茶叶中茶氨酸检测方案

Suruit 浙江省杭州市东冠路611号金盛科技园3号楼5-6楼网址： www.surwit.com www.hplc.com.cn 应用方案 赛智科技(杭州)有限公司 茶叶中茶氨酸的高效液相色谱检测方案 技术服务部-董 茶氨酸 (L-Theanine)是茶叶中特有的游离氨基酸，茶氨酸是谷氨酸Y-乙基酰胺，有甜味。茶氨酸含量因茶的品种、部位而变动。茶氨酸在干茶中占重量的1%-2%。茶氨酸在化学构造上与脑内活性物质谷酰胺、谷氨酸相似，是茶叶中生津润甜的主要成份。茶氨酸含量约为新茶的1~2%左右，其含量随发酵过程减少。 图为茶氨酸分子式 【茶氨酸的作用】 对中枢神经影响：茶氨酸可以明显促进脑中枢多巴胺(dopamine)释放，饮茶抗疲劳作用被认为在一定程度上来自这一效果 降压作用：茶氨酸对脑内中枢神经递质5-羟色胺分泌量具有调节作用 影响记忆：茶氨酸可以增强记忆能力，提高学习效率 健康食品：保健食品市场上多数是为成人防病或改善作用的品种。像茶氨酸这种既不具有催眠，又可以解消疲劳、降低血压和提高学习记忆能力的保健食品实为少见，引人注目。为此，茶氨酸曾在1998年德国召开的国际食品原料会上获得研究部门大奖。 鉴于茶氨酸在市场上的应用日趋增长，赛智科技参照 GB23193-2008， 利用 LC-10Tvp 高效液相色谱仪给出了茶氨酸的 HPLC 检测方案。 (本应用方案请勿转载，侵权必究) 1、仪器与试剂 1.1仪器、设备 LC-10Tvp 高效液相色谱仪 Vertex 色谱柱：250mm×4.6mm×5um 分析天平 振摇恒温水浴 离心机 C18固相萃柱 针头过滤器 微孔滤膜：0.45Hm 1.2试剂 茶氨酸标准品 邻苯二甲醛(OPA) 乙硫醇 硼酸 氢氧化钠 甲醇(色谱纯) 乙腈(色谱纯) 2、供试品溶液和对照品溶液的制备 对照品溶液的制备 取茶氨酸储备液(1mg/ml)适量，用水稀释成所需浓度。 赛智科技(杭州)有限公司 E-mail： surwit@hplc.com.cn 浙江省杭州市东冠路611号金盛科技园3号楼5-6楼 Tel： 0571-28021919 网址：www.surwit.com www.hplc.com.cn Fax： 0571-28021920 赛智科技(杭州)有限公司 供试品溶液的制备 1、样品前处理：茶叶样品经磨碎混匀后，准确称取0.5g(精确到0.001g)， 加水100ml， 在80℃振摇恒温水浴中浸提45min，冷却后将浸提液离心，过滤，上清液混匀待用。 2、净化：C18小柱活化：依次用5ml甲醇，5ml水加入到净化小柱中，将上述试液过固相萃取柱，在经过0.46um滤膜过滤到棕色试管中，待衍生用。 3、衍生：准确吸取茶氨酸标准使用液(或样品液)0.5ml 于棕色试管中，加入0.5ml0PA衍生试剂，反应2min 后，立即取10ml上机分析。 3、色谱条件 色谱柱： C18，4. 6 mmx250 mm， 粒度5 Hm 流动相：以20mmol/1 乙酸铵溶液为流动相A， 以20mmol/1乙酸铵溶液：甲醇：乙腈=1：2：2为流动相B， VA：VB=1：1波长：338mm 流速：1.0 mL/min 柱温：40℃ 4、测定法 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，测定，即得 5、谱图 图为茶氨酸加标曲线 更多检测方案请与赛智科技联系 全国服务热线：4000012010 公司总机：0571-28021919 技术服务热线：0571-28021930 官网： www.surwit. com 赛智科技(杭州)有限公司 E-mail： surwit@hplc.com.cn Tel： 0571-28021919 Fax： 0571-28021920