UV-1100分光光度法测定组胺的含量

Technology-because you change 分光光度法组胺的测定 美析仪器 关键词：分光光度法；组胺；美析仪器www.macylab.com； V-1200；V-1100 一、组胺的简介 组织胺(Histamine)是一种活性胺化合物，化学式是 C5H9N3，分子量是111。是广泛存在于动植物体内的一种生物胺，是由组氨酸脱羧而形成的，通常贮存于组织的肥大细胞中。在体内，组胺是一种重要的化学递质，当机体受到某种刺激引发抗原-抗体反应时，引起肥大细胞的细胞膜通透性改变，释放出组胺，与组胺受体作用产生病理生理效应。 组胺合成过程主要发生在肥大细胞、嗜碱细胞、肺部、皮肤和胃肠粘膜中，和储存组胺的组织相一致。 在肥大细胞中，组胺作为无活性的复合物储存在颗粒中，这一复合物是由组胺和多聚硫化阴离子、肝磷脂和一种阴离子蛋白所组成。如果不被储存，将迅速被胺氧化化灭活。 二、组胺的功能 组胺存在于肥大细胞内，亦存在于肺、肝及胃的粘膜组织内。它在过敏与发炎的调节上扮演一个很重要角色。组织胺属于一种化学讯息，亦是胺能神经传递素，参与中枢与周边的多重生理功能。在中枢系统，组胺是由特定的神经所合成例如位在下丘脑后部的结节-乳头核，神经细胞多向延伸至大脑其他区域与脊椎，因此暗示组织胺可能参与睡眠，荷尔蒙的分泌，体温调节，食欲与记忆形成等功能，另外还位于网状结构与端脑；在周边部分，组胺主要储存在肥大细胞，嗜碱粒细胞和肠嗜铬细胞，可引起痒、打喷嚏、流鼻水等现象，此外组胺结合到血管平滑肌上的接受器(H1R)导致血管扩张因而产生局部水肿，组胺会使肺的气管平滑肌收缩引起呼吸道狭窄进而呼吸困难，肠道平滑肌收缩降低血压以及增加心跳(tachycardia)等多项生理反应。 三、组胺的性状 组胺为广泛存在于人体组织的自身活性物质。组织中的组胺主要含于肥大细胞及嗜碱细胞中。因此，含有较多肥大细胞的皮肤、支气管粘膜和肠粘膜中组胺浓度较高，脑脊液中也有较高浓度。肥大细胞颗粒中的组胺常与蛋白质结合，物理或化学等刺激能使肥大细胞脱颗粒，导致组胺释放。组胺与靶细胞上特异受体结合，产生生物效应；如小动脉、小静脉和毛细血管舒张，引起血压下降甚至休克；增加心率和心肌收缩力，抑制房室传导；兴奋平滑肌，引起支气管痉挛，胃肠绞痛；刺激胃壁细胞，引起胃酸分泌。组胺受体有 H1、H2、H3亚型。组胺的临床应用已逐渐减少，但其受体阻断药在临床上却有重大价值。 四、组胺的测定 (一)、分光光度法 一、原理 样品中的组胺用三氯醋酸提取，再；对氨基苯磺酸钠和亚硝酸钠反应生成红色化合物其吸光R与样品中组胺含量成正比。样品与标准比较定量。 二、仪器与试剂 仪器：721型分光光度计、电热恒温水浴箱试剂： 1、100g/L三氯醋酸：称取100g三氯醋酸(分析纯)，用水溶解并定容至 1000ml； 2、250g/L氢氧化钠：称取12.5g氢氧化钠(分析纯)，用水溶解并定容至 50ml； 3、5g/L对氨基苯磺酸钠：称取O.5g对氨基苯碘酸钠(分析纯)，用 0.1mol/L 氢氧化钠溶解并定容至 100m1。 4、50g/L盐酸亚硝酸钠：称取5g亚硝酸钠(分析纯)用水溶解并定容至100ml，临用时与 1mol/L的盐酸等量混合。 5、组胺标准储备液：准确称取在硫酸干燥器中干燥 24h 的盐酸组胺16.6mg(分析纯)，用水溶 解并定容至 100m1 容量瓶中。该溶液每毫升含组含100ug。 6、组胺标准使用液：准确吸取组胺标准储备液 I0ml 于 100ml 容量瓶中，用水定容至刻度，该溶液每毫升含组胺为 10ug。 三、样品处理 除去样品中的非可食部分，将样品捣碎、混匀，准确称取1-5g于50ml具塞三角瓶中(或 50ml 比色管)中，加人20m1三氯醋酸(100g/L)，在600C 水浴中浸提 30min， 过滤。残渣用水洗2次(每次加水l0ml)并过滤，合并滤液，用氢氧化钠溶液(250g/L)中和滤液至 pH5.0， 再用水定容至100m1。 四、标准曲线的制作与样品测定 1、标准曲线的制作 准确吸取标准使用液 0，0.5，1.0.2.0，3.0，4.0m1于I0ml比色管中，各加水至 5.0ml(相当于0.5.0，10.0，20.0， 30.0， 40.0 u g组胺)，各管分别加入5.0ml 对氨基苯碘酸钠溶液和 0.3m1 盐酸亚硝酸钠溶液，混匀 5min 后以零管为参比，于450nm，1cm比色杯测定吸光度值，并绘制标准曲线、 五、样品侧定 准确吸取1.0-5.0ml样品处理液于10ml比色管中，以下按第四项中“加水至5.0ml~”进行；样品与标准比较定量。 六、结果计算 式中：X一样品中组胺含量， mg/1000g； A一测定时样液中组胺的质量，， [ug W一样品质量， g；V一测定时取滤液的量， ml； V，一样品滤液总量， ml 关键词：分光光度法；组胺；美析仪器www.macylab.com； V-1200；V-1100 http：//www.macylab.comTel：