化学药中有效成分含量分析检测方案

北京鸿作盛威科技有限公司 希望能够给您提供更精确、更完美的解决方案 气相色谱对黑水缬草挥发油中乙酸龙脑酯的测定 摘要：乙酸龙脑酯是无色至淡黄色液体或者白色结晶固体，微溶于水，溶于乙醇，有清凉的松木香气，并有樟脑似的气息。乙酸龙脑酯天然存在于冷杉油以及一些松科植物精油中，通常以左旋体存在。 目的建立黑水缬草挥发油中乙酸龙脑酯的含量测定方法。方法采用气相色谱法，萘为内标物，DB-l7毛细管柱，载气为氦气，电子轰击（EI）离子源检测器。结果在该色谱条件下，乙酸龙脑酯在进样量0.1096～1.7536μg范围内呈良好线性关系，r=0.9996；乙酸龙脑酯的加样回收率为101.33％，RSD=1.79%。结论该法能准确测定黑水缬草挥发油中乙酸龙脑酯的含量。 黑水缬草为败酱科缬草属药用植物，具有安心神、祛风湿、行气血、止痛的功效，主治心神不安，心悸失眠，癫狂，脏躁，风湿痹痛，脘腹胀痛，痛经，经闭，跌打损伤［1～3］。挥发油成分是黑水缬草重要的药效物质基础，其中乙酸龙脑酯为缬草属植物挥发油中共有的特征性成分，具有镇静、镇痛、抗炎、止泻等药理作用［4～6］。王淑梅等［7］对复方缬草合剂中乙酸龙脑酯进行了定性鉴别。但关于缬草属植物挥发油中乙酸龙脑酯的含量测定方法未见报道，本实验采用气相色谱法建立了乙酸龙脑酯的含量测定方法，并对不同采收时期黑水缬草挥发油中乙酸龙脑酯含量进行测定。 1仪器与试药QP5050A型气质联用色谱仪（日本岛津公司）；AB-N电子分析天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）；微量移液器（大龙医疗设备有限公司）。 黑水缬草样品（采自黑龙江省大兴安岭呼玛地区，经都晓伟教授鉴定为正品）；乙酸龙脑酯对照品（中国药品生物制品检定所，批号110759-200303）；萘、甲醇为色谱纯。 2方法与结果2.1色谱条件DB-17石英毛细管柱（30m×0.25mm，0.25μm）；载气为高纯度氦气；流速20ml/min；柱前压63kPa；初始温度80℃（保持2min），以3℃/min的速率升至150℃（保持3min），接着以10℃/min的速率升至220℃（保持25min）；气化室温度180℃；电子轰击（EI）离子源检测器，电子能量70eV，加速电压0.8kPa；检测器温度250℃；分流比为20∶1；质量扫描范围50～500m/z；扫描速度0.5s/dec。 2.2试液的制备2.2.1对照品溶液的制备精密称取乙酸龙脑酯对照品适量，加甲醇制成2.1920mg/ml溶液。 2.2.2内标溶液的制备精密称取萘适量，加甲醇制成2.0077mg/ml溶液。 2.2.3供试品溶液的制备称取黑水缬草药材适量，按2005版《中国药典》附录XD挥发油测定法甲法提取挥发油，精密吸取黑水缬草挥发油0.1ml置于25ml容量瓶中，加入内标溶液5ml，用甲醇稀释至刻度，摇匀。 2.3线性关系考察精确吸取对照品溶液0.1，0.2，0.4，0.8，1.6ml，分别置于2ml容量瓶中，各加内标溶液0.4ml，用甲醇稀释至刻度。分别精密吸取1μl，注入气相色谱仪测定，由对照品进样量与对照品/内标峰面积之比值进行回归，得标准曲线:Y=0.4065X-0.0011，r=0.9996（n=5）。结果表明乙酸龙脑酯进样量在0.1096～1.7536μg范围内线性关系良好。 2.4精密度实验取线性实验项下第3点对照品溶液连续进样6次，计算对照品与内标峰面积之比的平均值为1.1543，RSD=0.69%。 2.5重现性实验对同一批样品从取样开始重复测5次，测定平均含量为0.1382g/ml，RSD=2.04％。 2.6稳定性实验精密吸取供试品溶液1μl，进样测定，记录样品与内标峰面积之比值，每隔1h测1次，6h内7次测定平均含量为0.1404g/ml，RSD=0.91％。 2.7加样回收率实验精密吸取已知含量的样品5份，各加入一定量的乙酸龙脑酯，测定并计算加样回收率。 2.8样品测定取黑水缬草不同采收时期样品5批，按供试品溶液制备项下平行制备5份样品溶液，每份样品进样1μl，测定乙酸龙脑酯含量。 3结论该方法采用萘为内标物，灵敏、准确、重现性好，能够准确测定黑水缬草挥发油中乙酸龙脑酯的含量，可用于黑水缬草药材的品质评价。 从样品测定结果可以看出，不同采收时期样品挥发油中乙酸龙脑酯含量略有差异，果熟期达到最高值，枯萎期含量有所下降。故若以乙酸龙脑酯含量为定量指标来评价黑水缬草挥发油，应以果熟期采收为最佳。