水产及制品中真菌毒素检测方案

海能仪器：K9840测定挥发性盐基氮含量（凯氏定氮法） 1. 前言 挥发性盐基氮多见于水产品等肉类中，它是指腐败过程中，由于酶和细菌的作用使蛋白质分解而产生氨以及胺类等碱性含氮物质。此类物质具有挥发性，使用高氯酸溶液浸提，在碱性溶液中蒸出后，用硼酸吸收液吸收，再以标准滴定酸溶液滴定计算含量。 仪器 2.1 海能K9840半自动凯氏定氮仪 2.2 均质机 2.3 离心机 2.4 微量算式滴定管：精确到0.01ml 3. 试剂 3.1 高氯酸溶液（0.6mol/L）：取50ml高氯酸加水定容至1000ml 3.2 氢氧化钠溶液（30g/L）：称取30g氢氧化钠加水溶解后，放冷，并稀释到1000ml 3.3 盐酸标准溶液（0.01mol/L）：吸取浓盐酸0.85ml，定容至1000ml，摇匀。并按GB/T 5009.12003附录B的方法进行标定。 3.4 硼酸吸收液（30g/L）：称取硼酸30g，溶于1000ml水中。按10:1比例加入混合指示剂 3.5 硅油消泡剂 3.6 酚酞指示剂 3.7 混合指示剂：将一份2g/L甲基红乙醇溶液与一份1g/L次甲基蓝乙醇溶液临用时混合 4. 实验步骤 4.1 样品处理 鱼，去鳞，去皮，沿背脊取肌肉；虾，去头，去壳，取可食肌肉部分；蟹，甲鱼等（其他水产品）取可食部分；将样品切碎备用。 4.2 样品制备 称取上述处理好的试样10g（精确到0.01g）于均质杯中，再加入90ml高氯酸溶液，均质2min，用滤纸过滤或离心分离。准确移取5.0ml滤液于消化管中，分别加入1-2滴酚酞指示剂，1-2滴硅油防泡剂。并用5.0ml高氯酸溶液做空白试验。 4.3 蒸馏 消化管就位。仪器参数设置：氢氧化钠溶液5ml，稀释水10ml，硼酸20ml，蒸馏5min，淋洗液10ml。 4.4 滴定 锥形瓶中吸收液用标准盐酸或硫酸溶液（0.01mol/L）滴定至溶液显蓝紫色为终点。 4.5 计算 其中： X-----样品中挥发性盐基氮的含量，单位为毫克每百克（mg/100g）； V-----样品滤液消耗的标准滴定酸的体积，单位为毫升（ml）； V0-----空白样品消耗的标准滴定酸的体积，单位为毫升（ml）； C-----盐酸标准溶液的摩尔浓度，单位为摩尔每升（mol/L）； 14-----与1.00ml盐酸标准滴定溶液（1.00mol/L）相当的氮的质量，单位为毫克（mg）； m------取样质量，单位为克（g）。 计算结果保留3位有效数字。 - 1 - - 1 -