左卡尼汀及其杂质中分离检测方案(液相色谱柱)

Sep. 23， 2015LC Application Lab， Shiseido ChinaNo.31， BDA International Business Park，2 Jing Yuan Street， BeijingEconomic Technological Development Zone，Beijing China 100176Phone 010-6785-6801，FAX 010-6785-6882 左卡尼汀及其杂质分离报告 左卡尼汀和其2个中间体杂质均为带正电荷化合物，因此我们首先选择使用 CAPCELL PAK SCX 色谱柱对其进行保留，并使用PDA检测器检测： 图1 CAPCELL PAK SCX 柱 PDA分析图谱 HPLC Conditions ： 色谱柱： CAPCELL PAK SCX S5；4.6mm i.d.x250mm 流动相： 50mmol/L磷酸二氢铵(磷酸调 pH2.5) 流1000 uL / min 温 检 35℃ PDA 205nm 进样量： 10 uL 样 占： 左卡尼汀 2mg/mL， 两个中间体杂质分别为 0.02mg/mL 如图1所示，使用 CAPCELL PAK SCX 柱在 50mmol/L 磷酸二氢铵流动相下分析，左卡尼汀保留时间约为 13min，但2个中间体杂质未检出。 OH .CN 杂质1 杂质2 由左卡尼汀杂质结构式可知，两杂质紫外吸收非常弱，因此我们使用质谱对左卡尼汀及其两杂质进行检测，并使用 CAPCELL PAK CR 1：4色谱柱对其进行了保留和分离： Time， min Time， min 图22CAPCELL PAK CR 柱LC-MS分析图谱 HPLC Conditions ： 色谱柱： CAPCELL PAK CR 1：4 S5；2.1mm i.d.×150mm 流动相： 10mmol/L甲酸铵(甲酸调pH3.0)/乙腈=30/70 流300 pL/min 温 检 35℃ ESI Positive(SCIEX QTRAP 5500) 进样量： 5uL 样 占： 左卡尼汀 5ppb，两杂质分别为 0.05ppb 如图2所示，使用 CAPCELL PAK CR 1：4 柱进行 LC-MS分析，左卡尼汀、杂质1、杂质2间得到了较好分离结果。 在进行 LC-MS分析时，由于带正电荷化合物的静电吸引作用，我们发现左卡尼丁及杂质2均有一定程度的残留。因此建议客户在分析前对进样浓度进行考察，杂质浓度建议设置为定量限浓度，左卡尼汀浓度设置为杂质浓度100倍，以避免残留的发生。 ( 张亚丽杨茜郭彦丽 )