活塞上下快速的震动使得研磨珠在样品管中震动而将样品磨碎并匀质化。破碎的效果与广泛使用的TissueLyser II (德国 QIAGEN) 相当(图5、7-9)，常规组织使用5 mm钢珠，必要时可多加1粒，研磨珠与进口的研磨机通用 图1高效破碎组织。各种大鼠的组织使用 GT100 (LT)和 TissueLyser II 分别破碎 A在QIAcube上使用 DNeasy Blood & Tissue Kit 来纯化25mg 样品中的 DNA ，产量用分光光度计测量。 ( B在 Q IAcube 上 使 用 R N easy Fibrous Tissue Mini Kit (皮 肤 ，心 脏，肺 ) 或RN e asy Lip i d Tissue Mini Kit ( 脑 )。 来纯化20m g 样品 中 的RNA ，产量用 分光 光度 计 测量。 ) 图2.高RIN 值表明RNA 高纯度和完整性。 大鼠心脏和肺(各20mg)使用GT100(LT)破碎后，在QIAcube 上使用 RNeasy Fibrous Tissue Mini Kit 纯化 RNA， 用 Agilent 2100 bioanalyzer 来分析 RIN 值分别为8.336(心脏)和9(肺)。 图 3.完整的蛋白质用于各种分析。 各种大鼠组织(各25mg)经Allprotect Tissue Reagent 稳定后使用 GT100 (LT) 或 TissueLyser II 破碎，然后使用 Qproteome Mammalian Protein Prep Kit 抽提总蛋白，用 western blotting检测。 A 转膜后用 Ponceau S 染色 B western Blot 检测。LT： GT100(LT)； II： TissueLyser II； M：分子量标记。       GT100（LT） 装配上适配器就可以工作了，在2ml 的离心管\中加入样品和一粒研磨珠，多至24个样品，然后将管子放入适配器，将适配器拧紧到GT100的活塞上，活塞上下快速的震动使得研磨珠在样品管中震动而将样品磨碎并匀质化。破碎的效果与广泛使用的TissueLyser II（德国QIAGEN） 相当（图5、7-9 ），常规组织使用5 mm钢珠，必要时可多加1粒，研磨珠与进口的研磨机通用