其他食品中环境污染物检测方案

(上接第4页) PITTCONCONFERENCE & EXPOORLANDO·MARCH 11-152012Sigma-Aldrich分析技术讲座 Reporter 第30.1卷 食品及饮料中包装污染物的快速检验法RICH ( Reporter ) 第30.1卷 ( 欢迎登录以下网址： sigma-aldrich.com/thereporter ) 目录 医药及生物分析 利用HPLC-MS-MS技术对L-及 D-乳酸对映体进行 高灵敏度测定....10 利用MSTFA 及MSTFA-d。衍生物与 GC-MS分析技术对化合物进行检测及鉴定的改良良方法.. .12 食品及饮料分析 采用SPME-GC-MS方法测定拉面调味包中的邻苯二甲酸酯.3.... .3饮用水中双酚A的 测定方法. .8 环境分析 利用双层LpDNPH玻璃采样管 进行醛酮类化合物采样及利用 Ascentis Express C18色谱柱进行HPLC分析的方法... .14 利用带有Thermogreen LB-2隔垫的 Supel-Inert薄膜气体采样袋，代替 Tedlar采样袋， 进行VOC采样.... .16 色谱纯化 LPLC纯化介质： 为您的独特挑战量身订造的 解决方案.... .18 .研究与技术 用于GC衍生化的 .新型硅烷化试剂 .20 增强连续进样色谱的 分析性能―一熔融核 (Fused-Core) 颗粒色谱柱. .22 IGMA Reporter每年发行5期，发行机构为SupelcoMarketing，地址：595 North Harrison Road，Bellefonte， PA 16823-0048。 新的一年，新的开始 Daniel Vitkuske DR 市场部经理样品制备 正值新年来临，让我们一起回顾过去，展望未来，看看我们还有哪些地方需要改进。从本期《Supelco Reporter》快讯开始，我们将采用新的版面设计，从重点介绍色谱技术(例如HPLC、GC)及样品分离技术改为重点介绍以市场为导向的应用解决方方。 许多客户或许并不知道，我们公司可提供从样品采集用品、样品制备用品、分析标准品、分析色谱柱到溶剂和衍生化试剂的全套分析产品。今后我们计划发表一系列文章，以展示上述分析产品在具体市场领域中的应用。以下列出了我们来年将聚焦的四大主要市场，同时还开辟了一个新的技术版块，以进一步探讨各类市场领域的创新技术话题。 医药及生物分析一一-分析医药及生物基质中的小分子 食品及饮料分析——制备样品，并分析食物及饮料的安全性、营养物质及组成。 环境分析――采集样品，并分析空气、水体及土壤样品中的环境污染物。 研究与技术-—―关于广泛市场领域中创新型技术及方法的话题。 新的《Reporter》版面围绕具体市场应用进行了设计，希望会对您的工作有所助益。如有其他内容需要我们在未来探讨，还请不吝提出意见和建议。您也可向我们投稿，我们将在未来的快讯中择优刊登。每一篇文章均列出了作者或主要通讯人的电子邮件地址，若有任何疑问、意见或建议，请向我们发送电子邮件。 顺祝商祺 Daniel Vitkuske市场部经理样品制备daniel.vitkuske@sial.com 采用SPME-GC-MS方法测定拉面调味包中的邻苯二甲酸酯 前言 2011年6月，香港食品安全监管机构发现，许多进口主要食品及饮料均被邻苯二甲酸酯污染(1)，其中涉及了数个品牌的拉面。具体而言，发现在这些产品的以油为底料的调味包中存在着邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)。当前在中国所使用的分析食品中邻苯二甲酸酯的方法需要在GC-MS分析之前先进行凝胶渗透层析(GPC)，以去除其中所含油脂(2)。GPC净化法是一种非常有效的技术，但也非常耗时。 本文将评估固相微萃取法(SPME)是否适用于从拉面调味包中的油脂中萃取出邻苯二甲酸酯，以省去进行GPC净化的步骤。本文旨在证实该方法是否为一种简单且相对快捷的方法。我们制备了含于玉米油中的校正标准品。我们分别制备了加标及不加标的鸡肉味及牛肉味调味包样品。我们利用SPME萃取头高温顶空萃取所有标准品及样品，随后使其直接解吸附至GC-MS系统中。还计算出所有基质的回收率。 实验 标准品制备：制备含16种邻苯二甲酸酯的己烷溶液作为校正储备溶液，并制备氛化类似物的己烷溶液作为内标储备溶液。在定量时，尽可能使用各邻苯二甲酸酯的直接类似物作为内标物。否则，则采用出峰先于分析物的最相近的类似物来做定量。按照以下方法，制备了浓度为100至2000 ug/Kg的七个校正标准品： T.上取适量校正储备溶液及内标储备溶液添加至15 ml小玻璃瓶中。 2.蒸发去除溶剂己烷。 3.7准确称量1g玉米油添加至各小玻璃瓶中。 4.彳各小玻璃瓶加盖密封并旋转混合2分钟。 使用玉米油以使标准品与待提取/分析的样品的基质相同。 GC色谱柱：选用低流失、最高使用温度较高的SLBTM-5ms毛细管气相色谱柱。为了进行快速分析，采用20 m x0.18 mmI.D.的色谱柱。 提取温度：参考先前文献，选用 50/30 um 二乙烯基苯/Carboxen/聚二甲基硅氧烷(DVB/CAR/PDMS)纤维作为高温顶空操作萃取头(3)。因此，所选择的萃取温度为90℃(在油溶液的顶空测得)。由于调味油样品会在90℃以上的温度下燃烧，因此不在更高的温度下测量。 萃取头的选择：根据参考文献，发现有两种萃取头适用于本用途：一种是DVB/CAR/PDMS萃取头，另一种是100 um 聚二甲基硅氧烷(PDMS)萃取头(3，4)。对这两种萃取头进行比较实验，方法是使用该两种萃取头分别萃取浓度为100 ug/Kg 的各种邻苯二甲酸酯玉米油样品，并比较所得的绝对响应值。在图1中列出了其中一些分析物的数据。对于分子量较小的邻苯二甲酸酯， DVB/CAR/PDMS萃取头可产生较高的响应值，而对于分子量较大的邻苯二甲酸酯， PDMS萃取头的响应值更高，包括几种低响应值的分析物。由于分子量较小的邻苯二甲酸酯在两种萃取头中均可产生较大的响应值，因此选用PDMS萃取头以优化分子量较大分析物的响应值。 萃取时间：采用PDMS萃取头，进行萃取时间选择实验，发现30分钟为最佳萃取时间。发现多种邻苯二甲酸酯的响应值均会在30分钟后下降。图2中显示了其中几种分析物的响应值与萃取时间的条形图。 (下接第4页) 图1.SPME萃取头选择研究 图2.SPME萃取时间研究 邻苯二甲酸二乙酯 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯■邻苯二甲酸二辛脂 线性校正：所有校正标准品均首先利用SPME进行萃取，随后进行GC-MS分析。图3显示了其中一些分析物的校正曲线，图4显示了500 ug/Kg标准品的色谱分析结果。利用内标物校正来补偿响应波动，发现数据总体具有较佳线性。将使用了校正后响应值的一阶拟合用于随后的定量分析。 样品分析：使用与制备校正标准品的类似方法制备鸡肉味及牛肉味调味油样品。由于样品量较少，因此每种类型均只采用一份未加标样品进行分析。加标样品的制备方法为：取500ng各邻苯二甲酸酯添加至1g调味油中。制备了一式三份加标鸡肉味及牛肉味调味油样品。加标样品的色谱图示例已显示在图5(鸡肉味)及图6(牛肉味)中。 两种方法的时间比较 表1中列出了已公开方法与SPME法所用步骤的比较。已公开方法的总样品制备时间约为每种样品150分钟。GPC净化及随后的浓缩步骤占用了大部分时间。在全部时间中，有105分钟需要手工操作，有一部分原因是因为在GPC净化之后，需要进行多个转移步骤及浓缩步骤(从约20ml浓缩至2.0ml)。 相比之下， SPME法42分钟的总制备时间就短得多，且仅有12分钟需要手工操作。除了较短的样品制备时间之外，SPME法也不需要进行溶剂萃取以及样品转移步骤。在SPME法中可使用兼容SPME功能的自动进样器，它能够自动完成加热顶空萃取及样品注射步骤。虽然也可手动进行SPME法，但自动化装备能够进一步减少手工操作时间，提升生产率，并提高方法的重现性。 结果与讨论(有关分析物代号，请参见图4) 使用内标物校正响应因子，计算出了所有加标及未加标样品的邻苯二甲酸酯含量(以ug/kg表示)。还计算出了%回收率、平均%回收率及%RSD值。计算结果已概括在表2(鸡肉味)及表3(牛肉味)中。在未加标样品中发现存在数种邻苯二甲酸酯。然而，其含量低于中国政府所规定的限值，因此不能称其“食品掺假或或用食品包装材料”(5)。存在的邻苯二甲酸酯极有可能是由塑料包装引起的。 SIGMA· 表1方法比较 已公开方法(2) ( 1 . 取 0.5g样品添加至1 5m l的小玻璃瓶中 ) ( 2. 加乙酸乙酯：己烷(1：1 )稀 释至10 m l ) 旋涡混合，随后过滤并收集在另一个容器中 ( 进行GPC凝胶净化 ， 并收 集 在 第三 个容 器 中 ) 5. 浓缩至2.0mL 6. 转移至第四个容器中(自动采样玻璃瓶)并添加内标物 7. 进行GC-MS分析 SPME法 ( 1 . 向1 5 m L 小玻璃瓶中添加内标物 ) 2.蒸发去除己烷 3.添加1g样品，随后旋涡混合 4.加热顶空萃取(顶空温度为90℃) 5.进行GC-MS分析 图4.邻苯二甲酸酯标准品(均在500ug/Kg下进行分析) 样品/基质： 将分析物及内标物添加至15 ml小玻璃瓶中，混合，蒸发去除己烷，添加1g玉米油，加热至顶空温度达90℃ SPME纤维： 100 pm PDMS纤维(57300-U)萃取： 使顶空处于90℃下30分钟(顶空温度)。 解吸附过程： 在260℃下进行4分钟 BEEF 管柱： SLB-5ms， 20 mx0.18 mm l.D.， 0.18 um (28564-U) 烘箱： 60°C保持1分钟，然后以10°C/分钟的速度升温至330°C，保持10分钟) MSD界面： 330℃ 扫描范围： SIM 载气： 氦气，0.6 mL/min，恒速 衬管： 内径0.75mm，固相微萃取/直型(2637501) I.邻苯二甲酸二甲酯(DMP) 7邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯(DEEP)8 CHRI邻苯二甲酸二戊酯(DPP) 邻苯二甲酸二环己酯(DCHP) 邻苯二甲酸二乙酯(DEP) 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP) 邻苯二甲酸二异丁酯(DIBP) 9.邻苯二甲酸二己酯(DHP) 邻苯二甲酸二苯酯 邻苯二甲酸二丁酯(DBP) 邻苯二甲酸丁基苄基酯(BBP) 邻苯二甲酸二辛酯(DNOP) 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯(DMEP) 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯(DBEP) 16.邻苯二甲酸二壬酯(DNP) 图5.加标鸡肉味调味油 样品/基质：将分析物以及内标物添加至15 ml小玻璃瓶中，混合，蒸发去除己烷，添加1g取自拉面鸡肉味调味包的玉米油，加热至顶空温度达90℃ 其他条件及波峰ID与图4相同。 图6.加标牛肉味调味油 样品/基质：将分析物以及内标物添加至15 ml小玻璃瓶中，混合，蒸发去除己烷，添加1g取自拉面牛肉味调味包的油，加热至顶空温度达90C其他条件及波峰ID与图4相同。 sigma-aldrich.com/spme 表2回收率及重现性：鸡肉味调味油(浓度为500 ug/Kg的加标样品) 未加标 三种加标 样品 样品 浓度 平均值 分析物 (ug/Kg) 回收率 %RSD 邻苯二甲酸二甲酯 0 102% 1 邻苯二甲酸二乙酯 0 96% 1 邻苯二甲酸二异丁酯 253 98% 2 邻苯二甲酸二丁酯 328 95% 4 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 0 62% 5 邻苯二甲酸二 0 74% 2 (4-甲基-2-戊基)酯异构体1 邻苯二甲酸二 0 72% 1 (4-甲基-2-戊基)酯异构体2 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 0 64% 4 邻苯二甲酸二戊酯 0 105% 3 邻苯二甲酸二己酯 0 94% 2 邻苯二甲酸丁基苯基酯 63 71% 4 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 0 128% 6 邻苯二甲酸二环己酯 0 91% 5 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 986 79% 26 邻苯二甲酸二苯酯 0 103% 10 邻苯二甲酸二辛脂 0 91% 12 邻苯二甲酸二壬基酯 0 101% 20 表3回收率及再现性：牛肉味调味油(浓度为500 ug/Kg的加标样品) ug/Kg) 未加标 三种加标 样品 样品 浓度 平均值 分析物 (ug/Kg) 回收率 %RSD 邻苯二甲酸二甲酯 0 101% 1 邻苯二甲酸二乙酯 0 96% 1 邻苯二甲酸二异丁酯 103 111% 1 邻苯二甲酸二丁酯 24 103% 3 邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 0 51% 31 邻苯二甲酸二 0 109% 5 (4-甲基-2-戊基)酯异构体1 邻苯二甲酸二 0 107% 3 (4-甲基-2-戊基)酯异构体2 邻苯二甲酸二(2-乙氧基)乙酯 0 87% 18 邻苯二甲酸二戊酯 0 106% 3 邻苯二甲酸二己酯 0 112% 8 邻苯二甲酸丁基苯基酯 67 70% 10 邻苯二甲酸二(2-丁氧基)乙酯 183 n/c* n/c* 邻苯二甲酸二环己酯 0 122% 15 邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 367 79% 85 邻苯二甲酸二苯酯 0 96% 28 邻苯二甲酸二辛脂 0 n/c* 邻苯二甲酸二壬基酯 n/c* *由于受到基质干扰，因而无法计算 SGNY 结论 可利用高温顶空SPME法萃取出油状食品基质(例如拉面调味油)中所含的邻苯二甲酸酯。已发展出一种高灵敏度、高重现性的定量多种邻苯二甲酸酯的通用方法。由于要处理的是拉面调味油这种特殊物质，因此有必要根据处理的实际基质对这一方法进行优化。例如可调整牛肉味调味油的提取条件，以减少基质干扰及提高分子量较大邻苯二甲酸酯的提取率。对于牛肉味调味油这样的非均相样品，可采用一定的技术使其更好地混合，从而使得进行分析的试样之间更一致。 使用内标物可减少某些类型的油性基质中可能存在的基质干扰。例如MS/MS法之类的特异性更高的检测法也可减少基质干扰。 ( 参考文献 ) ( 1. Hu a ng， Shelley.DOH op ens pro b e a f t e r K H foo d sc a re.Ta ip e i Ti m es ， Jun e1 5 ， 201 1 ， p g . 2 . ) ( 2 . Deter m i n ati o n o f p h tha l ate e sters in f o o d s . C hi ne s e Official M e thod G B 2191 1 . ) ( 3 . Rios，J.J . ；Morale s ， A . ； Marque s- Ruiz， G. H ea d sp a c e solid-p h a se mi c ro - ext ra ction of oi l m a tr ic e s he a te d at h i gh t em p e rat u re a nd phthalate esters d e t e rm i na t ion by gas ch r omatogra ph y mu ltis ta g e mass spectrometry. Ta l anta 20 1 0，80 ， 2076- 2 082. ) ( 4 . Hol a dova， K.；Prokupk o va， G.；Hajslová，J ； Pous t ka，J. He ads pa c e solid- p hase mi c roe xt ractio n of ph th ali c aci d es t er s fr o m v e geta bl e oil em p l o yingso l vent based m a trix m o di f ication Ana l yti c a Chimica Acta 2007，24- 3 3. ) ( 5 . E x p e r t Commit t ee e ndor ses loc a l action l e vel f or p l asticizer D E HP in fo o d.Dep a rtme n t of He alth Gover n m e nt of Hong Ko ng website. www.gov.h k ( Ju ne 3，201 1 ) . ) +DRICH 特色产品 品名 目录编号SPME萃取头，3支/盒100 um PDMS熔融石英萃取头，24号针规，用于手动进样 57300-U和橡胶隔垫50/30 um DVB/CAR/PDMS StableFlexM 57328-U24号针规，用于手动进样 SLB-5ms毛细管GC色谱柱 20 mx0.18 mml.D.， 0.18 um 28564-U 您知道吗。.. 您可向Sigma-Aldrich订购用于校准色谱系统的定制化学混标。只需拨打中国区免费热线电话800-819-3336(固话)400-620-3333(手机)或发送电子邮件至 orderCN@sial.com 联系客户服务部即可。 相关产品 邻苯二甲酸酯标准品 目录编号 250mg邻苯二甲酸丁基苯基酯 36927 1 g PESTANAL邻苯二甲酸二丁基酯 57301 36736 250 mg PESTANAL邻苯二甲酸二环己酯 3 36908 5 mL PESTANAL邻苯二甲酸二乙基酯 57330-U 53008 1 g PESTANAL邻苯二甲酸二甲基酯 57347-U 36738 250 mg PESTANAL邻苯二甲酸二辛基酯 31301 1000 mg邻苯二甲酸二戊酯 442867 1 g PESTANAL邻苯二甲酸二苯基酯 28576-U 36617 1g PESTANAL邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯 28471-U 36735 250 mg PESTANAL邻苯二甲酸二(2-甲氧基)乙酯 28473-U 36934 化邻苯二甲酸酯类似物 10 mg & 25 mg 邻苯二甲酸二丁基酯-3，4，5，6-d4 二M 28331-U 34169 10 mg & 25 mg 邻苯 二甲酸二环己酯-3，4，5，6-d， 28333-U 34186 10 mg & 25 mg 邻苯二甲酸二乙基酯-3，4，5，6-d， 28336-U 34185 10mg & 25 mg 邻苯二甲酸二己基酯-3，4，5，6-d4 29446-U 34167 25 mg 邻苯二甲酸二异丁酯-3，4，5，6-da 29452-U 34204 10 mg & 25 mg邻苯二甲酸二苯基酯-3，4，5，6-d4 34194 用于Agilent (5890，6890，7890)及Varian (CP-1177进样器) 2637505 用于PerkinElmer(AutoSystemTM) 2631205 用于Shimadzu° (17A [带SPL-17进样器]) 2633905 用于Thermo (ThermoQuest 8000及TRACE) 2876605-U 用于Varian° (1078及1079进样器) 2637805 用于Varian° (1078及1079进样器) Analytical 充分提升您的GC性能! 特别限时优惠 通过定期执行预防性维护，让您的GC分析工作始终保持最高效率。我们的《M axin ize Perfoim ance!》气相色谱配件及气体净化/管理手册 (T407103 JWE)是所有GC实验室的必备之选!该手册涵盖了所有常用配件，例如隔垫、衬管、密封垫圈、溶剂、注射器、色谱进样瓶、气体净化管等。 色谱柱全线产品 促销7.5-8折优惠! 有效期至2012年11月30日 请发送电子邮件 (tech servCN@ sialcom)索取手册，或登录sigm a-aldrich.com /gc 下载 请访问 http：//www.sigm aaldrich.com /ch ina- mainland/prom otions supelo-ns 2012. htm l了解详情。 Craig Aurandcraig.aurand@sial.com 前言 近年来，食品及饮料中的双酚A(BPA) 问题已引起了媒体的广泛关注。具体而言，这一问题主要与两类容器有关： 由聚碳酸酯塑料制成的可多次使用的刚性容器；通常是用作水瓶、奶瓶、塑料杯、酸瓶及储存容器。 内壁涂布环氧树脂涂料的金属罐头；涂布这些涂料是为了避免食物或饮料与金属直接接触。 BPA是一种在制造聚碳酸酯塑料及环氧树脂涂料时都会用到的化学物质。研究表明，会有少量的BPA混入这类容器所含的食物及饮料中。此外，当容器暴露于高温下(例如奶瓶加热)以及金属罐头装有加热的食物或饮料时，会有更多BPA从容器进入内容物(1-3)。 实验 本文主要论述从饮用水中萃取BPA及对其进行分析的过程。在萃取前，以200 ng/mL的浓度将BPA添加至样品中。选择固相萃取技术(SPE)处理样品，以证实该技术能否进行萃取及浓缩。使用内含SupelcleanM ENVITM-18 SPE材料及PTFE筛板的玻璃小柱。这一玻璃小柱减少了引入邻苯二甲酸酯之类可能会从其他材质的小柱(例如含聚乙烯筛板的聚丙烯小柱)中溶出的化合物的可能性。 一H图2.1 ug/mL的双酚A标准品 管柱： Ascentis Express C18， 10 cmx 2.1 mm I.D.， 2.7 um (53823-U) 流动相： 水：乙腈(60：40) 流速： 0.4mL/min 管柱温度： 压力： 3268 psi (225 bar)35℃ 检测器： UV (230 nm)； FL (Ex 225 nm， Em 310 nm) 注射： 1TuL 样品： 1ug/mL双酚A乙腈溶液 图3.添加双酚A的饮用水 样品/基质： 添加双酚A至饮用水中，使其浓度为0.2 pg/mLSPE小柱： Supelclean ENVI-18， 500 mg，6mL玻璃管，PTFE筛板(54331-U)活化： 1 mL 1%甲酸乙腈溶液，1 mL DI水添加的样品： 5ml加标水样品洗脱： 2mL1%甲酸乙腈溶液 洗脱后处理： 蒸发，随后添加乙腈至0.5 ml 其他条件(除样品外)及波峰ID与图2相同。 BPA的结构式如图1所示。GC技术对该分析物的灵敏度可能更高，但GC需要使BPA在分析前经历衍生化。这不仅会增加样本处理过程的步骤，而且会在衍生化步骤中产生误差。因此，为了使干扰降到最低，本研究选用HPLC作为分析技术。选用Ascentis° Express C18色谱柱进行快速HPLC分析。在本研究所用的系统中串联安装两种检测器：紫外检测器(UV)及荧光检测器(FL)。利用几个标准物校正该系统，并产生每种检测器对BPA的响应系数。这样就可计算出加标样品的回收率。图2显示了1 ug/mL校正标准品的色谱图。图3显示了加标样品的色谱图。该图中还完整阐述了制备样品的步骤。 结果与讨论 参考文献 利用FL检测器可获得更佳的信噪比。还可观察到FL色谱图中的滞留时间稍长一点，且峰形更宽。这是由于样品经过UV检测室以及连接两种检测器的管路，额外增加了系统体积而引起的。若去除UV组件并缩短连接管柱与FL检测器的管路，将消除这些现象。 ( 美 国 食 品药品监督 管 理局 ( U SF D A )网站(w w w.fda.gov)， 登 录 时 间： 2 0 1 2 年1月 1 0日。 ) ( 2 欧洲食品安全 监 督 管 理局 (EF S A ) 网站( w ww . efsa . e u ro pa . eu) ， 登 录时 间 ： 2 0 1 2 年1月 1 0 日。 ) ( 3 "Sur v e y o f B i sphe no l A i n B ot t l e d W ate r P ro du c t s " Healt h Canada， B ure a u o f C h e mical S afety， Fo o d Director a t e ， Health Products an d Food Branch， J uly 2009. ) 品名 目录编号 Supelclean ENVI-18固相萃取小柱，30 结论 500 mg，6mL玻璃管， PTFE筛板54331-UAscentis Express C18 HPLC色谱柱10 cm x 2.1 mm l.D.， 2.7 um53823-U 已发展出一种用于测定饮用水中BPA浓度的综合性样品制备及分析方法。该快速方法选用可快速进行检测、且不会引入杂质的材料及技术。使用SPE技术可萃取并浓缩BPA，且该方法的灵敏度高于简单顶空法或直接注射法。 相关产品 SIGMA- +iC a品名 目录编号双酚A分析标准品500mg 442840乙腈LC-MSCHROMASOLV°>99.9%，2.5L 34967-2.5L甲酸LC-MS级流动相添加剂，~98%，50 mL 56302-50ML-F 特别通知 36届国际毛细管色谱报告会 意大利-加尔达湖-会议宫 2012年5月27日-6月1日 国际毛细管色谱报告会(ISCC)是关于高压电子驱动微柱分离及相关技术的重要会议。本次ISCC大会将与第9届国际全二维气相色谱研讨会(GCxGC)合办，因此与会科学家可同时参加这两场会议。 届时将举行多场专题讲座并由年轻科学家作大会主题报告，还有醒目的海报展示，并展出最新发明的创新仪器，同时还会举办别开生面的社交活动，使全体与会者都有机会与世界知名科学家交流互动。 5月27日将安排一期综合性的GCxGC短期课程培训。会议开幕式将于5月28日(周一)举行，随后将召开全体会议。 欢迎相关领域的研究人员向我们提交论文摘要。也欢迎参展商及赞助商参与本次盛会。 期待在加尔达湖与您会面! Luigi Mondello教授 P.Sandra教授名誉主席 RIVA 2012名誉主席电子邮件： iscc@chromaleont.it 利用HPLC-MS-MS技术对L-及D-乳酸对映体进行高灵敏度测定 特约文章 本文资料是在外部人士的协助下利用Sigma-Aldrich产品的实验结果编写而成的。技术内容的编写者及提供者： H. Henry'、N. Marmy Conus?、P.Steenhout²、A. Benguin及O. Boulat 1Clinical Chemistry Laboratory， Centre Hospitalier Universitaire Vaudois，University of Lausanne， CH-1011， Switzerland 21Nestac Ltd， Avenue Reller 22， CH-1800 Vevey， Switzerland gaurang.parmar@sial.com 前言 本文概述了 H. Henry 及其同事的研究成果，您可通过以下地址与其联系： Clinical Chemistry Laboratory， Centre HospitalierUniversiaire Vaudois， University of Lausanne， CH-1011 Lausanne，Switzerland (1)。检测婴儿食品中的L-及D-乳酸对映体(图1)并进行定量非常重要，因为过多D-乳酸可能引起代谢性酸中毒，且若不进行处理将导致严重的神经学症状。因此，D-乳酸有可能成为用于诊断这类疾病的临床标记物。出于这一原因，在临床诊断中检测乳酸浓度、尤其是D-乳酸浓度具有重要意义。要检测并定量D-乳酸，需要一种可靠性和选择性较高的方法。本文概述了一种可同时检测并定量L-及D-乳酸对映体的新型高灵敏度分析方法。本方法采用 Supelco AstecCHIROBIOTIC°R 手性色谱柱进行 LC-MS/MS 分析，从而手性分离L-及D-乳酸对映体。此外，本方法具良好的线性及精确度，能够快速、简单地对L-及D-乳酸对映体进行常规临床检测，且重现性较高。 乳酸的L型及D型异构体均可导致代谢性酸中毒，但由于它们 的来源及代谢途径不同，因此它们的致病机理也有所不同。为了弄清不同乳酸异构体导致代谢性酸中毒的不同机理，有必要区分细胞质当中的乳酸异构体类型。然而，由于两种对映体的物理性质及化学性质较为相近，因而难以分别检测生物样本中的两种乳酸异构体。这就需要发展出一种高灵敏度的可靠方法来分离并定量尿液样本中的两种乳酸对映体。当前可采用p-乳酸脱氢酶，利用酶法测定来检测尿液中的D-乳酸。然而，在检测新生儿的尿液时，酶法测定的灵敏度及特异性不高，这是由于新生儿尿液中的D-乳酸浓度低于酶法的检测下限。 图2.利用Astec CHIROBIOTICR手性HPLC色谱柱对尿液中的L-及D-乳酸进行手性分离时所产生的LCMS/MS色谱图 HPLC(等度HPLCMS-MS系统)： 色谱柱： Astec CHIROBIOTICR手性色谱柱，15 cmx2.1 mml.D.，5 um ( (1 301 9A S T ) 流 动 相 ： 15 % (v /v)3 3 .3 m M 乙酸 铵 水 溶 液 ，8 5 % (v/v)乙腈溶液 流 速 ： 0. 7 m L /m i n 柱 温： 4℃ ) ( 检 测器 ： M S ，ES I (-)， MRM， m /z 89.1/ 4 3.3， 90.1/44. 3 ， 93. 1 /46.3 ) l-乳酸 ALDRICF Astec CHIROBIOTICR手性色谱柱非常适用于对亲水性酸(如a-羟基/卤酸及含N氨基酸)进行对映体拆分。该固定相独特的离子特性及氢键形成能力在手性识别机制中发挥着重要作用。另外， Sigma-Aldrich还提供了多种其他手性固定相，可用于分离各种分子的对映体。请登录sigma-aldrich.com/chiral， 访问我们的手性分离门户网，进一步了解与手性化学及手性分离有关的Sigma-Aldrich公司产品、使用信息及文献。 ( 参考文献 ) ( 1 . He nr y ， H . ； M a rmy Conu s ， N. ； S te enh out ， P； B e g u i n ， A.； B o ul at ， O .； S ensiti v e d etermi n at ion of L-and D - lactic acid in u r i n e by hi g h-p e rform a nce li q ui d c hr o m at og rap h y -t a nd e m m a ss s p e ct r omet r y ； Biomedical chromat og raph y ； h ttp： / /onli n el ibr ar y . w iley.com/ d oi/ 1 0 . 10 02 / b m c .1681/abstract ) 如需了解手性色谱产品的完整列表及相关应用文献，请访问我们的网站： sigma-aldrich.com/chiral ( 商标： Agil en t- Agilent Technologies； Amberch r om， A mb er j e t， Amberl i te， A mb er lys t ， Am b ersep， Am b er s orb， Duolite， XAD- R ohm a n d Haas Co.； Ascentis， C arb otr a p， C a r b o x en ， CH IR OBIOTIC， CHROM A SOLV， EN V I， ORBO， PESTAN A L ， Po r o z o r b ，Rezorian ， SL B ， Sta b leFlex ， Su pel ， S up elcl e a n， S u pe lc o ， Supel i t e， S u pe lp a k， T he rmogre e n-Si g m a-Aldrich Co. LLC； Auto S ystem， Pe rk i nE lmer， TurboMatrix - P e rkinElmer Corp.；Celite- C el i te Corp；Comb i PAL-CTC An alytics； Diaio n， MCI GEL ， S e p abeads - Mitsubishi Chemical；Dowex， Marathon， M o nosp h er e， O p tipor e ， R etardi o n- D o w Chemical Co.；Fused-Core- Advanced Materials Technology， I nc.； G asTi g h t-H amilton C o .； GER S TEL - G er stel Gm b H； Lewatit -Ba ye r AG；Omnifit - Bio- c hem Fluidics Ltd.； Sephad e x- G E He althcare Biosciences AB； S hi m a dzu- S h i madzu Corporation； SIChro m - F IA lab Ins t ruments， Inc.； T h ermo，Thermo Q uest， TR A C E，Tr iPl u s - Thermo Electron Corp.；Tedl a r-E.l. duPont de N emours； T o yopearl - TOSOH Corp.；Varian -V arian Associates Corp. ) 利用MSTFA及MSTFA-d，衍生物与GC-MS分析技术对化合物进行检测及鉴定的改良型方法 特约文章 本文资料是在外部人士的协助下利用Sigma-Aldrich产品的实验结果编写而成的。技术内容的编写者及提供者： Dieter Urbach Bundeskriminalamt (BKA)， KT 12-Zentrale Analytik II， 65173 Wiesbaden，Germany shyam.verma@sial.com 前言 在对已知及未知的化合物进行GC-MS定性及定量分析时，常采用衍生化方法，尤其是硅烷化法。这种方法并不仅限于小分子。即使是肽也可被烷基化，尤其是当需要引入氛时(1)。N-甲基-N-(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(MSTFA)是一种用途广泛的试剂，它可用于使有机化合物中的许多常见官能基衍生化。通过使用该试剂，可使其他基团连接一非极性三甲基硅烷(TMS)基团(图1)。在大多数情况下， TMS衍生物的沸点均比原化合物低，这使得气相色谱(GC)分析能够在较低温度下进行，从而降低了化合物在进样口或色谱柱中发生热降解的可能性。在进行定量分析时，建议使用催化剂(2-4)。 采用氛化MSTFA (MSTFA-d，)进行化合物鉴定 在某些情况下，很难精确地知道在某一分子中已有多少个官能基发生了衍生化反应，尤其是在处理未知化合物时。采用氛化MSTFAA(MSTFA-d。)有助于解决这一问题，因为每增加一个衍生化官能基， MSTFA-d。衍生物的分子量就将增大9个质量单位。因此，可通过计算MSTFA/MSTFA-d。色谱图的质量位移来计算出原始化合物的分子量。 对含氮化合物的鉴定。安非他命还会产生非特异性的模糊的大片段； 44 m/z 可同时对应胺基和荃基(图2(上))。o在进行MSTFA衍生化之后，质谱图(图2(中))中出现了典型的TMS衍生物片段(失去TMS中的甲基)，同时可根据片段质量 192 m/z 计算出目标化合物安非他命的完整分子的m/z (192+15 m/z=207 m/z，TMS-安非他命)。 由于采用了MSTFA-d，， 192m/z片段离子发生六个质量单位的位移(至198m/z)及九个质量单位的位移(至201m/z)i)(图2(下))。第一个位移表示添加了一个TMS基团。9个质量单位的位移则与安非他命脂肪链中的甲基键断裂有关，这提供了关于碎片机理的更多信息。 图3说明了MSTFA衍生化对SLB-5ms GC色谱柱上进行的色谱分离的影响。虽然样品中存在其他物质，但未衍生化安非他命首先出峰，随后是其TMS衍生物。这一实例说明了如何使用衍生化方法来改变滞留时间及选择性，从而分离出通常会与样品基质或样品中其他组分同时出峰的未知化合物。 概要 当前的大多数GC-MS系统均配备质量分辨率较低的单重四级杆质量分析仪。与三重四级杆质量分析仪或离子捕获质量分析仪不同，该仪器不能提供MS/MS或MS"图谱，因此特别适用于进行本文所述的MSTFA/MSTFA-d。衍生化方法。采用该仪器，不需要为了获得分子质量而改变离子化技术(例如化学离子化)，也不需要为了鉴别某分子或片段的化学结构及组成而进行其他MS/MS实验。 MSTFA及MSTFA-d。的另一优势是可比较其对应衍生物的色谱性质。TMS及TMS-d。衍生物会在同一时间窗口内出峰。氛化化合物会在若干秒之前出峰。这样，研究人员就可利用化合物滞留时间寻找并鉴定出目标化合物，即使是在浓度较低的情况下。 图1.羟基与MSTFA反应(甲硅烷化) H本图虽然只显示了与醇(R-OH)之间的反应，但该反应也可发生在R-COOH、R=NH、R-NH，、R-SH与MSTFA之间。CIR GIGM 图2.安非他命的质谱图(上)、TMS-安非他命的质谱图(中)， 以及TMS-d，-安非他命的质谱图(下) 衍生化 步骤： 取1mg样品溶解于270 pLMSTFA (或取约10 pg样品溶解角25 uLMSTFA-D，)。在70℃下加热10分钟。添加30uL吡啶。在70℃下加热10分钟。必要时添加氯仿来使溶液稀释。 色谱柱： SLB-5ms， 30 mx0.25 mm，0.25 um (28471-U) 参考文献 ( 1. S Speng l er， B . ， L utzen ki rchen ， F； Kauf m ann ， R. On-t a rget D e uter a t i o n for Peptid e S eq uenci n g by Lase r M as s Spectr o me t ry . O r g. Ma s s S p ec t r o m.， 1993 ， 28， 1 4 8 2 . ) ( 2 . Donik e ， M.N - M e th y l - N - tr i met hy lsi ly l- t r ifl uor a c et a m id ， e i n neu e s S i l y l i e ru n gsmittel aus der Re i he der s i ly l ierten A m i d e. J . Chromatogr.， 1969， 42，1 0 3. ) ( 3. Donike， M.； Z i mme r ma n n， J. Zur D a r st e llun g von Tr i m ethylsily l -， Tr iethylsilyl - und t er t. Butyl - di m ethy l s i l y l- e nol ather n vo n K et ost e ro i d e n furgaschromatogra p hische und m assen-spekt r ometr i sche Untersu c h u ng e n.J.Ch r oma t ogr. ， 1980，202，483. ) ( 4. Bl a u， K. in Handbo o k o f D e rivatives for C hromatography. Bla u ， K. an d H al k et ， J.M. (eds. ) Wi l ey - VCH Ver l ag Gmb H & C o . K G aA， Weinhe im ，199 3 . ) ( 5 . M cLafferty，F .W .；T u recek， F Inter p retation v o n Massenspektren. Spektr u m A kademi s cher V e rl a g ， Heidelberg， 1 995. ) 图3.安非他命及TMS-安非他命的GC-MS色谱图 (TIC，EIC)实验条件同图2 利用双层LpDNPH玻璃采样管进行醛酮化合物采样及利用Ascentis Express C18色谱柱进行HPLC分析的 方法 Kristen Schultz及Jamie Desorciekristen.schultz@sial.com 前言 双层LpDNPH采样管是一种空气采集装置，设计用于采集外界环境中、室内及工厂大气环境中的羰基化合物(例如甲醛)。羰基化合物被捕集于涂布2，4-二硝基苯肼(2，4-DNPH)的高纯度硅胶吸附挤中，于其中转变成稳定的腙衍生物。随后用乙腈将这些衍生物从采样管中洗脱出来，进行HPLC分析。 ORBOM-555是外径为6mm， 长度为110 mm 的双层DNPH玻璃采样管，其前半部含有 300 mg LpDNPH， 后半部含有150mg。后半部是作为后备吸附层，以防止在气体浓度较高的环境中或浓度不确定的环境中，，气体有时会穿过单层DNPH采样管。 ORBO-555的特点及优点 压降较低，可在1.5-2.0 L/min的高采样速率下使用，甚至可使用个体空气采样泵。 高纯度LpDNPH吸附剂，进行微量分析时实现更高准确度 在可控的低羰基物环境中制造而成 实验 采样结束时，移出吸附剂 (packing bed)， 置于15ml的小玻璃瓶中。向每一小玻璃瓶中添加乙腈(5mL)。令混合物静置1小时，偶尔搅动。未使用的采样管同样移出吸附剂(作为空白对照)，并以同样的方式萃取。移取吸附剂上方的溶液，并利用HPLC进行分析。利用单组且羰基-DNPH校正标准品混合物进行校正。 结果 表1.空白管 第一段 第二段 吸附层 吸附层 DNPH 1.1 mg 0.5mg 甲醛 0.03pg 0.01 pg 乙醛 0.01 pg 0.01 pg 丙酮 0.04 pg 0.02 pg 己醛 N.D. N.D. N.D.=未测得。 表2.样品管(减去空白值) 第一段 第二段 总 吸附层(ug) 吸附层(ug) (ug) 甲醛 3.74 0.00 3.74 乙醛 1.12 0.00 1.12 丙酮 3.93 0.00 3.93 己醛 0.96 0.00 0.96 表3.测得的气体浓度(ug/m3) 甲醛 乙醛 丙酮 己醛31.2 9.3 32.8 8.0 图1.样品试管的乙腈萃取结果(第一段吸附层) 色谱柱： Ascentis Express C18， 15cmx4.6mmI.D.，2.7um颗粒(53829-U)流动相A： 水流动相B： 乙腈流速： 0.5 mL/min.温度： 室温检测器： UV，360 nm进样量： 10pL 梯度程序： 分钟 1i. 2，4-二硝基苯肼(DNPH)23 甲醛-DNPHA-A 乙醛-DNPH 丙酮-DNPH 已醛-DNPH 图2.空白试管的乙腈萃取结果(第一段吸附剂)实验条件及波峰ID与图1相同。 SIGMA-ALDRICF 双层 LpDNPH ORBO-555 管是一种可测定气体中羰基化合物浓度的高效采样器(表3)。如空白管(图2/表1)所示，采样器的背景值很低，因而可准确测定低浓度样本或采样时间较短的样本。实验结果(图1/表2)说明，在所用采样条件下，未发生甲醛、乙醛、丙酮或己醛越过第一段吸附层的情况。 ALI +特色产品 品名 规格 目录编号 ORBO-555双层LpDNPH采样管 20 54020-U Ascentis Express C18 HPLC色谱柱 15 cmx4.6 mm， 2.7 um 53829-U 单组且羰基-DNPH溶液 甲醛-2，4-DNPH 47177 乙醛-2，4-DNPH 47340-U 丙酮-2，4-DNPH 47341 己醛-2，4-DNPH 47178-U 所用方法 我们的LpDNPH产品适用于如下方法： ( US EPA TO - 11A-利用吸附管及高效液相色谱测定空气中甲醛的方法 ) ( ASTM Method D5197 7- - 测定空气中甲醛及其他羰基化 合物的标准测定方法 ) NIOSH 2016，附录B-甲醛 ( USEPA IP-6A-利用固相吸附管测定室内空气中甲醛及 其 他醛类物质的方法 ) ( US EPA 100-室内空气中甲醛及其他羰基化合物的采样方法 ) 利用带有Thermogreen LB-2隔垫的Supel-Inert薄膜气体采样袋，代替Tedlar采样袋，进行VOC采样 Kristen Schultz及Jamie Desorcie kristen.schultz@sial.com 前言 10年来， Supelco一直致力于为客户提供高质量的Tedlar气体采样袋。最近，公司扩大了气体采样袋生产线以生产Tedlar的替代品，该产品用于进行VOC采样，其阀门接头中采用了低流失的ThermogreenLB-2隔垫。 关键特点及优点 。与Tedlar类似，对多种化合物表现出惰性 适于在两天内对大多数VOC进行采样及分析，及在至多24小时内对多种硫化物进行采样及分析。 对大多数酸、脂肪族有机化合物及芳香族有机化合物、氯化溶剂及醇保持化学惰性 耐摩 无静电性质；不同于其他替换膜， Supel-Inert膜不会粘附于工作台或其他材料上 可使用两种配件：推拉式阀门(PLV)及旋转式阀门(SCV) 袋子组成及构成 Supel-Inert膜是由氟化聚合物膜(PVDF； 聚乙烯基二氟化物)组成，特别设计用于自空气采集VOC样本，采用洁净、高质量的材料，以最高标准制造而成。密封接缝及阀门接头均经过渗漏测试，以确保完全密封，从而使样品损失量降到最低。Supel-Inert膜材料是Supelco公司专利材料。 测试VOC背景值 向新采样袋(刚从盒子中取出的)填充1升干净的干燥氮气。在室温下静置采样袋1小时。随后，利用空气采样泵，以100 mL/min 的流速，使采样袋中的全部内容物排放至Carbotrap" 300 热脱附管中(21705-U)。利用PerkinElmer热解析仪，在330℃下对热吸附管进行加热解吸5分钟。 结果一——VOC背景值 图1说明Supel-Inert膜袋的VOC背景值比Tedlar及Competitor K低，在从盒子中取出，并静置1小时后，其浓度低于10ppb的 TO-15校正混合物。底部色谱图显示浓度为 10 ppb 的 EPATO-15校正混合物(41973-U)；中间显示 Competitor K， 其上为Supel-Inert膜，最上方为Tedlar膜。 Tedlar显示出DMAC及苯酚峰。 SIGMA-AL 表1.Supel-Inert膜与Tedlar膜的比较 Supel-Inert膜 Tedlar膜 厚度 3mil 2mil 拉伸强度 6100 psi (42MPa) 8000 psi (55 MPa) 最大操作温度 150℃(302°F) 204℃(400°F) 比重 1.78 g/mL 1.70 g/mL 氧气渗透性 58mL/(m²xd) 50mL/(m’xd) 水蒸气渗透性 12-15 g/(m’x d) 9-57 g/(mxd) 二氧化碳渗透性 172mL/(mx d) 172 mL/(m’xd) 图1.Supel-Inert、Tedlar及Competitor K采集袋VOC背景值的比较(校正标准品10 ppb) 测试VOC回收率 利用洁净的干燥氮气两次清洁采样袋。随后向袋中填充1升TO-15/17校正气体混合物(62种组分，浓度均为1 ppm)(41973-U)。经过一定时间(4、24、48及120小时)，利用GasTight进样针从各采样袋中抽取 12.5 mL样品。将进样针中气体注射至吸附管进样器系统(ATIS)28520-U(该进样器系统的出气口连接了Carbotrap 300)，从而使进样器中气体集中至 Carbotrap 300 热脱附管 (21705-U) 中。利用PerkinElmer 表2.4小时至120小时的VOC回收率——62种组分的混合物 TurboMatrixM-150 热解析仪，在330℃下使热脱附管加热解吸5分钟。通过将相同的气体混合物(3.2、6.4、9.4、及12.5mL) 直接从气体针筒添加至Carbotrap 300管来绘制四点校正曲线。 结果 -VOC回收率 在室温下储存2天之后，25种化合物的回收率>80%；即使在5天之后，其中9种化合物的回收率仍>80%。在Tedlar中的相同化合物显示出相同的测试结果。 结论 基于背景值及回收率数据可知，相较于Tedlar及CompetitorK， Supel-Inert气体采样袋可提供较低的背景值，且与Tedlar相比，较适于采集大多数VOC。 化合物 %回收率 4小时 24小时 48小时 120小时 一溴二氯甲烷 101 85 80 52 三氯乙烷 89 85 77 50 庚烷 105 95 95 69 甲基异丁基酮 80 53 40 23 顺式-1.3-二氯丙烯 95 66 53 30 反式-1.3-二氯丙烯 90 52 38 19 1，1，2-三氯乙烷 93 72 61 35 甲苯 89 68 56 31 2-己酮 61 29 20 13 二溴一氯甲烷 97 77 68 39 1，2-二溴乙烷 89 60 44 24 四氯乙烯 99 81 73 42 氯苯 77 53 39 20 乙基苯 84 59 45 24 间二甲苯及对二甲苯 73 49 34 19 三溴甲烷 97 61 48 26 苯乙烯 59 33 23 13 1，1，2，2-四氯乙烷 87 56 42 22 邻二甲苯 69 45 31 17 4-乙基甲苯 64 40 27 15 1，3，5-三甲基苯 55 34 22 13 1，2，4-三甲基苯 47 27 19 12 氯苄 27 16 11 7 1，3-二氯苯 50 27 18 11 1.4-二氯苯 47 25 17 11 1.2-二氯苯 41 21 15 10 1，2，4-三氯苯 26 19 11 13 六氯丁二烯 58 35 22 14 *注：按通常的GC保留时间先后顺序 30223-U 旋转式 阀门(SCV) 30224-U 30225-U 30221-U 分析色谱柱 SPB-HAP， 60 mx 0.32mmx4um 25020-U LPLC纯化填料：：为您的独特挑战量身订造的解决方案茶 Sigma-Aldrich推出多种填料产品，使您得到最佳的纯化结果，同时提供一流的客户服务。 Lori Fields lori.fields@sial.com 有一句话是这样说的：所有纯化过程的唯一共同点就是它们都是唯一的。大多数用户都希望有一种产品既有最大限度的纯化范围，又可快速简便进行纯化。何种产品最适宜于当前的纯化应用是摆在用户面前最具挑战性的问题。为了满足用户的纯化层析需要， Sigma-Aldrich推出了多种色谱填料，除了供应现货外，我们还可提供多种定制服务(包括加工及包装)来满足客户的独特需求。 填料选择 可选用多种树脂及填料 选择色谱填料是关键的一步，决定了色谱分离能否成功以及能否获得理想的纯化结果。填装了多种无机、有机材料的色谱柱可用于进行多种色谱步骤(例如吸附色谱、离子交换色谱、疏水作用力色谱及体积排阻色谱)，适用范围包括低分子量化合物的分离和纯化以及灵敏度更高的生物分离。我们可提 供来自知名厂商的小包装树脂及填料产品， 包括： Sigma-AldrichDow/Rohm and Haas(西格玛奥德里奇)(陶氏罗门哈斯)TosohGE Healthcare(东曹)(通用电气医疗集团)Merck KGaAGrace Davison(默克集团)(格雷斯戴维森)LanxessMitsubishi(朗盛)(三菱) U.S. Silica(美国石英材料公司) 我们的产品范围不仅有合成性聚合物，还包括传统的无机吸附剂，如硅胶、键合相硅胶、氧化铝和弗罗里硅土等。 聚合树脂 Sigma-Aldrich可提供多种品牌及类型的通用及专用有机(聚合)树脂，适宜于所有类型的纯化工艺，包括： 阴离子及阳离子交换 。混合离子交换 螯合离子交换核子级离子交换 自吸附 凝胶过滤 我们可提供多种知名品牌的实验室纯化及中试级的纯化树脂及填料，包括： .SupeliteM Supelpak"M 2 (由Amberlite°XAD-2纯化而得) Dowex MarathonMonosphere@Optipore°、Retardion Amberlite°、Ambersep@、Amberlyst、Amberjet、Ambersorb°、Amberchrom、Duolite" Diaion@、MCI-GEL、Sepabeads Lewatit Sephadex Toyopearl 无机吸附剂]RICH 我们提供齐全的无机吸附填料，适用于多种纯化应用，进一步完善了Sigma-Aldrich的聚合树脂产品组合。我们的无机吸附填料包括： 裸硅胶 硅胶、键合硅胶，例如C18、C8、氨丙基、氯代丙基硅胶等 Florisil硅酸镁 活化氧化铝 (Celite 及硅藻土助滤剂(CAFA II) HCarboxenTM及碳分子筛C 客户定制型树脂及填料加工服务 除了上述现货产品 外， Sigma-Aldrich还可 为您提供客户定制加 工服务，以满足您的 特定纯化要求。以下 部分列举了我们可提 供的树脂及填料加工 服务。 清洁-来自树脂原料的渗沥液是主要的污染物来源。我们的化学家可利用多种方法(包括使用溶剂的方法及不使用溶剂的方法)来清洁树脂。 预湿润-干的填料通常 难以操作。为此，我 们利用溶剂或水对填 料进行预湿润，使其 适应您的加工方法且易于操作，同时减少散落到实验室工作台或地板上的填料。 混合-我们可混合多种不同树脂，使您就无需进行树脂混合，也无需在实验室中储存两种或两种以上的不同树脂。干燥-残留的水分可干扰某些分析结果或使树脂分散到有机溶剂中的能力降低。我们可根据您的应用需求对几乎任何树脂进行干燥。 离子形式转变-若制造商提供的离子交换介质产品中的平衡离子不适合您的应用，我们可将它转变并提供正确离子形式的介质。 消毒及灭菌-我们可按照美国药典规定的方法进行灭菌及内毒素测试。我们的许多消毒灭菌操作是由客户指定的。 QC测试，包括检验报告书 (C of A)- Supelco是一家经过ISO-9001：2000认证的供应商。我们可采用多种分析方法进行测试，以检验特定树脂是否满足您的特定要求。 定制包装 我们可对大包装填料或定制型填料提供几乎任何包装形式，包括简单储存容器、串联型柱，以及特定方法使用的特定装置。例如，一次性 PorozorbTM (250、1000及4000mL)及 RezorianTMA161 (1及5mL)柱就是我们可提供的特殊 LPLC 填料包装方案。 联系方式 若您需要了解有关选择及使用填料及树脂的更多详情，或咨询客户定制加工及包装服务，请登录sigma-aldrich.com/techservice 或与您当地Sigma-Aldrich办事处的技术支持专家联络。 经济型多功能玻璃柱 ·现玻璃柱可多次使用。 多多种填料及包装形式，满足您的特定需求-ALDF Sigma-Aldrich可提供多种玻璃柱产品，包括ACE重力柱、Aldrich玻璃快速色谱柱、Michel-Miller柱、Sigma玻璃柱及Omnifit柱。欲了解我们的全部产品及服务，请登录 sigma-aldrich.com/lplc订购时的参考代码是SCM。有效期至2012年6月30日。 用于GC衍生化的新型硅烷化试剂 Shyam Verma shyam.verma@sial.com 通过硅烷化的方法对化合物进行衍生化反应可改变化合物的化学性质，从而增加其挥发性，并减少表面吸附。硅烷化衍生物是通过取代-OH、-SH及-NH基团上的活性氢原子而形成的。含有活性氢原子且适于进行硅烷化的化合物包括酸、醇、硫醇、胺、酰胺，以及可烯醇化酮和醛。若不经衍生化，这些化合物会显示出较差的色谱性能，例如气化不完全、热稳定性较差或检测器响应值较小。这些化合物的硅烷化衍生物通常可更好地气化、极性较小、热稳定性更高，因而可进行快速色谱分析。硅烷化试剂的选择要素有：硅烷化试剂的反应活性、选择性、目标用途、衍生物的稳定性，以及反应副产物的多样性及性质。 硅烷化对于质谱分析而言同样非常重要，引入硅烷化基团可产生更易辨别的特征碎片或更有特征性的用于进行SIM(选择性离子监测)的特征性离子。 Sigma-Aldrich可提供多种不同类型的衍生化试剂，并且我们仍在不断寻求改进，希望能够提供改良产品或新型产品。下列产品可使您在不使用溶剂或过多GC试剂的情况下完成硅烷化。您可登录 sigma-aldrich.com/derivatization 获得完整的产品列表。 特色产品 品名 规格 目录编号 用于GC衍生化的硅烷化试剂 三甲基硅烷甲烯醇亚磺酸酯 5mL 79271 三乙基硅烷甲基丙烯醇亚磺酸酯 5mL 79264 叔丁基二甲基硅烷甲基丙烯醇亚磺酸酯 5mL 79262 SIGN Derivatization Reagents amkr For Selective Response and OPSUELCO tection in Complex Matrices 新品推出!优良的衍生化试剂 超过400种衍生化试剂，可用于进行准确的GC、HPLC oo 或TLC分析 用于GC分析的硅烷化、酰基化及烷基化试剂用于TLC应用的衍生化试剂用于HPLC分析的UV/VIS、荧光及电子化学衍生物衍生化反应配件 用于手性分析的手性衍生化试剂 您可登录 sigma-aldrich.com/derivatization获得免费的新版衍生化指南以及产品及订购信息 SIGMA-ALDRICH ANALYTICAL 2012年3月13日(周二)，红区在进行LC-MS分析之前，从生物基质中同时进行蛋白质沉淀) SUPELCO Fluka 及磷脂去除的一步方法Analytical Analytical一-Craig Aurand欢迎莅临PITTCON大会2040展台! 2012年3月13日(周二)，蓝区关于利用rRNA检测系统可缩短花生酱样品中伤寒沙门氏菌富BN 集时间的验证实验讲座 -ShyamVerma 2012年3月11日(周日) 用于溶剂解析的新型混合型SPME-LC萃取头下午3：15，307C室，演讲人Craig Aurand -Katherine Stenerson了解HILIC色谱固定相的选择性：保留机理改变的影响 -种利用HPLC蒸发光散射检测仪 (ELSD)检测药品标准物质下午2：35，307A室， 演讲人： Olga Shimelis (氨基酸)的新型方法在QuEChERS样品净化方法中利用Z-Sep及Z-Sep+SPE吸附剂 -Vicki Yearick分析蔬菜水果中残留的农药 用于进行溶剂残留分析的高纯度顶空溶剂N，N-二甲基乙酰胺下午2：50，206C室，演讲人： LenSidisky -Shyam Verma利用离子液体作为毛细管气相色谱固定相 -种经改良的用于复杂食品基质中霉菌毒素分析的样品制2012年3月12日(周一) 备法上午9：00，311C室，演讲人： Richard Henry -Olga Shimelis多孔及超多孔颗粒的选择性图表的对等性 2012年3月14日(周三)，红区高效q-NMR 如何对不确定度<0.1%的有机CRM进行溯源2012年3月13日(周二) 追踪下午2：40，308B室，演讲人： Richard Henry -Michael Weber超快速LC-UV法开发过程中色谱柱及仪器设计的重要作用新一代qNMR鉴定的认证参考物质-Vicki Yearick2012年3月14日(周三)一种用于对工厂环境中异氰酸酯衍生物气体及颗粒进行下午3：55，307C室， 演讲人： Richard Henry LC-MS检测的新型主动采样装置新型多孔及超多孔颗粒在超高效液相色谱(UHPLC)中的性 -Daniel Vitkuske能比较2012年3月14日(周三)，蓝区Selectophore产品-—一种用于食品、环境、生物医药及工业海报展示领域的新型离子选择性感应材料周一至周三海报将于上午10：00至下午4：30展出。作者将于 -Shyam Verma上午10：00至中午12：00出席。 种新型的QuEChERS分散性SPE材料及利用LC-MS-MS分析兽周四海报将于上午10：00至下午2：30出出。作者将于上午 药残留的方法11：30至下午1：30出席。 -Olga ShimelisC2012年3月12日(周一)，蓝区IR将聚离子离子液体用作毛细管GC固定相的研究D-Len SidiskyL A毛细管GC的载气选择 -Len Sidisky/-不能出席PITTCONAM大会?GI请登录 sigma-aldrich.com/pittconS获取2012 Sigma-AldrichPittcon CD， 其中包含了所有讲座、海报展示及相关文献。 SUPELCO 增强连续进样色谱 的分析性能-：——熔融核 颗粒色谱柱 hused-Core) 6特约文章 本文资料是在外部人士的协助下利用Sigma-Aldrich产品的实验结果编写而成的。技术内容的编写者及提供者： Petr Chocholous， Dalibor Satinsky， Petr Solich Charles University， Faculty of Pharmacy， Department of Analytical Chemistry， Heyrovskeho 1203， Hradec Kralove， 500 05， Czech Republicwayne.way@sial.com 前言 由Satínsky等人于2003年引入的连续进样色谱法(SIC)是一种仍在不断发展的方法，该方法是基于一种用途广泛的连续进样分析(SIC)固相萃取装置，该装置采用短色谱柱(1)。一直以来，人们在SIC方法中仅使用短的整体性色谱分离柱(2)。新型Ascentis Express Fused-Core°(熔融核)颗粒色谱柱(C18，3 cmx4.6 mm I.D.)之所以得以使用，是因为该色谱柱可与中压SIC固相萃取装置兼容。采用常用的流速(0.5-1.0mL/min)及工作反压(3-6.9MPa)就可使这些色谱柱获得良好的分离性能。 本研究(3)旨在证实该色谱柱的所有特性，并测试该色谱柱是否可用于分离色谱性能类似的混合分析物。 雌激素是一类作为女性主要性激素的固醇类化合物，其中主要的化合物为雌二醇。所选取的用于测试色谱柱性能的四种雌激素分别是β-雌二醇、17-α-炔雌醇、孕酮及17-α-雌二醇-半水合物(图1)。这些化合物结构仅在类固醇结构的17位取代基有所不同，因此适用于测试色谱柱的色谱性能。对羟基苯甲酸乙酯是食品及药物中的常用防腐剂，选用其作为内标物。 图1.所用雌激素及内标对羟基苯甲酸乙酯的化学结构式 实验 SIChromTM 仪器 (FIAlab仪器公司，美国华盛顿州贝尔维尤)安装了S17 PDP注射泵及4.0mL储液池，并配有光纤CCD UV-VIS检测器USB 4000 (Ocean Optics公司，美国佛罗里达州丹纪丁)(图2)。 图2.利用内标检测4种雌激素的SIC装置简图 8-释放阀门20PSI色谱柱后 1! -Sapphire注射泵2-八通阀3-色谱柱4-Z-流动室5-UV灯) -CCD UV-VI检测器-具有FA lb软件的电脑 9-样品 10-流动相 11废液 12-含释放阀门的压力计-系统压力安全阀1000 PSI 用于分离所有物质的流动相均为乙匀：水(40：60，v/v，未校正pH值)。样本为含四种雌激素(20.0 ug/mL)及内标物对羟基苯甲酸乙酯(4.0 ug/mL)的混合物。 结果与讨论 EP B-EST A-EST Et-EST ESTN 保留时间(分钟) 1.55 2.36 2.88 3.24 3.69 峰对称性 1.67 1.67 1.50 1.30 1.25 理论塔板数 1288 1875 1930 2482 2377 理论塔板高度(um) 23.3 16.0 15.5 12.1 12.6 分离度 4.06 2.15 1.42 1.58 表2.在Ascentis Express色谱柱上进行SIC方法的验证结果及分析参数 EP B-EST A-EST ET-EST ESTN 校正范围(ug/mL) 0.6-10.0 3.1-50.0 3.1-50.0 3.1-50.0 3.1-50.0 校准方程 斜率 0.0044 0.0075 0.0055 0.0076 0.0052 校准方程 截距 -0.0371 0.0275 0.0211 0.0281 0.0180 校正系数 0.997 0.998 0.998 0.998 0.999 检测限(ug/mL) 0.2 1.0 1.0 1.0 1.0 定量限(ug/mL) 0.6 3.1 3.1 3.1 3.1 系统精度(%)^ <2.0 <2.0 <2.0 <2.0 <2.0 保留时间重复性tR(%)^ <2.0 <2.0 <2.0 <2.0 <2.0 ^计算六次重复注射的标准品的相对标准差(R.S.D)(n=6)——每种雌激素的浓度为20.0 ug/mL， EP浓度为 4.0 ng/mL 色谱性能及品质因数 检测结果显示，所有的分析参数(线性、灵敏度、可重复性、选择性及精度)均较佳。线性的确定方法为：利用40%乙腈将储备溶液稀释成不同的最终浓度，从而制得一系列工作溶液。可观察到，雌激素的摩尔吸收系数非常低，因而线性校正范围较窄，且其远低于对羟基苯甲酸乙酯的摩尔吸收系数。在两种方法中，均采用六种工作溶液进行校正。每种工作溶液均进样一式三份，且随后利用峰高平均值来绘制校正曲线。该分离法的特性如表1所示。检测到的分析参数如表2所示。图3中具有代表性的连续进样色谱图谱显示，熔融.核(Fused-Core)颗粒色谱柱上可成功分离所有分析物。 结论 利用短柱可成功分离五种分析物。使用死体积低、流动相流速低的短Fused-Core颗粒色谱柱可在5分钟内实现对五种分析物的高效分离。Fused-Core颗粒色谱柱的使用为SIC系统带来了新的特色-，―—更高的分离效率、高质量容量、广泛的工作pH(2-9)、可选择多种色谱柱固定相、色谱柱尺寸多样，且与SIC中常用的整体柱相比，造价更低。 外界普遍认为，这一流动法研究成果扩大了SIC的色谱分离能力，并且紧跟快速色谱分离的趋势。色谱性能的改善以及SIC的典型特性(断续流动、样本操作简便、仪器操作简便、可便携)使每次分析的成本得以降低。 图3.利用Ascentis Express C18色谱柱分离对羟基苯甲酸乙酯、β-雌二醇、a-雌二醇、炔雌醇、孕酮 色谱柱： Ascentis Express，3 cm x4.6m m ID.，2.7 im 63818-U) 流动相： 4060(.v)，乙腈：水 流速： 0.48mLm in 温度： 室温 检测器： UV波长225 nm 进样量： 10 IL 对羟基苯甲酸乙酯EP) 1.55m n 图2及图3经Elsevier Limited(英国牛津)允许使用 ( 参考文献 ) ( 1 . D . Sat insky， P . S ol i ch， P . Choc ho lous ， R. K arlic ek ， A nal. Ch i m. A c t a 49 9 2 0 03 205 -2 1 4 . ) ( 2 P . C ho ch o lous， P . S o lich， D. S atín s k y ，Anal . C h im. Ac t a 600 2 0 07 12 9 - 1 35 3 ) ( P Ch o chol o us， L. K o s aro v a ，D . S a ti n sky， H. S kle n a r o v a ， P. Sol i ch， Tal a n t a 8 5 ( 201 1)1 12 9-113 4 . ) SIGMA-ALDRICH 西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司 上海 北京 广州 电话：021-61415566 电话：010-65688088 电话：020-38840730 传真：021-61415567 传真：010-85801346 传真：020-38840679ALCSIGMA- SIGMA-ALDRICH 编号：SAAN005 SIGMA-ALDRICH 上海：京：州：eporter