空气中有机污染物检测方案

环境空气中尼古丁的高效液相色谱测定方法 摘要：目的建立高效液相色谱(HPLc)测定环境空气中尼古丁的方法。方法样品通过反相C18柱(150×4．6mm)分离，采用磷酸二氢钾～乙腈溶液为流动相(流速为lml／min，采用等度洗脱)，通过紫外检测器检测(波长为260nm)。结果该方法标准曲线的相关系数为0．99993，工作曲线的相关系数为0．9995，检出限为4．03×10-3ug/ml，测定下限为3．12×10-2ug/ml，对低、中、高3浓度尼古丁加标回收率为87．4％、88．5％、90．8％，对低、中、高3浓度尼古丁测定的相对标准偏差分别为0．88％、0．52％、1．1％，对低、中、高3浓度尼古丁的解吸率测定分别为92．3％、94．3％、94．6％，以及采样器中样品稳定性实验，表明11d内样品均稳定。 结论：该方法灵敏度高，重现性好，操作简便，仪器易普及。 关键词：高效液相色谱：环境卒气中尼古丁；检测 目前．国内外尼古丁的测定方法有很多种，例如可以采用LC—MS、LC—MS—MS、GC—MS的方法．但由于这些方法中仪器较昂贵，仪器保有量很低，无法在基层单位推广。由于用高效液相色谱检测尼古丁的方法具有灵敏度高．重现性好．且仪器易普及的特点。适用于实验室推广使用。因为本方法不仅可以监测环境空气中尼古丁的浓度。还可以测定人体生物样品如尿液、唾液和头发中的尼古丁含量．从而可以比较准确地评价人群的暴露水平。为制订科学的控烟措施及评价控烟效果提供技术支持。 材料与方法 1方法原理 环境中气态尼古丁采用被动式采样器采样．采样后将4％NaHS04-5％甘油溶液浸渍的玻璃纤维滤膜经氢氧化钠洗脱和正庚烷萃取．在萃取液中加盐酸混匀，用氮吹仪吹至近干，用流动相定容。使用C18反相色谱柱分离．紫外检测器检测，检测波长为260nm，以保留时间定性，以峰面积定量。 2实验仪器、材料和试剂 2．1实验仪器和材料 LC7000高效液相色谱仪。快速混匀器，超声波清洗器、氮吹仪，玻璃纤维滤膜(d=42mm)，被动式采样壳体(由中疾控提供)，10ul和50ul微型注射器，1．5ml样品瓶 2．3实验试剂 尼古丁(标准品)，磷酸二氢钾(分析纯)，磷酸(分析纯)，盐酸(分析纯)，乙腈(色谱纯)，庚烷磺酸钠(色谱纯)，正庚烷(色谱纯)，甘油(分析纯)，氢氧化钠(分析纯)。 3样品采集 3．1尼古丁吸收液的配置 准确称量20．09g NaH-S04和25．0g甘油，用纯水定容于500ml，配制成4％NaHS04-5％甘油的尼古丁吸收液。 3．2滤膜制备选择合格滤膜． 对光检查无针孔或折缝；将玻璃纤维滤膜在马弗炉中450℃烘烤2h．放入干燥器中冷却至室温：从干燥器中取出玻璃纤维滤膜。用尼古丁吸收液浸渍0．5h后．取出置于干燥器中晾干备用。 3．3采样器安装 被动式采样器由壳体、挡风层和吸收层组成。壳体包括前盖、压环、托板和底座，挡风层为核孑L滤膜和涤纶纱网．吸收层为浸渍尼古丁吸收液的玻璃纤维滤膜。安装好采样器后，放入铝箔袋中。封口。 4实验分析步骤 4．1流动相的制备 准确称取1．09g磷酸二氢钾，用超纯水溶解至接近于lL，用磷酸调节pH值为3，定容至lL，准确加入0．0082g庚烷磺酸钠，混匀，通过0．45um过滤膜过滤，制得的磷酸二氢钾溶液与乙腈比例为9：l混匀。 4．2色谱条件 色谱柱C18柱150mm×4．6mm 5um ．柱温为25℃，SPD检测器，检测波长为260nm．流动相流速为1ml／min。 4．3标准溶液制备 准确称取10．1mg(99％的尼古丁)于10ml容量瓶中，加入流动相定容，超声3min。配成1.0ug/ul的尼古丁(1)液，取(1)液1ml于10ml容量瓶中，用流动相定容，得0.1ug/ul的尼古丁(2)液。 4．4尼古丁标准曲线的制备 分别移取尼古丁(2)液5ul、10ul准确加入1ml流动相，混匀，得0．5ug/ml、lug/ml。又分别移取尼古丁(1)液2u1、4ul、8ul、16ul准确加入1ml流动相，混匀，得2ug/ml、4ug/ml、8ug/ml、16ug/ml标准系列，得到尼古丁的标准系列分别进样5ul进行分析，各点进样3次，各点对应峰面积取平均值．以标准系列质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标．绘制峰面积和浓度的标准曲线。 4．5尼古丁工作曲线的制备 分别移取尼古丁(2)液5ul、10ul，移取尼古丁(1)液2ul、4ul、8ul、16ul置于制备好的玻璃纤维滤膜上，分别放于10ml比色管中．各加入5．0m1 1.5mol／L的Na0H和准确加入2．0ml正庚烷充分混匀后在恒温65℃超声30min，取出于漩涡混匀器上．混匀3min．取正庚烷层(1．8ml)，加l0“l盐酸，65℃超声混匀3 min，漩涡2min，氮吹近干，用lml流动相定容．65℃水浴超声3min漩涡2min彻底解析出尼古丁。分别进样5ul进行分析．各点进样3次，各点对应峰面积取平均值。以标准系列质量浓度为横坐标．峰面积为纵坐标，绘制峰面积和浓度的工作曲线。 4．6样品处理 将样品取回后．取出内装的玻璃纤维滤膜，置于10.0ml比色管中．各加入5ml 1.5mol／LNa0H和准确加入2．0ml正庚烷充分混匀后在恒温65℃超声30min．取出于漩涡混匀器上，混匀3min，取正庚烷层(1．8ml)，加lOul盐酸65cc超声混匀3min，漩涡2min，氮吹近干。用1ml流动相定容。65℃水浴超声3min漩涡2min彻底解析出尼古丁．进样5ul测定，根据尼古丁工作曲线的回归方程计算膜上的尼古丁含量。采样放置某办公室4d，取回采样器测定样品结果。 结果 l尼古丁标准曲线 做得的曲线线性方程为y=0.0001932x—O.03952，线性相关系数r=0．99993。 2尼古丁工作曲线 做得的曲线线性方程为y=16．36×10-4x-0．1492，线性相关系数r=0．9995