液相色谱仪中应用检测方案(液相色谱仪)

液相色谱仪应用文集北京东西分析仪器有限公司 EAST & WESTANALYTICAL INSTRUMENTS， INC 液相色谱仪应用文集北京东西分西仪器有限公司 EAST & WESTANALYTICALINSTRUMENTS，INC. H555 分析应用 液相色谱仪器应用文集 完美分析辉映东西 目录 第一篇乳制品 第四篇饲料 尊敬的客户： 您好! LC5500/5510型液相色谱仪是我公司的拳头产品，推出至今已有二十多年的历史。该产品系列曾获2001年BCEIA金奖，被认定为北京市自主创新产品，其中"波纹片式脉动缓冲器"技术申请为专利。该仪器性能稳定，还可用于车载应急检测。 2014年恰逢北京东西分析仪器有限公司成立二十六周年。我们继2011年推出《东西分析食品安全文集》之后，整合液相色谱仪近年来应用实例，为您精心编制了这本液相色谱仪应用文集，希望能对您有所帮助。 该文集涵盖近年来国内外液相色谱仪应用的热点、焦点、难点问题，涉及乳制品、食品添加剂、兽药残留、医药、饮用水及饲料行业的应用。其中液相色谱应用的难点IgG的测定；2013年应用热点双氰胺事件、“可乐门"四甲基乙唑事件、“毒淀粉"事件以及“瘦肉精"事件；氨基酸类、维生素类物质的检测在本手册中均有详细方案。 乳制品中三聚氰胺的测定 4-5 饲料中维生素A的测定 55-56乳制品中泛酸的测定 6-7 饲料中维生素E的测定 57-58乳制品中苯甲酸、山梨酸的测定.... 8-9 饲料中泛酸的测定 59-60乳制品中牛磺酸的测定 10-11 饲料中烟酸和叶酸的测定 61-62乳制品中烟酰和烟酰胺的测定 12-13 饲料中维生素B1的测定 63-64乳制品中维生素A和E的测定 14-15 饲料中维生素B2的测定 65-66乳制品中β-胡萝卜素的测定 16-17 饲料中维生素B6的测定 67-68乳制品中IgG的测定 18-19 饲料中维生素B12的测定 69-70乳制品中三聚氰胺快速检测 20-21 饲料中维生素K3的测定 (.171-72乳制品中双氰的的检测 22-23 饲料中维生素D3的测定..... 73-74乳制品中维生素D的测定 24-25 饲料中氨基酸的测定 75-76 我们的使命：东西方科学技术精华，创中国分析仪器奇迹。我们将不断努力给客户提供完美的整套解决方案。 第二篇食品添加剂及非法添加物质 第五篇医药 由于我们自身的水平和眼界的局限，文集中一定有许多不足。希望您可以批评指正。 植物油中维生素E的测定 .....27-28饮料中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定.............9-30小麦粉中过氧化苯甲酰的测定.. 31-32饮料中安赛蜜的测定 33-34肉制品中苯甲酸、山梨酸的测定 35-36水产品中孔雀石绿的测定 .-...37-38可乐中4-甲基咪唑的测定 39-40淀粉中马来酸和富马酸的测定 中药薤白中腺苷的测定 78-79 黄芪中金胺O的测定 .....80-81 感冒药中葛根素的测定2.... 82-83 人参皂甙的测定 84-85 人参皂甙的测定 86-87 胶囊中尼泊金酯的测定2. 88-89 胶囊中色素的测定 90-91 ( 东西分析市场部 2014年1月 ) 41-42 第六篇饮用水 第三篇兽药残留 饮用水中甲萘威的测定 93-94 土霉素、四环素和金霉素的测定 44-45 饮用水中莠去津的测定.... .....95-96 己烯雌酚的测定 46-47 瘦肉精-莱克多巴胺的测定 48-49 瘦肉精一盐酸克伦特罗的测定 50-51 同时测定莱克多巴胺和克伦特罗 52-53 乳制品中三聚氰胺的测定 三聚氰胺俗称密胺、蛋白精，是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，被用作化工原料。它是白色单斜晶体，几乎无味，微溶于水，可溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等，不溶于丙酮、醚类。对身体有害，不可用于食品加工或食品添加物。 参照标准：GB/T22388-2008 参照标准：GB/T22388-2008 样品溶液制备 称取2g(精确至0.01g) 试样于50mL具塞塑料离心管中，加入15 mL三氯乙酸溶液和5mL乙腈，超声提取10 min， 再振荡提取10 min后，以不低于4000 r/min离心10min。上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容至25 mL， 移取5mL滤液，加入5mL水混匀后过固相萃取柱净化，洗脱液于50℃下用氮气吹干，用1mL流动相定容，涡旋混合1 min， 过微孔滤膜后，供HPLC测定。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250 mmx4.6mm， 5um 流动相 离子对试剂缓冲液(准确称取2.10g柠檬酸和2.16g辛烷磺酸钠，加入约980mL水溶解，调节pH至3.0后，定容至1L)+乙腈=90+10 流速 1.0 mL/min 柱温 40℃ 检测波长 240 nm 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC5510柱温箱 检测器 LC5510紫外检测器 工作站 LC5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 SCX固相萃取柱 3mL 溶剂过滤器 一次性无针头注射器 5mL/1mL 固相萃取装置 针式过滤器 0.22pm、有机系 氮吹仪 电子天平 精度0.0001g 涡旋混合器 离心机 一 C18色谱柱 250mmx4.6 mm， 5 pm 乳制品中泛酸的测定 泛酸又名维生素B3，因广泛存在于自然界故被命名为泛酸。泛酸是由泛解酸和β-丙氨酸组成的一种化合物。 图1三聚氰胺标准样品谱图 图2样品谱图 参照标准： GB10765，6，7-1997 样品溶液制备 称取混合均匀的固态试样约5g或液态试样约20g(精确至0.0001 g) 于150mL三角瓶中，固体试样加入约30mL40℃~50℃温水，振摇溶解后超声萃取20 min。(若样品中含有定粉，称取样品后加入淀粉酶约0.2g， 固体试样加入约30mL 40℃~50℃C温水振摇溶解，盖上瓶塞，在50℃~60℃条件下酶解30 min)。试样溶液降至室温后，用0.1mol/L盐酸调节 pH至4.5±0.1，加入5mL硫酸锌溶液，充分混合。转入100mL容量瓶中，用水定容至刻度并充分混匀后，用滤纸过滤。滤液经0.45 pm滤膜过滤后即为试样待测液。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250 mmx4.6 mm， 5pm 流动相 磷酸二氢钾溶液(0.05mol/L)+甲醇=8+2，0.45pm微孔滤膜过滤。 流速 1.0mL/min 柱温 30℃ 检测波长 200nm 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5pm 溶剂过滤器 一次性无针头注射器 5mL/1mL PH计 精度0.01 针式过滤器 0.45pm， 水系 电子天平 精度0.0001g 涡旋混合器 乳制品中苯甲酸、山梨酸的测定 0.0500.040.04山梨酸、苯甲酸是国际粮农组织和卫生组织推荐的高效安全的防腐保鲜剂，广泛应用于食品、饮料、烟草、0.04农药、化妆品等行业。0.040.040·参照标准：GB21703-20100.038样品溶液制备 称量3g(精确至0.0001g)样品于100mL容量瓶中， 加10mL水(40℃左右)用玻璃棒搅拌至完全0.036 A溶解。加入25mL氢氧化钠溶液，混合后置于超声波水浴或70℃水浴中处理15 min。冷却后，用硫0.034酸溶液(约2mL左右)将pH调节到8，然后加入2 mL亚铁氰化钾溶液和2 mL乙酸锌溶液。剧烈振0.032摇，静置15 min，混合后冷却到室温，再用甲醇定容，静置15 min， 上清液经过滤膜过滤。收集滤液作为试样溶液，用于高效液相色谱仪测定。5 10 11 12时间(min)色谱条件图1泛酸标准样品谱图色谱柱 C18柱，250 mmx4.6 mm， 5 pm流动相 磷酸盐缓冲溶液(液别称取2.5g磷酸二氢钾(KH2PO4) 和2.5g磷酸氢二钾(K2HPO-3H20)于1000mL容量瓶中，用水定容到刻度后混匀)+甲醇=9+1，0.45pm微孔滤膜过滤。0.12-流速 1.0 mL/min柱温 室温0.11-检测波长 227nm￥0.10-进样量 20 pL仪器配置0.08品高压泵 P-101A单泵或升级为双泵0.07·柱温箱 LC-5510柱温箱 0.06-检测器 LC-5510检测器工作站 LC-5510液相色谱工作站0.05-2 3 4 5 6 8 9 10 11 12在线脱气机(选配) DM-101时间(min)自动进样器(选配) AS-401图2样品谱图实验所需设备设备名称 规格 设备名称 规格组分名称 保留时间(min)超声波水浴 一次性无针头注射器 5mL/1mL泛酸 6.48溶剂过滤器 针式过滤器 0.45pm，有机系PH计 精度0.01 C18色谱柱 250mmx4.6mm， 5pm电子天平 精度0.0001g 涡旋混合器 图1苯甲酸、山梨酸标准样品图 图2样品谱图 组分名称 保留时间(min) 苯甲酸 8.58 山梨酸 12.49 乳制品中牛磺酸的测定(单磺酰氯柱前衍生法) 牛磺酸是一种结构简单的含硫氨基酸，在动物体内具有广泛的生物学活性，化学名称为2-氨基乙酸，牛磺酸主要存在于动物组织的细胞质中。牛磺酸不但是我们体内需要的重要营养素之一，而且对婴儿大脑神经发育具有深远影响。 参照标准： GB5413.26-2010 样品溶液制备 称取固体样品1g~5g，(精确至0.0001g)， 于100mL 容量瓶中，加入80mL温水(50℃~60℃)溶解，充分混匀，置超声波振荡器上振荡 10 min， 冷却到室温。加1.0 mL 沉淀剂亚铁氰化钾溶液，涡旋混合， 1.0mL沉淀剂乙酸锌溶液，涡旋混合，用水定容至刻度，充分混匀，试液于 5000r/min下离心10 min。吸取1.00 mL上清液到10mL具塞玻璃试管中，加入1.00mL碳酸钠缓冲液，1.00mL丹磺酰氯溶液，充分混合，室温避光衍生反应2h(1h后需摇晃1次)， 加入0.10 mL 盐酸甲胺溶液涡旋混合，以终止反应，避光静置至沉淀完全。取上清液经0.45 pm微孔滤膜过滤，取滤液备用。衍生物在4℃可避光保存 48h。另取 1.00mL标准工作液，与试液同步进行衍生。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250mmx4.6 mm， 5pm 流动相 10mmol/L乙酸钠溶液+乙腈=70+30，0.45um微孔滤膜过滤 流速 1.0 mL/min 柱温 室温 检测波长 254nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 一次性无针头注射器 5mL/1mL 溶剂过滤器 -— 针式过滤器 0.45pm， 有机系 PH计 精度0.01 C18色谱柱 250 mmx4.6mm， 5pm 电子天平 精度0.0001g 涡旋混合器 .....- 离心机 5000r/min 乳制品中烟酰和烟酰胺的测定 烟酸在人体内转化为烟酰胺，烟酰胺是辅酶丨和辅酶Ⅱ的组成部分，参与体内脂质代谢，组织呼吸的氧化过程和糖类无氧分解的过程，是婴幼儿不可缺少的维生素之一。 参照标准：GB5413.15-2010 图1牛磺酸标准样品谱图 图2样品谱图 组分名称 保留时间(min) 牛磺酸 9.35 样品溶液制备 称取混合均匀固体试样约5.0g(精确到0.0001 g) 加入约25 mL 45℃~50℃的水，振摇，静置5min~ 10 min， 充分溶解，并冷却至室温，于超声波振荡器中振荡约10 min。用盐酸调节试样溶液的pH值至1.7±0.1，放置约2 min 后，再用氢氧化钠溶液调节试样溶液的pH值至4.5±0.1。将试样溶液转至50 mL 容量瓶中，用水定容至刻度，混匀后经滤纸过滤，滤液再夜0.45pm微孔滤膜加压过滤，即为试样待测液。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6 mm， 5 pm 流动相 甲醇70mL， 异丙醇20mL， 庚磺磺酸钠1g，用910mL水溶解并混匀后，用高氯酸调pH至2.1±0.1，经0.45pm膜过滤。 流速 1.0 mL/min 柱温 25℃ 检测波长 261nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵升升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站： LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 一次性无针头注射器 5mL/1mL 溶剂过滤器 针式过滤器 0.45pm，水系 PH十 精度0.01 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5pm 电子天平 精度0.0001g 涡旋混合器 乳制品中维生素A和E的测定 参照标准： GB5413.15-2010 组分名称 保留时间(min) 烟酸 5.26 烟酰胺 6.19 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6 mm， 5 pm 流动相 甲醇 流速 1.0mL/min 柱温 35℃ 检测波长 维生素A：325nm 维生素E： 294nm 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 氮吹仪 溶剂过滤器 离心机 5000r/min 电子天平 精度0.0001g 涡旋混合器 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5 pm 针式过滤器 0.22pm、有机系 旋转蒸发仪 一次性无针头注射器 5mL/1mL 恒温磁力搅拌器 紫外分光光度计(校正浓度) 乳制品中β-胡萝卜素的测定 图1奶粉样品中维生素A、E谱图 组分名称 保留时间(min) 维生素A 5.30 维生素E 14.46 参照标准： GB 5413.35-2010 样品溶液制备 称取混合均匀的固体试样约10g(精确至0.0001g)， 置于250mL三角瓶中，用50mL45℃~50℃的水溶解并混合均匀，加入1.0g抗坏血酸和100 mL 95%乙醇， 混匀并加入25 mL氢氧化钾溶液混匀，皂化约45 min 后， 取刻冷刻冷却到室温。用石油醚提取，过无水硫酸钠过滤脱水。滤液收入500mL烧瓶中，于旋转蒸发器上在40℃的充氮条件下蒸至近干(绝不允许蒸干)。用石油醚溶解残渣并转移至10 mL 容量瓶中定容。准确移取石油醚样品溶液2.0 mL于10mL试管中，40℃下吹干。加入1.0mL正烷烷，振荡溶解残渣离心后待测。(注：实验操作过程中应注意避光。) 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6 mm， 5um 流动相 三氯甲烷+乙腈+甲醇=3+12+85，1L的流动相中加入0.4g的抗坏血酸，经0.45pm膜过滤后备用。过滤。 流速 2.0mL/min 柱温 35℃ 检测波长 450nm 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵升升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 氮吹仪 溶剂过滤器 离心机 5000r/min 电子天平 精度0.0001g 涡旋混合器 C18色谱柱 250mmx4.6mm， 5um 紫外分光光度计(标液校正) 旋转蒸发仪 恒温磁力搅拌器 图1β-胡萝卜素标准样品谱图 图2样品谱图 乳制品中IgG的测定 牛初乳作为一种功能性食品的原料已经受到普遍关注。它被越来越多的添加到乳制品中，这样的乳制品常常按IgG含量来定价，因此IgG的检测越来越受到重视。 参照标准： GB5009.194-2003 样品溶液制备 称取0.1g(精确至0.001g)试样，用流动相A稀释至25.0mL，摇匀，通过0.45 pm微孔滤膜后进样。 色谱条件 色谱柱 Pharmacia HI-Trap Protein G 柱，1mL 流动相 流动相A： pH6.5， 0.05 mol/L 磷酸盐缓冲液。 流动相B： pH2.5，0.05 mol/L甘氨酸盐酸缓冲液 时间 A/%) B/(%) 0 100 0 4.5 100 0 5.5 0 100 18.0 0 100 18.5 100 0 25.0 100 0 流速 0.4mL/min 柱温 室温 检测波长 280nm 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 一次性无针头注射器 5mL/1mL 溶剂过滤器 针式过滤器 0.45pm，水系 PH计 精度0.01 Pharmacia HI-Trap ProteinG柱 1 mL 电子天平 精度0.0001g 涡旋混合器 图1IgG标样图谱(1.0mg/mL) 图2样品谱图 乳制品中三聚氰胺快速检测 三聚氰胺俗称密胺、蛋白精，是一种三嗪类含氮杂环有机化合物，被用作化工原料。它是白色单斜晶体，几乎无味，微溶于水，可溶于甲醇、甲醛、乙酸、热乙二醇、甘油、吡啶等，不溶于丙酮、醚类。对身体有害，不可用于食品加工或食品添加物。 参照标准： GB/T 22400-2008 样品溶液制备 称取混合均匀的15g原料乳空白样品(准确至0.01g)， 置于50mL具塞刻度试管中，加入30mL乙 腈，剧烈烈荡6 min， 加水定容至满刻度(即50mL)，充分混匀后离心，用一次性注射器吸取上清 液用针式过滤器过滤后，作为高效液相色谱分析用试样。 色谱条件 色谱柱 SCX强阳离子交换色谱柱， 250mmx4.6 mm， 5pm。 流动相 磷酸盐缓冲溶液-乙腈(70+30，体积比) 流速 1.0 mL/min 柱温 30 ℃ 检测波长 240 nm 进样量 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵升升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 一次性无针头注射器 5mL/1mL 溶剂过滤器 针式过滤器 0.22pm、有机系 PH计 精度0.01 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5pm 电子天平 精度0.0001g 涡旋混合器 乳制品中双氰胺的检测 媒体爆出新西兰出产的部分牛奶和奶粉中检测出少量双氰胺化学残留物，引起了广泛关注。氰胺化学名称为二氰二氨、二聚氰胺，白色结晶粉末，是一种复合含氮化肥的成分。目前，国家还没有规定食品中可接受的双氰胺含量标准和检测方法。 参照标准：无 样品溶液制备 称取1g(精确至0.0001g)奶粉样品于50mL具塞离心管中，加2mL水，涡旋30s，加2ml乙腈涡旋 30s。再加入2mL乙腈重复提取2次，合并提取液。以4000r/min离心5min， 取2mL上清液加入双氰 胺净化管涡旋30s后， 4000r/min离心10min，取全部上清液于玻璃试管中，50℃下司气吹干，加入 50%乙腈水溶液，摇匀，过0.22pm微孔滤膜，进液相色谱测定。 色谱条件 色谱柱 HILIC柱， 250 mmx4.6mm ， 5pm 流动相 乙乙+乙酸铵溶液(0.01mol/L， PH=4.20)=90+10 图1三聚氰胺标准样品谱图 流速 1.0 mL/min 柱温 30℃ 检测波长 220nm 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC5510柱温箱 检测器 LC5510检测器 工作站 LC5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 一次性无针头注射器 5mL/1mL 溶剂过滤器 针式过滤器 0.22um、有机系 涡旋混合器 ........... 电子天平 精度0.0001g HILIC柱 250 mmx4.6 mm， 5 pm 离心机 5000r/min 双氰胺净化管 500mg/15mL 氮吹仪 图2样品谱图 组分名称 保留时间(min) 三聚氰胺 12.69 图11.0pg/mL标样谱图 图2某品牌奶粉添加1.0pg/g双氰胺谱图 组分名称 保留时间(min)双氰胺 4.90 乳制品中维生素D的测定 维生素D为固醇类衍生物，有抗佝偻病作用，又称抗佝偻病维生素。维生素D家族成员中最重要的成员是D2和D3。植物不含维生素D， 但维生素D原在动、植物体内都存在。维生素D是一种脂溶性维生素，有五种化合物，对健康关系比较密切的是维生素D2和D3。 参照标准：GB5413.9-2010 样品溶液制备 称取混合合匀的固体试样试10g或液体试样约50g(精确到0.1 mg) 于250mL三角瓶中，固体试样需用约50mL 45℃~50℃水使其溶解，混合均匀。皂化45min后，用石油醚萃取，旋转蒸发至近干，用石油醚溶解残渣，定容至10mL。再于氮吹仪上吹干，加2.0mL正己烷，振荡溶解残渣。再将试管以不低于5000转/分钟的速度离心10min， 取出静置至室温后待测。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250 mmx4.6mm， 5 pm 流动相 甲醇 流速 1.0mL/min 柱温 35℃ 检测波长 264nm 进样量 100 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵升升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 氮吹仪 ..... 溶剂过滤器 离心机 5000r/min 电子天平 精度0.0001g 涡旋混合器 C18色谱柱 250 mmx4.6mm， 5 um 针式过滤器 0.45pm， 有机系 旋转蒸发仪 一次性无针头注射器 5mL/1mL 恒温磁力搅拌器 图1奶粉样品中维生素D加标谱图 组分名称 保留时间(min) 维生素D 12.17 分析应用 植物油中维生素E的测定 维生素E也叫生育酚，是人体内抗氧化作用、维持生殖功能和神经、免疫、上皮细胞正常反应的重要维生素。它能够促进细胞新陈代谢，增加肌肉细胞的营养，防止动脉硬化，改善血液循环，预防关节炎等作用。食用油通常是人们从膳食中摄取维生素E的主要来源。不同的植物油中生育酚的种类和含量有所不同。橄榄油和葵花子油中主要含有α-生育酚，玉米油中主要为γ-生育酚，大豆油中则含有相对较高的8-生育酚。 参照标准： NY-T1598-2008 样品溶液制备 称取样品5g左右(精确至0.0001g)，加入乙醇，混匀，加入抗坏血酸溶液，氢氧化钾溶液，皂化1h。将皂化液全部转入分液漏斗中，用约50 mL 乙醚分2~3次进行萃取。醚液通过无己硫酸钠过滤脱水。取10mL乙醚提取液，在40℃条件下氮气吹干。立即加入1mL乙醇，充分混合，溶解提取物。过0.22pm滤膜，进样。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250 mmx4.6mm， 5pm 流动相 甲醇+水=98+2 流速 1.0 mL/min 柱温 30℃ 检测波长 300nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 紫外分光光度计(标液校正) 溶剂过滤器 氮吹仪 电子天平 精度0.0001g 针式过滤器 0.22pm、有机系 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5pm 一次性无针头注射器 5mL/1mL 图1α-VE、y-VE、8-VE标样谱图 图2样品谱图 饮料中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定 苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐由于对大多数微生物有抑制作用，因而作为防腐剂广泛应用于食品、饮料、烟草、农药、化妆品等行业。食品中添加的山梨酸、苯甲酸若超标严重，在一定程度上会抑制骨骼生长，危害肾、肝脏的健康。 糖精钠的甜度是蔗糖的300~500倍，是一种应用较多的甜味剂，但其在人体内不分解，当食用较多的糖精钠时，会影响肠胃消化酶的正常分泌，降低小肠的吸收能力，使食欲减退。 参照标准： GB/T5009.28-2003 和GB/T5009.29-2003 样品溶液制备 称取5.00g~10.0g试样，用氨水(1：1)调PH约7。加水定容至适当体积，离心沉淀，上清液经0.45pm滤膜过滤。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250 mmx4.6 mm， 5pm 流动相 甲醇+乙酸铵溶液(0.02mol/L)=7+93 流速 1.0mL/min 柱温 室温 检测波长 230nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 PH计 溶剂过滤器 离心机 电子天平 精度0.0001g 针式过滤器 0.45pm， 水系 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5pm 一次性无针头注射器 5mL/1mL 图18.0pg/mL山梨酸、苯甲酸和糖精钠标样谱图 图2样品谱图 组分名称 保留时间(min) 苯甲酸 9.91 山梨酸 13.43 糖精钠 16.21 小麦粉中过氧化苯甲酰的测定 过氧化苯甲酰(BPO)为强氧化剂并且不稳定，因其可作为小麦粉的质量改良剂和增白剂而被国内外面粉加工业广泛使用。但是，有些生产厂家为了在短时间内明显增加面粉白度，提高面粉质量等级而加入过氧化苯甲酰，过量的过氧化苯甲酰会破坏小麦粉中多种维生素，苯甲酸随面粉制品进入人体后需经肝脏解毒，摄入过量苯甲酰会影响人体的肝脏生理功能，不利人体健康。目前我国已经禁止添加该物质。 参照标准： GB/T22325-2008 样品溶液制备 称取样品5g(准确至0.1mg)于50mL具塞比色管中，加入10.0mL甲醇，在涡旋混合器上混泪1min， 静止5min， 加5mL50%KI溶液，混匀1min，放置10min，加水至50mL，摇匀、静置后吸取上层清液经0.45pm滤膜过滤，取20pL进高效液相色谱仪。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6 mm， 5 pm 流动相 甲醇+乙酸铵溶液(0.02mol/L)=90+10 流速 1.0 mL/min 柱温 室温 检测波长 230nm.. 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 涡旋混合器 溶剂过滤器 一 电子天平 精度0.0001g 针式过滤器 0.45pm、有机系 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5pm 一次性无针头注射器 5mL/1mL 图1苯甲酸标样谱图(80pg/mL) 饮料中安赛蜜的测定 安塞蜜又称为乙酰磺胺酸钾、A一K糖、阿尔适尔芳钾。它是一种食品添加剂，能增加食品的甜味，并且没有营养，口感好，无热量，在人体内不代谢、不吸收，是目前世界上第四代合成甜味剂。但是国标GB2760-2007《食品添加剂使用卫生标准》中规定饮料中安赛蜜含量不得超过0.3 g/kg。 图1安赛蜜标样谱图 图2样品谱图 肉制品中苯甲酸、山梨酸的测定 我国目前常用食品防腐剂主要有苯甲酸及其钠盐、山梨酸及其钾盐为主。防腐剂可以抑制和杀灭微生物，但过量和超范围使用会破坏食品中维生素、加重人体肝脏负担并引起毒性反应。国标GB2760-2007《食品添加剂使用卫生标准》中规定肉制品食品中苯甲酸不得检出，山梨酸及其钾盐(以山梨酸计)不得超过0.075g/kg。在日常检测工作中仍可在火腿肠样品中检出苯甲酸和超标加入的山梨酸。 参照标准：SB/T 10389-2004 样品溶液制备 称取绞碎样品2.00g， 置于50mL烧杯中，加10mL水，于涡旋混合器混匀，超声提取后以4500r/min离心15min， 将上层清夜通过中性氧化铝柱，待试样液流至住表面时，用流动相(甲醇+0.02mol/L乙酸铵)洗脱， 收集50mL洗脱液，摇匀后经0.45pm滤膜过滤，取20pL进高效液相色谱仪。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250mmx4.6 mm， 5 um 流动相 甲醇+乙酸铵溶液(0.02mol/L)=5+95 流速 1.0mL/min 柱温 室温 检测波长 230nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 涡旋混合器 溶剂过滤器 离心机 电子天平 精度0.0001g 针式过滤器 0.45pm、有机系 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5pm 一次性无针头注射器 5mL/1mL 中性氧化铝层析柱 (100~200)目 图1山梨酸、苯甲酸标样谱图 图2样品谱图 水产品中孔雀石绿的测定 孔雀石绿(MG)为三苯甲烷类工业染料，在水产养殖上可以有效的预防与治疗各类水产动物的水霉病、鳃霉病和小虫病。并常用于鱼苗的消毒。但一些水产品贩运商为保持水产品新鲜度普遍用MG 消毒车厢和活鱼池；酒店为了延长鱼的存活时间也在鱼池中投放 MG 进行消毒。使用MG 消毒后的鱼即使死亡后颜色也较为鲜亮，消费者很难从外表进行辨认。 MG 在水生生物体中的主要代谢产物为隐色孔雀石绿(LMG)。MG具有毒性强、高残留和致畸、致癌、致突变等副作用。 LMG 由于不溶于水，其残留毒性比 MG 更强，保留时间更长。所以，目前世界上诸如美国、日本、加拿大和欧盟等许多国家已将 MG 列为水产养殖禁用药物，我国也于2002年5月将其列入"食品动物禁用的兽药及其化合物清单”。 参照标准： SB/T 10389-2004 样品溶液制备 提取：称取已捣碎鲜活水产品样品5g左右(精确至0.0001g)，于离心管中，加入混合内标液，加 入乙腈，超声提取后离心。上清液用乙腈定容至25mL。 净化：移取上述样品溶液5mL至已活化的中性氧化铝柱，用KD浓缩瓶接收流出液，45℃旋转蒸 发，乙腈定容至1mL， 超声振荡5min，加入1.0mL乙酸铵溶液，超声振荡1min，过0.22um滤膜，进样。 色谱条件 色谱柱 氰基柱，250mmx4.6mm， 5pm 流动相 乙乙+0.125mol/L乙酸铵( pH4.5)=47+53 流速 1.0mL/min 柱温 35℃ 检测波长 618nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵升升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 PH计 溶剂过滤器 匀浆机 旋转蒸发仪 离心机 电子天平 精度0.0001g 针式过滤器 0.22um、有机系 中性氧化铝柱 1g/3mL 一次性无针头注射器 5mL/1mL 氰基柱 250mmx4.6 mm， 5 pm 图15.0 p g/mL 孔雀石绿和无色孔雀石绿标准混合溶液色谱图 组分名称 保留时间(min ) LMG 11.05 MG 16.47 可乐中4-甲基咪唑的测定 近期，可乐再次受到广泛关注，因为有报道称在可乐饮料中发现了高含量的化学成分4-甲基咪唑。4-甲基咪唑是一种存在于焦糖剂中的化学物质。它是在生产焦糖色素时产生的。在实验中发现，4-甲基咪唑能导致动物长肿瘤，有可能给人体带来致癌风险。 参照标准：无 样品溶液制备 称取15mL可乐样品于250mL分液漏斗中，加入100g/L碳酸钠溶液15mL，加三氯甲烷-无水乙醇萃取液60mL，剧烈振摇5min，静置分层后将有机相转入另一分液漏斗中，水相再按同样方法萃取一次，合并有机相。用100g/L碳酸钠溶液洗涤提取液3次，每次30mL。然后将有机相通过无水硫酸钠，滤液转入旋转蒸发瓶中，50℃浓缩至近干，以水溶解残渣并定容至10mL，过0.45pm微孔滤 膜，待测。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6 mm， 5pm 流动相 甲醇+0.05mol/L磷酸二氢钾缓冲液(PH3.5，含0.1%庚烷磺酸钠)=8+92 流速 1.0mL/min 柱温 室温 检测波长 210nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 旋转蒸发仪 溶剂过滤器 PH计 电子天平 精度0.0001g 针式过滤器 0.45pm， 水系 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5pm 一次性无针头注射器 5mL/1mL 图140.0pg/mL标样谱图 图2某可乐添加4-甲基咪唑标样谱图 组分名称 保留时间(min) 4-甲基咪唑 22.31 淀粉中马来酸和富马酸的测定 台湾近日发现含顺丁烯二酸的“毒淀粉"，截至目前，全台粉圆、黑轮、板条、芋圆、地瓜圆等越来越多食品被查出违法添加顺丁烯二酸。顺丁烯二酸又称"马来酸”，它的同分异构体反丁烯二酸，又称"富马酸"。它们可能会同时存在于淀粉样品中，因此建立同时检测富马酸和马来酸的分析方法具有重要意义。 参照标准： NY-T1598-2008 样品溶液制备 称取2.5g粉粉样品(精确至0.0001g) 于50mL容量瓶中(淀粉制品碎粉碎机打碎后称取)，加入约30mL5%甲醇水溶液(体积分数)，涡旋5min，超声提取10min，冷却至室温，用5%甲醇水溶液定容，摇匀，取5mL于10mL离心管中，3000r/min离心15min，上清液过0.22pm微孔滤膜，待 测。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250 mmx4.6 mm， 5 pm 流动相 甲醇+水(磷酸调PH=2.8)=5+95，0.45pm滤膜过滤 流速 1.0mL/min 柱温 室温 检测波长 214nm 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 PH计 溶剂过滤器 离心机 电子天平 精度0.0001g 针式过滤器 0.22pm、有机系 C18色谱柱 250mmx4.6 mm， 5 pm 一次性无针头注射器 5mL/1mL 涡旋混合器 图1 0.5pg/mL标样谱图 图2某品牌淀粉添加富马酸和马来酸标样谱图 第三篇兽药残留 土霉素、四环素和金霉素的测定 土霉素、四环素和金霉素均属于四环素类抗生素，在畜禽生产中四环素类抗生素被广泛用作药物添加剂，用于防治肠道感染和促进生长，容易诱导耐药菌株和导致食品残留。四环素类兽药易残留于动物组织、鱼、蛋、牛奶和蜂蜜等生物样本中，需要对四环素类兽药进行残留检测。 参照标准： GB/T5009.116-2003 样品溶液制备 称取5g(±0.0001g)切碎的肉样(<5mm)， 置于50mL锥形烧瓶中，加入5%高氯酸25.0mL，于振荡器上振荡提取10min， 将样品溶液转移至50mL离心管中， 2000r/min离心3min， 取上清液经0.45pm滤膜过滤，进高效液相色谱进行分析。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6 mm， 5pm 流动相 乙腈+0.01mol/L磷酸二氢钠溶液=25+75 流速 1.0 mL/min 柱温 室温 检测波长 355nm 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 离心机 2000r/min 溶剂过滤器 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5 pm 电子天平 精度0.0001g 针式过滤器 0.45pm， 水系 振荡器 一次性无针头注射器 5mL/1mL 图1标样谱图 图2样品谱图 组分名称 保留时间(min) 土霉素 4.11 四环素 4.94 金霉素 9.39 己烯雌酚的测定 己烯雌酚小量可刺激垂体前叶促性腺激素。大剂量抑制垂体前叶促性腺激素和催乳素的分泌，有抵消雄激素的主要作用，并抑制催产素酶而增强催产素的作用。己烯雌酚添加到饲料里主要起到使被饲喂动物提高产崽率或催情作用。人食用含有己烯雌酚的动物内脏或肌肉后会造成体内激素失调。从而带来对人体建康的危害。 参照标准： GB/T5009.140-2003 样品溶液制备 称取样品5g(精确到0.1g)，绞碎(小于5mm)加10.00mL甲醇，充分搅拌，振荡20min， 于 3000r/min离心10min，将上清液移出，残渣中再加10.00mL甲醇， 混匀后振荡20min，于 3000r/min离心10min，合并上清液。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6 mm， 5 pm 流动相 甲醇+0.043mol/L磷酸二氢钠缓冲溶液=70+30(磷酸调PH=5) 流速 1.0mL/min 柱温 室温 检测波长 230nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 离心机 3000r/min 溶剂过滤器 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5 pm 电子天平 精度0.0001g 针式过滤器 0.45pm、有机系 振荡器 一次性无针头注射器 5mL/1mL 瘦肉精一莱克多巴胺的测定 莱克多巴胺正被作为一种新型瘦肉精被一些养猪场使用。其可通过食物进入人体，人体累计摄入超过一定值或食入莱克多巴胺高残留的内脏组织，易出现毒副反应，出现中毒症状。莱克多巴胺在我国及欧盟等世界大多数国家禁止使用。 图10.9pg/mL己烯雌酚标样谱图 图2样品(未检出)谱图 组分名称 保留时间(min) 己烯雌酚 8.39 参照标准：农业部958号公告-4-2007 样品溶液制备 提取：称取样品10g(精确到0.01g)，用高氯酸溶液(0.1mol/L)匀浆，超声20min取出置于80℃水浴中加热30min，取出冷却后离心。用氢氧化钠溶液调PH值。加入异丙醇+乙酸乙酯(40+60)，置于振荡器上振荡提取20min。将上层有机相转移至旋转蒸发瓶中，浓缩近干。用1mL磷酸二氢钠缓冲溶液(0.1mol/L， PH=6.0)充分溶解残留物，用微孔滤膜过滤定容。 净化：将提取液至弱阳离子交换柱上进行净化，净化液在氮吹仪上吹干。 测定液的准备：净化、吹干的试样残渣加入流动相复溶，液体浑浊时用0.45pm的滤膜过滤后进液相色谱测定。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6mm， 5pm 流动相 乙腈+5mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液=30+70 流速 0.5 mL/min 柱温 30℃ 检测波长 276nm 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴，--++- 离心机 溶剂过滤器 PH计 电子天平 精度0.0001g 氮吹仪 振荡器 针式过滤器 0.45pm、有机系 匀浆机 一次性无针头注射器 5mL/1mL 图12.5mg/L莱克多巴胺标样谱图 图2样品(未检出)谱图 组分名称 保留时间(min) 莱克多巴胺 7.23 盐酸克伦特罗是一种天然儿茶酚胺衍生合成的化合物，又称盐酸双氯醇氨、氨哮素、克喘素。因其对动物具有明显促进生长，增加瘦肉率、减少脂肪含量，改善生产性能等作用，曾被加在饲料中用于牲猪饲养。 参照标准： GB/T5009.192-2003 样品溶液制备 提取：称取样品10g(精确到0.01g)，用高氯酸氯液(0.1mol/L)匀浆，超声20min取出置于80℃水浴中加热30min，取出冷却后离心。用氢氧化钠溶液调PH值。加入异丙醇+乙酸乙酯(40+60)，置于振荡器上振荡提取20min。将上层有机相转移至旋转蒸发瓶中，浓缩近干。用1mL磷酸二氢钠缓冲溶液(0.1mol/L， PH=6.0)充分溶解残留物，用微孔滤膜过滤定容。 净化：将提取液至弱阳离子交换柱上进行净化，净化液在氮吹仪上吹干。 测定液的准备：净化、吹干的试样残渣加入流动相复溶，液体浑浊时用0.45pm的滤膜过滤后进液相色谱测定。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250 mmx4.6 mm， 5 pm 流动相 乙腈+5mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液=30+70 流速 0.8 mL/min 柱温 30℃ 检测波长 244nm 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 离心机 ...... 溶剂过滤器 PH计 电子天平 精度0.0001g 氮吹仪 ..... 振荡器 针式过滤器 0.45pm、有机系 匀浆机 一次性无针头注射器 5mL/1mL 图12.0mg/L克伦特罗标样谱图 图2样品(未检出)谱图 组分名称 保留时间(min) 克伦特罗 6.26 克伦特罗和莱克多巴胺属于β-激动剂，其高剂量添加在饲料中，可以选择性地作用于肾上腺素，导致动物体内的脂肪分解代谢增强，增加蛋白质的合成，显著提高洞体瘦肉率，它们曾被加在饲料中用于牲猪饲养。 参照标准： GB/T 5009.192-2003 样品溶液制备 提取：称取样品10g(精确到0.01g)，用高氯酸溶液(0.1mol/L)匀浆，超声20min取出置于80℃水浴中加热30min，取出冷却后离心。用氢氧化钠溶液调PH值。加入异丙醇+乙酸乙酯(40+60)，置于振荡器上振荡提取20min。将上层有机相转移至旋转蒸发瓶中，浓缩近干。用1mL磷酸二氢钠缓冲溶液(0.1mol/L， PH=6.0)充分溶解残留物，用微孔滤膜过滤定容。 净化：将提取液至弱阳离子交换柱上进行净化，净化液在氮吹仪上吹干。 测定液的准备：净化、吹干的试样残渣加入流动相复溶，液体浑浊时用0.45pm的滤膜过滤后进液相色谱测定。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6 mm， 5 pm 流动相 乙腈+5mmol/L磷酸二氢钾缓冲溶液=30+70 流速 0.5 mL/min 柱温 30℃ 检测波长 244nm、276nm 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 离心机 ... 溶剂过滤器 PH十 电子天平 精度0.0001g 氨吹仪 ........... 振荡器 针式过滤器 0.45pm、有机系 匀浆机 一次性无针头注射器 5mL/1mL 图1 2.5mg/L莱克多巴胺和克伦特罗混合标样谱图 分析应用 图2样品(未检出)谱图 组分名称 保留时间(min) 莱克多巴胺 7.26 克伦特罗 8.36 饲料中维生素A的测定 维生素A又称视黄醇，是脂溶性的醇类物质，主要存在于动物肝脏、血液和眼球的网膜中，又叫视黄醇。维生素A的主要生理功能是维持一切上皮组织的完整，维持正常的视觉。当维生素A缺乏会导致动物抗病能力下降。因此VA是饲料行业中重要的维生素类饲料添加剂。本实验参照GB/T17817-2010《饲料中维生素A的测定》，采用直接提取法，对4%蛋鸡产蛋期复合预混料进行测定。 图13.46 pg/mL标样谱图 图2饲料样品谱图 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5pm 校正) 组分名称 保留时间(min) 维生素A 15.10 饲料中维生素E的测定 维生素E具有广泛的生理功能，对于维护畜禽体内正常的生理功能有重要的意义。维生素E能改变动物繁殖能力，增加免疫功能，促进细胞内呼吸，还可以保持体内的不饱和脂肪酸，巯基化合物和巯基酶等免受氧化破坏，因而VE具有抗氧化作用。VE是饲料行业中重要的维生素类饲料添加剂。本实验参照GB/T17812-2008《饲料中维生素E的测定》，采用直接提取法，对4%蛋鸡产蛋期复合预混料进行测定。 图1 50.0pg/mL标样谱图 图2饲料样品谱图 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5pm 组分名称 保留时间(min) 维生素E 18.45 饲料中泛酸的测定 泛酸又名维生素B5，因广泛存在于自然界故被命名为泛酸。泛酸是由泛解酸和β-丙氨酸组成的一种化合物。泛酸主要生理功能作用是构成辅酶A和和基载体蛋白，并通过它们在代谢中发挥作用。制造抗体也是泛酸的作用之一，能帮助抵抗传染病，缓和多种抗生素副作用及毒性。动物缺乏泛酸生长不良，发生皮炎、肾脏损伤、贫血等。本实验参照GB/T18397-2001《复合预混合饲料中泛酸的测定》，对4%蛋鸡产蛋期复合预混料进行测定。 参照标准： GB/T18397-2001 样品溶液制备 称取饲料样品5g左右(精确至0.0001g) 于100mL棕色容量瓶中，加入约60mL左右的去离子水，10mL1% EDTA溶液，超声提取20min， 冷却至室温，用去离子水定容至刻度，充分摇匀，过滤待 测。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6 mm， 5 um 流动相 甲醇+磷酸盐缓冲溶液=1+9 流速 1.0 mL/min 柱温 室温 检测波长 200nm 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 针式过滤器 0.45pm，水系 溶剂过滤器 一次性无针头注射器 5mL/1mL 电子天平 精度0.0001g C18色谱柱 250mmx4.6mm， 5pm 图1 15.0pg/mL标样谱图 图2饲料样品谱图 组分名称 保留时间(min) 泛酸 5.91 饲料中烟酸和叶酸的测定 目前饲料中都添加有多种维生素，以保证动物健康生长。如果动物完全缺少一种或数种维生素，或者是摄入量不足，某些代谢过程就将受到损害，从而导致生长受阻或者疾病。烟酸又称尼克酸是参与体内酶系统的一种维生素，对机体的碳水化合物、脂肪和蛋白质代谢起主要作用，当肌体缺乏烟酸时则可引起新陈代谢的障碍；叶酸是一种广泛存在于绿色蔬菜中的B族维生素，缺乏叶酸会使得雏鸡生长不良，羽毛不正常，贫血和骨短粗症等。本实验参照GB/T17813-1999《复合预混料中烟酸、叶酸的测定》，对4%蛋鸡产蛋期复合预混料进行测定。 参照标准：GB/T17813-1999 样品溶液制备 称取饲料样品2g左右(精确至0.0001g) 于50mL棕色容量瓶中，加入5mL0.1mol/L碳酸钠溶液，浸湿样品，加入70mL的提取液，混匀，超声提取20min，冷却至室温，用提取液定容至刻度，充分摇 匀，过滤待测。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6mm， 5pm 流动相 甲醇+己烷磺酸钠+冰乙酸+三乙胺 流速 1.0mL/min 柱温 30℃ 检测波长 275nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵升升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 PH计 溶剂过滤器 一次性无针头注射器 5mL/1mL 电子天平 精度0.0001g 针式过滤器 0.45pm C18色谱柱 250 mmx4.6mm， 5pm 图110pg/mL烟酸、叶酸标样谱图 图2饲料样品谱图 组分名称 保留时间(min) 烟酸 3.63 叶酸 8.85 饲料中维生素B1的测定 目前饲料中都添加有多种维生素，以保证动物健康生长。如果动物完全缺少一种或数种维生素，或者是摄入量不足，某些代谢过程就将受到损害，从而导致生长受阻或者疾病。维生素B1又称硫胺素或抗神经炎素，由嘧啶环和噻唑环结合而成的一种B族维生素。为白色结晶或结晶性粉末。动物生长过程中缺乏维生素B1会造成生长迟缓，引起消化道疾病，心脏扩大及心肌脂肪变性等。本实验参照GB/T14700-2002《饲料中维生素B1的测定》，对4%蛋鸡产蛋期复合预混料进行测定。 参照标准： GB/T14700-2002 样品溶液制备 称取饲料样品2g左右(精确至0.0001g)于100mL棕色容量瓶中，加入约60mL左右的提取液，超声提取20min，冷却至室温，用提取液定容至刻度，充分摇匀，过滤待测。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250 mmx4.6 mm， 5 um 流动相 甲醇+庚烷磺酸钠+冰乙酸+三乙胺 流速 1.0 mL/min 柱温 30℃ 检测波长 246nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 针式过滤器 0.45pm、有机系 溶剂过滤器 一次性无针头注射器 5mL/1mL 电子天平 精度0.0001g PH计 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5 pm 图1 15.0pg/mL标样谱图 图2饲料样品谱图 饲料中维生素B2的测定 维生素B2又叫做核黄素，桔黄色，易被碱、光及金属元素破坏。核黄素是许多氧化还原酶的重要组成部分，参与能量和蛋白质代谢。动物缺乏核黄素会引起生长受阻，生产力下降，早产，胚胎死亡及胎儿畸形，因此维生素B2是动物饲料添加剂的重要组成部分。本实验参照GB/T14701-2002《饲料中维生素B2的测定》，对4%蛋鸡产蛋期复合预混料进行测定。 参照标准： GB/T14701-2002 样品溶液制备 称取饲料样品1g左右(精确至0.0001g) 于50mL棕色容量瓶中，加入约30mL左右的提取液，在80℃~100℃水浴煮沸提取30min， 冷却至室温，加入14mL甲醇，用提取液定容至刻度，充分摇匀，过滤待测。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6 mm， 5pm 流动相 甲醇+庚烷磺酸钠+冰乙酸+三乙胺 流速 1.0 mL/min 柱温 40℃ 检测波长 267nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 针式过滤器 0.45pm、有机系 溶剂过滤器 一次性无针头注射器 5mL/1mL 电子天平 精度0.0001g PH十 C18色谱柱 250mmx4.6 mm， 5pm 水浴锅 图1 20.0pg/mL标样谱图 图2饲料样品谱图 组分名称 保留时间(min)维生素B2 14.06 饲料中维生素B6的测定 维生素B6又称吡哆素。是一种含吡哆醇或吡哆醛或吡哆胺的B族维生素，遇光或碱易破坏，不耐高温。维生素B6参与多种代谢反应，尤其是和氨基酸代谢有密切关系。缺乏维生素B6会造成动物生长迟缓，矮小，蛋白质积聚减少，肝脏和心脏受到损伤，产蛋率和孵化率降低。本实验参照GB/T14702-2002《饲料中维生素B6的测定》，对4%蛋鸡产蛋期复合预混料进行测定。 参照标准： GB/T14702-2002 样品溶液制备 称取饲料样品2g左右(精确至0.0001g) 于100mL棕色容量瓶中，加入约60mL左右的提取液，超声提取20min， 冷却至室温，用提取液定容至刻度，充分摇匀，过滤待测。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250 mmx4.6 mm， 5pm 流动相 甲醇+庚烷磺酸钠+冰乙酸+三乙胺 流速 1.0mL/min 柱温 30℃ 检测波长 280nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 针式过滤器 0.45pm、有机系 溶剂过滤器 一次性无针头注射器 5mL/1mL 电子天平 精度0.0001g PH计 C18色谱柱 250 mmx4.6mm， 5pm 图1 5.0pg/mL标样谱图 图2饲料样品谱图 组分名称 保留时间(min) 维生素B6 7.07 饲料中维生素B12的测定 维生素B12又称钴胺素或氰钴素。是一种由含钴的卟啉类化合物组成的B族维生素。它是水溶性维生素的组成部分之一，是人体内和动物体内不能合成但又不可缺少的物质。本实验参照GB/T17819-1999《维生素预混料中维生素B12的测定》，对4%蛋鸡产蛋期复合预混料进行测定。 图1 50.0pg/mL标样谱图 图2饲料样品谱图 C18色谱柱 250mmx4.6 mm， 5pm 组分名称 保留时间(min) 维生素B12 4.74 饲料中维生素K3的测定 维生素K3别名甲萘醌，易溶于水和热乙醇。维生素K为肝脏合成原酶的必需物质，并参与凝血因子的合成，维持动物的血液凝固生理过程。缺乏维生素K可致凝血因子合成障碍，影响凝血过程而引起出血。维生素K也是骨骼素(BGP)合成过程中不可缺少的因子。本实验参GB/T18872-2002《饲料中维生素K3的测定》，对4%蛋鸡产蛋期复合预混料进行测定。 参照标准： GB/T18872-2002 样品溶液制备 称取饲料料品2.0g左右(精确至0.0001g) 于100mL具塞锥形瓶中，加入50mL三氯甲烷，旋转振荡器上振荡2min，加入6mL25%氢氧化铵， 振荡3min。再加10g硅藻土和无水硫酸钠混合物，于旋转振荡器上振荡30min，离心10min。取上清液10mL，在38℃下氮吹吹干，加入1mL甲醇，溶解残 渣，过滤待测。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6 mm， 5pm 流动相 甲醇+水=75+25 流速 1.0 mL/min 柱温 30℃ 检测波长 251nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵升升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 针式过滤器 0.22pm、有机系 溶剂过滤器 一次性无针头注射器 5mL/1mL 电子天平 精度0.0001g 氮吹仪 离心机 5000r/min 旋转振荡器 C18色谱柱 250 mm*4.6mm， 5pm 图150.0pg/mL标样谱图 图2饲料样品谱图 饲料中维生素D3的测定 维生素D3是脂溶性的，不溶于水，只能溶解在脂肪或脂肪溶剂中，在中性及碱性溶液中能耐高温和氧化。饲料中添加维生素D3可用于防止动物句偻病，调节钙与磷的代谢，特别是促进钙与磷的吸收，改进骨骼中钙与磷的转化率，从而促进动物骨骼的生长。本实验参照GB/T17818-2010《饲料中维生素D3的测定》，对4%蛋鸡产蛋期复合预混料进行测定。 图15.0pg/mL标样谱图 图2饲料样品谱图 饲料中氨基酸的测定 随着各种食品安全事件的曝光，饲料的质量问题也受到人们的广泛关注。氨基酸是评价饲料的一项重要指标。饲料中构成蛋白质的各种氨基酸数量的相对比例直接关系到动物生长和肉质水平。 参照标准： GB/T18246-2000 参照标准： GB/T18246-2000 样品溶液制备 酸水解法：称取饲料样品1g左右(精确至0.0001g) 于25mL安剖瓶中，加入10mL 6mol/L盐酸，摇 匀。将安剖瓶用喷灯熔封，然后置于110℃烘箱水解24h，供衍生使用。碱水解法：称取饲料样品1g左右(精确至0.0001g)于25mL安剖瓶中，加入4mol/L氢氧化锂溶液 3mL，摇匀。将安剖瓶用喷灯熔封，然后置于110℃烘箱水解24h，供衍生使用。衍生：准确移取适量氨基酸标准溶液及样品溶液加入三乙胺乙腈溶液，异硫氰酸苯酯乙腈溶液，混 匀，放置1h。然后加入正己烷振摇后放置10min。取下层溶液进行适当稀释后进样。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250mmx4.6 mm， 5pm 流动相 流动相A：80%乙腈水溶液 流动相B：0.1M醋酸钠水溶液 梯度洗脱时间表 时间(min) 流动相A 0 11 15 30 32 40 450 10 12 30 40 100 0 流动相B 100 90 88 70 60 0 100 流速 1.0 mL/min 柱温 40℃ 检测波长 254nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 烘箱 室温+5°C~300°C 溶剂过滤器 PH计 电子天平 精度0.0001g 酒精喷灯 C18色谱柱 250mmx4.6 mm， 5pm 冰箱 图1空白衍生谱图 图20.05mmol/mL标样谱图 组分名称 简称 保留时间(min) 组分名称 简称 保留时间(min) 天冬氨酸 Asp 4.57 酪氨酸 Tyr 21.57 谷氨酸 Glu 5.36 缬氨酸 Val 24.36 丝氨酸 Ser 12.66 蛋氨酸 Met 26.13 甘氨酸 Gly 13.95 半胱氨酸 cys 27.61 组氨酸 His 14.68 异亮氨酸 lle 30.83 精氨酸 Arg 15.78 亮氨酸 Leu 31.33 苏氨酸 Thr 16.42 苯丙氨酸 Phe 33.84 丙氨酸 Ala 17.01 赖氨酸 Lys 36.17 脯氨酸 Pro 17.48 涡旋混合器 针式过滤器 0.22pm、有机系 氮吹仪 一次性无针头注射器 5mL/1mL 中药薤白中腺苷的测定 中药薤白为葱属植物小根蒜的干燥鳞茎，具有理气宽胸，通阳散结之功效，中医临床广泛用于治疗胸痹，心痛彻背等症。目前研究表明薤白中含有大量的挥发油、腺苷、色氨酸及其衍生物和甾体皂苷等成分。腺苷具有舒张血管、降低血压、减慢心律、抑制血小板聚集、松弛血管平滑肌等生理活性；辽具有触发或介导缺血预适应、减轻再灌注损伤等心脏保护效应；它是薤白治疗胸痹等症的主要活性成分之一。 参照标准：2010版中国药典 样品溶液制备 取一定量试样进行粉碎混匀后，准确称取1g左右(精确至0.001g)试样，加入约20mL甲醇水溶液，超声提取30min， 取出后用甲醇水溶液定容至刻度，混匀，取一定量过滤膜备用。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250mmx4.6mm， 5 pm 流动相 磷酸二氢钾(0.01mol/L)+甲醇=15+85 流速 1.0 mL/min 柱温 室温 检测波长 254nm 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 C18色谱柱 250 mmx4.6 mm， 5pm 溶剂过滤器 -— 针式过滤器 0.22pm、有机系 电子天平 精度0.0001g 一次性无针头注射器 5mL/1mL 黄芪中金胺O的测定 2012年9月8日国家食品药品监督管理局通告称，一些生产企业非法用化工色素金胺0给中药饮片进行染色，以次充好进行销售，牟取暴力。金胺又称金胺0、碱性嫩黄、盐基淡黄、金丝雀黄、碱槐黄等，化学名称为盐酸氨基四甲基二氨基苯甲烷。其对皮肤黏膜有轻度刺激，可引起结膜炎、皮炎和上呼吸道刺激症状，长期过量食用，将对人体肾脏、肝脏造成损害甚至致癌，卫生部早于2008年将其列为非食用物质。因此，能够快速准确的检测出金胺的含量十分必要。 图1标样谱图 参照标准：2010版中国药典 样品溶液制备 准确称取黄芩粉末样品1g左右(精确至0.0001g)于25mL容量瓶中，加入70%乙醇水溶液超声30min， 定容， 过0.45pm滤膜，待测。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250 mmx4.6 mm， 5pm 流动相 磷酸二氢钾(0.025mol/L)+乙腈=60+40 流速 1.0 mL/min 柱温 室温 检测波长 432nm 进样量 20pL 图2样品谱图 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 C18色谱柱 250mmx4.6mm， 5pm 溶剂过滤器 针式过滤器 0.45pm、有机系 电子天平 精度0.0001g 一次性无针头注射器 5mL/1mL 组分名称 保留时间(min)腺苷 8.28 图1金胺0标样(50pg/mL)谱图 图2黄芩样品谱图 组分名称 保留时间(min) 金胺0 7.05 感冒药中葛根素的测定 感冒胶囊是由葛根、麻黄、桂枝、杏仁、甘草等组成的中药制剂，具有清热解毒和止咳平喘的作用。其中葛根的主要有效成分为异黄酮类化合物，如葛根素、大豆苷元、芒柄花素等，其中以葛根素含量最高。葛根素具有活血化瘀、改善微循环、扩张冠状动脉和脑血管、降低心肌耗氧量等作用。 参照标准：2010版中国药典 样品溶液制备 称取样品粉末约0.05g(精确至0.0001g)于100mL容量瓶中，加入30%乙醇溶液70ml，超声提取 30min。放冷，再用30%乙醇溶液定容至刻度，摇匀，0.22um滤膜过滤，进样。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6mm， 5 pm 流动相 甲醇+水=25+75 流速 1.0mL/min 柱温 30℃ 检测波长 250nm 进样量 20pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 C18色谱柱 250 mmx4.6mm， 5 pm 溶剂过滤器 针式过滤器 0.22pm、有机系 电子天平 精度0.0001g 一次性无针头注射器 5mL/1mL 人参皂甙的测定 0.38 人参是多年生草本植物，是众所周知的名贵药材。有强身健体、益寿延年的功效。经现代医学研究及化验分析表明，人参内含有一种叫人参皂甙的化学物质，它对调节人的中枢神经系统、强心、抗疲劳、调节物质代0.36- 谢等有明显功效，是人参的主要活性成分。现已明确知道的GS单体约有40余种，如Re、Rc、Rb、Rg等等。501.34米 参照标准： GB/T22996-2008学样品溶液制备 准确称取人参粉末样品1g左右(精确至0.0001g) 于50mL容量瓶中，加入甲醇超声45min，定容，过0.45pm滤膜，待测。0.300.28 色谱条件色谱柱 C18柱，250 mmx4.6mm， 5pm2 3 4 5 6 8 9 10 11 12 13 1415 16 17 18 19 20 2122时间(min) 流动相 流动相A：乙腈流动相B：水(0.45pm滤膜过滤)梯度洗脱时间表图1100pg/mL葛根素标样谱图 时间(min ) 0 5 10 20 25 30流动相A(%) 30 30 35 45 90 30流速 1.0 mL/min0.40- 柱温 45℃检测波长 203nm0.38 进样量 20 pL0.36仪器配置高压泵 P-101A双泵柱温箱 LC-5510柱温箱0.32 检测器 LC-5510检测器工作站 LC-5510液相色谱工作站0.30 在线脱气机(选配) DM-101自动进样器(选配) AS-4010.2810 12 时间(min)18 22 26 实验所需设备设备名称 规格 设备名称 规格图2样品谱图超声波水浴 C18色谱柱 250 mmx4.6mm， 5 pm溶剂过滤器 针式过滤器 0.45pm、有机系电子天平 精度0.0001g 一次性无针头注射器 5mL/1mL 组分名称 保留时间(min)葛根素 14.16 图1皂甙标样(500pg/mL)谱图 图2人参样品谱图 人参是多年生草本植物，是众所周知的名贵药材。有强身健体、益寿延年的功效。经现代医学研究及化验分析表明，人参内含有一种叫人参皂甙的化学物质，它对调节人的中枢神经系统、强心、抗疲劳、调节物质代谢等有明显功效，是人参的主要活性成分。现已明确知道的GS单体约有40余种，如Re、Rc、Rb、Rg等等。 参照标准： GB/T22996-2008 样品溶液制备 准确角取人参粉末样品1g左右(精确至0.0001g) 于50mL容量瓶中，加入甲醇超声45min，定容，过0.45pm滤膜，待测。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250 mmx4.6mm， 5pm 流动相 流动相A：乙腈 流动相B：水(0.45pm滤膜过滤) 梯度洗脱时间表 时间(min) 0 35 55 70 100 流动相A(%) 19 19 29 29 40 流速 1.0mL/min 柱温 35℃ 检测波长 203nm 进样量 20 pL 仪器配置 高压泵 P-101A双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 C18色谱主 250 mmx4.6mm，5pm 溶剂过滤器 针式过滤器 0.45pm、有机系 电子天平 精度0.0001g 一次性无针头注射器 5mL/1mL 图1皂皂标样(30pg/mL)谱图 图2人参样品谱图 胶囊中尼泊金酯的测定 尼泊金酯亦称对羟基苯甲酸酯，由于其广谱的抗菌活性，以及广泛的pH适应性，成为国内不少空心胶囊生产企业的选择。常用的尼泊金酯类共有四种，分别为甲酯、乙酯、丙酯、丁酯。各国对食品中尼泊金酯类的添加量都有严格的规定，通常成品中尼泊尼酯类总含量低于0.05%。我国GB1760中规定尼泊金酯单独或混合使用的总量应低于0.05%。 参照标准：2010版中国药典 样品溶液制备 称取空心胶囊约0.5g，置已加热水30ml的分液漏斗中，振摇使溶解，放冷，精密加乙醚50ml，小心振摇，静置分层，精密量取乙醚层25ml， 置蒸发皿中，蒸干乙醚，用流动相转移至5ml量瓶中并稀释至刻度，摇匀待测。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6mm， 5pm 流动相 甲醇+乙酸铵溶液(0.02mol/L)=60+40 流速 1.0 mL/min 柱温 室温 检测波长 254nm 进样量 20uL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 -二 C18色谱柱 250 mmx4.6mm， 5pm 溶剂过滤器 针式过滤器 0.45pm、有机系 电子天平 精度0.0001g 一次性无针头注射器 5mL/1mL 旋转蒸发仪 胶囊中色素的测定 色素在药剂辅料中称着色剂，是常用的药物辅料之一，可分为天然色素和人工合成色素两大类。合成色素是指有机染料类色素，其色泽鲜艳，着色力强，但其有一定毒性。目前我国允许使用的合成色素有苋菜红、胭脂红、柠檬黄、日落黄和靛蓝。 图125mg/L 尼伯金酯混标晋图 图2样品谱图 参照标准：GB/T5009.35-2003 样品溶液制备 称取胶囊样品0.8000g，用20mL水溶解，将1g聚酰胺粉倒入试样溶液中，用G3垂融漏斗抽滤，用水洗涤3~5次，用甲醇-甲酸溶液洗涤3~5次，再用水洗至中性，用乙醇~氨水~水混合溶液解吸3~5次，收 集解吸液，乙酸中和。蒸发至近干，加水溶解定容至5mL， 经0.45pm滤膜过滤，进样。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250 mmx4.6mm， 5pm 流动相 流动相A：甲醇 流动相B：0.02mol/L乙酸铵溶液(PH=4) 梯度洗脱时间表 时间(min) 0 5 12 18 流动相A(%) 20 35 98 98 流速 1.0 mL/min 柱温 室温 检测波长 254nm 进样量 10pL 仪器配置 高压泵 P-101A双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 PH计 溶剂过滤器 C18色谱柱 250mmx4.6 mm， 5pm 电子天平 精度0.0001g 针式过滤器 0.22um、有机系 旋转蒸发仪 一次性无针头注射器 5mL/1mL 图120.0pg/mL五种色素标样谱图 图2样品谱图 分析应用 组分名称 保留时间(min) 柠檬黄 3.70 苋菜红 4.81 胭脂红 8.14 日落黄 9.98 亮蓝 12.04 第六篇饮用水 饮用水中甲萘威的测定 甲萘威学名1-萘基-N-甲基氨基甲酸酯，又名西维因，一种氨基甲酸酯杀虫剂。西维因用途广泛可用于水果、蔬菜、棉花、烟草等多种经济作物，也可快速杀灭水中的浮游生物、藻类及部分细菌等。其在土壤中的残留期较长，因此可能对地表水及其它饮用水源造成污染。及时检测其水中含量，对饮水安全有重要的意义。 参照标准： GB/T5750.9-2006 样品溶液制备 样品经0.45pm滤膜过滤后，取100mL于分液漏斗中，加入10mL二氯甲烷萃取1min，注意及时放气，静置分层后，转移出有机相，再加入10mL二氯甲烷萃取分层，合并有机相，转入旋转蒸发仪中蒸发至近干，用甲醇定容至5mL，摇匀待测。如果水中的甲萘威浓度大于0.75mg/L时，可将水样过滤后直接进样测定。 色谱条件 色谱柱 C18柱， 250 mmx4.6 mm， 5pm 流动相 甲醇+水=30+70 流速 1.0mL/min 柱温 室温 检测波长 280nm 进样量 10 pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵或升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 旋转蒸发仪 溶剂过滤器 ......... 针式过滤器 0.45pm，水系 电子天平 精度0.0001g 一次性无针头注射器 5mL/1mL C18色谱柱 250mmx4.6 mm， 5pm 图1甲甲威标样(1.0pg/mL)谱图 图2自来水样品谱图 饮用水中莠去津的测定 莠去津，也叫阿特拉津，是一种三嗪类除草剂，主要用于甘蔗、高粱、玉米等。它对生物体内分泌系统产生干扰，引起一系列病症，甚至引发癌症。莠去津喷洒到土壤和作物表面后，会进入到土壤，渗漏到地下水或直接污染地表水。及时检测其水中含量，对饮水安全有重要的意义。 参照标准： GB/T5750.9-2006 样品溶液制备 样品经0.45pm滤膜过滤后， 取100mL于250mL分液漏斗中，加入5g氯化钠， 溶解后加入10mL二氯甲烷萃取1min，注意及时放气，静置分层后，转移出有机相，再加入10mL二氯甲烷萃取分层，合并有机相，有机相经过无水硫酸钠脱水后转入旋转蒸发仪中蒸发至近干，用甲醇定容至1mL，摇匀待测。测定有干扰时用硅镁净化柱对样品进行净化。 色谱条件 色谱柱 C18柱，250 mmx4.6 mm， 5pm 流动相 甲醇+水=50+50 流速 1.0mL/min 柱温 室温 检测波长 254nm 进样量 10pL 仪器配置 高压泵 P-101A单泵升升级为双泵 柱温箱 LC-5510柱温箱 检测器 LC-5510检测器 工作站 LC-5510液相色谱工作站 在线脱气机(选配) DM-101 自动进样器(选配) AS-401 实验所需设备 设备名称 规格 设备名称 规格 超声波水浴 旋转蒸发仪 溶剂过滤器 针式过滤器 0.45pm、水系 电子天平 精度0.0001g 一次性无针头注射器 5mL/1mL C18色谱柱 250 mmx4.6mm， 5 pm 硅镁净化柱(具旋塞) 200mmx10mm 图1莠去津标样(0.5pg/mL)谱图 图2自来水样品谱图 组分名称 保留时间(min) 莠去津 4.49 EWAI系列产品 GC-MS 3100/3200型气相色谱(四极)质谱联用仪 GC-MS 3110型车载气相色谱质谱联用仪 GC-4000A/4100系列气相色谱仪 EW-4400 型便携式光离子化气体检测仪 LC-5500/5510/5520型高效液相色谱仪 FSA-6110型快速光谱分析仪 IC-2800 型离子色谱仪 ICP-1000II型全自动台式等离子体光谱仪 ICP-2011型电感耦合等离子光谱仪 AA-7001/7003/7020系列原子吸收分光光度计 AA-7003M/7030A系列医用原子吸收分光光度计 AF-7500/7500B/7550型原子荧光光度计 XD-8010型能量色散×射线荧光光谱仪 XF-8100型波长色散×射线荧光光谱仪 CA-9000型矿井救灾气体化验车 煤矿专用分析仪器 工商、化工、环境检测车 LIMS 实验室信息管理系统 北京东西分析仪器有限公司 EAST & WEST ANALYTICAL INSTRUMENTS， INC. 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