UV-1100紫外可见分光光度法测定杜仲绿原酸的含量

Technology-because you change 紫外可见分光光度法测定杜仲绿原酸的含量 关键词：紫外可见分光光度法；仲绿原酸；美析仪器 www. macylab.com；UV-1100；UV-1200 目前，测定绿原酸含量的方法很多，常采用毛细管电泳法、HPLC 法、可见分光光度法和纸层析-紫外可见分光光度法等。但样品处理均采用索氏回流提取，后经层析分离洗脱等步骤。时间长、效率低。本文采用紫外可见分光光度法测定绿原酸含量，只需超声波提取一小时。不经分离纯化而直接测定，具有快速准确、稳定性好等特点，适合大批量样品分析测试。 1材料与方法 紫外可见分光光度计： UV-1100(美析中国)；超声波洗涤器： MS-5000(日本)；：甲醇(AR)(湖南师大试剂厂)；绿原酸标样。供试材料杜仲叶于1997年5月采于江江林场。 2研究方法 2.1波长的选择 根据绿原酸可溶于水、甲醇的性质.精密称取绿原酸标样10.1mg，用50%甲醇溶液溶解定容至10ml稀释10倍后予800~200nm 范围内扫描，，以50%甲醇溶液作参比，在325nm处有最大吸收蜂。另将绿原酸标准液点条样于层析纸上，用水作展开剂展开后，于紫外灯下去掉荧光部分(即绿原酸部分)，其余部分用50%甲醇溶液超声提取15分钟，以50%甲醇作参比，在800200nm范围内扫描， 在345nm 处有最大吸收峰，故选定345nm、325nm， 为测定波长，其绿原酸吸光值为(△A=A325一A345)。 2.2标准曲线的制备 精密称取绿原酸标样适量，用50%的甲醇溶液稀释成每毫升含绿原酸5.05、10.1、15.15、20.2、30.3、40.4g的标准溶液，以50%甲醇溶液作参比.在345nm 325nm 处测定 A345、A325值，求得A(△A=A325—A345)，以样品的浓度C(ug/ml)为横坐标，，吸光度△A为纵坐标，绘制A—C标准曲线，求得回归方程为：C=KAA+B，其中K=66.247，B=一0.5808。 2.3样品的测定 精密称取杜仲叶粉 0.5000g 于 60ml试管中，加入40ml 50%甲醇溶液，放人超声波洗涤器中超声提取 15min 后过滤。滤渣再加入40ml 50%61甲醇溶液，超声提取15min，共重复上述操作四次(三个平行)，合并滤液定容至 250ml。在紫外可见分光光度计上以50%甲醇为参比，测定A325、A345值，求得绿原酸含量。 3结果与分析 3.1测定结果 3.。2稳定性实验 将测定的样品在室温下放置24小时后再测定其吸光值A变化不大，说明在50%甲醇溶液中稳定。 3.3 回收率实验 将标样配成一定浓度加人已溯样品中.测定其含量，计算回收率。 4结论 (1)绿原酸在5.05~40.4ug/ml之间，其吸光度△A=A325一A345 与浓度呈良好线性关系。 (2)采用紫外可见分光光度计测定杜仲叶中绿原酸含量，其稳定性好、重复性好，回收率为104.2%。此方法简便、快速、准确、稳定，可用于杜仲叶片绿原酸含量的测定。 http：//www.macylab.comTel：