肉制品中添加及非法添加检测方案

深圳逗点生物技术有限公司-biocomma biotech co.，ltd.- 动物源性食品中四环素类药物检测的固相萃取方法 ( Silibase TM C8/SCX) 一、实验目的 本实验利用固相萃取法作为样品的前处理方法， LC-MS/MS法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂用量。 二、实验目标物 四环素(CAS：60-54-8)，金霉素(CAS：57-62-5)，强虽霉素(CAS：564-25-0)。 三、应用范围 本方法适用于动物源性食品中四环素类药物的LC-MS/MS检测及确证。 四、参考标准 推荐性国家标准《GB/T 21317-2007动物源性食品中四环素类兽药残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法与高效液相色谱法》。 五、实验材料 Biocomma SilibaseC8/SCX固相萃取柱200mg/6mL。 六、实验方法 1、样品提取 将样品混匀、均质，有结晶的样品于60℃以下水浴融化混匀、迅速冷却；在50mL带螺盖的离心管中精确称取约6g(精确到0.01g)均质后的样品；加入25mLEDTA-Mcllvaine缓冲溶液迅速混匀1min，冰浴超声20min；3000r/min离心10min，取上清液，过快速滤纸，收集滤液，待净化。 2、SPE柱净化 (1)活化：将固相萃取真空装置与真空泵连接好，装上C8/SCX柱，依次以5mL甲醇和10mL纯水预处理。 (2)上样和洗脱：取样品提取液中上清液10mL过柱，流速控制在约每秒1滴；依次以5mL水+5mL甲醇/水(1：19，体积比)溶液淋洗柱子；淋洗液完全通过小柱后，抽真空20min；以10mL甲醇+乙酸乙酯(1+9)洗脱，收集洗脱液。 (3)浓缩定容：将洗脱液氮吹吹干，用2mL甲醇定容，过0.22um有机滤膜，用于LC-MS/MS分析。 3、LC-MS/MS条件 液相色谱-质谱/质谱仪 色谱柱：C18柱：150mm×2.1mm， 2.0um， 或相当者 流动相：甲醇-10mM草酸 七、实验结果 1、添加回收结果 向样品中加入不同水平的四环素类药物，回收率结果如下：(见表1) 表1动物组织中四环素类药物添加回收结果 样品名称 化合物名称 添加水平(ng/mL) 回收率(%) 猪肉 四环素 50 97.38 100 92.94 强力霉素 50 80.43 100 81.87 金霉素 50 95.72 100 94.63 2、空白样品添加农药残留物色谱图 图1四环素标准色谱图 图2金霉素标准色谱图 图3强力霉素标准色谱图 本号： C/SCX-WW.DIocomma.cn