氨基酸基甲酸酯类农药由于用量少、杀虫药效快等优点而得到广泛应用。但是这类杀虫剂一量进入人体内,可生成具有致癌作用的亚硝酸化合物,故而氨基甲酸酯类农药并不是绝对安全的。鉴于此,农业部于2008年制定了新的《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测定》(NY/T 761-2008)。其中氨基甲酸酯类农药的检没种类增加到10种。
HPLC 柱后衍生方法测定10种氨基甲酸酯类农药 氨基甲酸酯类农药由于具有杀虫谱广,用量少、药效快等优点而得到广泛的应用。但是这类杀虫剂一旦进入人体内,可生成具有致癌作用的亚硝酸化合物,故而氨基甲酸酯类农药并不是绝对安全的。鉴于此,农业部于2008年制定了的新《蔬菜和水果中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯和氨基甲酸酯类农药多残留的测 实验部分 检测原理 采用高效液相色谱柱后衍生方法测定氨基甲酸酯类农药。样品经 ODS 柱分离后,氨基甲酸酯类化合物与氢氧化钠发生水解反应 试剂与仪器 标准品:准确称量单一标准品,使用甲醇配置成1000 mg/L 的标准溶液。取一定量单标配置成 10 mg/L 混标母液,然后逐级稀释成不同浓度的混标。母液保存于-28℃。 试剂:甲醇, HPLC 级;纯水, Milli-Q超纯水仪制备得到;;氢氧化钠, AR;硼酸,AR; 2-巯基丙酸和邻苯二甲醛(OPA),购自国药集团化学试剂有限公司;一级反应试剂:称取1.0g氢氧化钠,溶于 500mL水中; 二级衍生试剂:称取15mg邻苯二甲醛(OPA),溶于50mL甲醇中,得到A液;称取3.34g硼酸和 ( 色谱条件 ) 色谱柱: Shimadzu Shim-pack XR-ODS75mmL.×4.6mm I.D., 2.2um;流动相:A相一水,B相一甲醇;流速:1.0mL/min;柱温:42℃;进样量:5uL;波长: Ex=330nm,Em=465nm:一级反应温度100℃,流速0.5mL/min:二衍生温度50℃,流速0.5mL/min。梯度洗脱程序如表1所示: 定》(NY/T 761-2008)。其中氨基甲酸酯类农药的检测种类增加到10种。本文参考新标准,使用岛津快速色谱柱 shim-pack XR-ODS(3.0mmI.D.×75mmL. 2.2 um), 建立了针对10种氨基甲酸酯类农药的检测方法,供相关检测人员参考。 生成甲胺。甲胺与邻苯二甲醛(OPA)和2-巯基丙酸(MEPA)反应生成一种异吲哚产物,可用荧光检测器定量。 0.18g氢氧化钠,溶于400mL纯水中,得到B液;将A液和B液混合,过滤,脱气后加入11uL 2-巯基丙酸,混合,使用当天配制。所有试剂和样品需用 0.45um 以下滤膜过滤。 仪器: Shimadzu 氨基甲酸酯柱后衍生系统。具体配置为:输液泵 LC-20AD×2和LC-20AB,脱气机 DGU-20A5,自动进样器SIL-20A,,检测器RF-10AXL,柱温箱CTO-20A, 化学反应箱 CRB-6A,控制器CBM-20A,工作站LC-Solution。 Time B Conc. 0.00 8 5.00 8 6.00 35 11.00 45 15.00 80 16.00 80 16.01 8 18.00 Stop 表1梯度洗脱程序 实验方法 标准品用甲醇配制成50,100,200,500和1000ug/L 的溶液。采用5点外标法做校准曲 线;连续5针进样(250ug/L,5pL), 考察重现性。 ■ 结果与讨论 线性关系和最低检测浓度 标准品进样后谱图如图1所示。 图1 标准品进样图谱(1000ug/L) 1-涕灭威亚砜;2-涕灭威砜;3-灭多威;4-三羟基克百威;5-涕灭威;6-速灭威;7-克百威;8-甲萘威; 9-异丙威;10-仲丁威 图3 涕灭威砜的校准曲线 校准曲线相关系数R= 0.99998,检测限(S/N=3.3)为4.37ug/L,定量限(S/N=10)为 13.25pg/L。 标准品分别进样后得到的校准曲线如图2所示: 图2 涕灭威亚砜的校准曲线 图4 灭多威的校准曲线 校准曲线相关系数R=0.99998,检测限(S/N=3.3)为 3.49ug/L, 定量限(S/N=10)为 10.56ug/L。 校准曲线相关系数R=0.99998,检测限(S/N=3.3)为 3.97ug/L, 定量限(S/N=10)为12.04pg/L 图5 三羟基克百威的校准曲线 校准曲线相关系数R=0.99997,检测限(S/N=3.3)为 4.01ug/L, 定量限(S/N=10)为 12.15ug/L。 图6 涕灭威的校准曲线 校准曲线相关系数R=0.99998,检测限(S/N=3.3)为 4.59pg/L, 定量限(S/N=10)为 10.05ug/L。 图7 速灭威的校准曲线 校准曲线相关系数R=0.99997,检测限(S/N=3.3)为 3.84ug/L, 定量限(S/N=10)为 11.53ug/L。 图8 克百威的校准曲线 校准曲线相关系数R=0.99999,检测限(S/N=3.3)为4.80ug/L,定量限(S/N=10)为 14.53ug/L。 图9 甲萘威的校准曲线 校准曲线相关系数R=0.99999,检测限(S/N=3.3)为 4.54ug/L, 定量限(S/N=10)为 13.75ug/L 图10 异丙威的校准曲线 校准曲线相关系数R = 0.99998,检测限(S/N=3.3).为 5.14ug/L,定量限(S/N=10)为 15.56ug/L 图11 仲丁威的校准曲线 校准曲线相关系数R=0.99998,检测限(S/N=3.3)为 4.07ug/L, 定量限(S/N=10)为 12.34ug/Le 标准样品的检测限及定量限见表2.从表中可以看出其检测限低于 5.14ug/L, 质量限低于15.56ug/L。 表2 标准样品检测参考数据表 No Name RT(min) Area(uv.S) Det.Lim ug/L Quan. Lim.ug/L 1 涕灭威亚砜 4.043 1117029 3.49 10.56 2 涕灭威砜 4.0921 1026144 4.37 13.25 3 灭多威 6.434 1412322 3.97 12.04 4 三羟基克百威 8.088 726825 4.01 12.15 5 涕灭威 9.093 957020 4.59 10.05 6 速灭威 9.648 904271 3.84 11.53 7 克百威 10.899 758507 4.80 14.53 8 甲萘威 11.626 862561 4.54 13.75 9 异丙威 13.012 690233 5.14 15.56 10 仲丁威 14.309 766222 4.07 12.34 最低检测浓度下 (5ug/L)样品的谱图 见图12,进样体积为 5uL。 图12 标准品进样图谱(5ug/L) 1-涕灭威亚砜;2-涕灭威砜;3-灭多威;4-三羟基克百威;5-涕灭威;6-速灭威;7-克百威; 8-甲萘威;9-异丙威;10-仲丁威 表3 5针标准品(250ug/L)数据重现性 No. Name %RSD No. Name %RSD RT Area RT Area 1 涕灭威亚砜 0.083 0.172 6 速灭威 0.058 0.560 2 涕灭威砜 0.079 0.121 7 克百威 0.054 0.205 3 灭多威 0.099 0.230 8 甲萘威 0.055 0.257 4 三羟基克百威 0.060 0.225 9 异丙威 0.038 0.310 5 涕灭威 0.060 0.109 10 仲丁威 0.029 0.317 结论 本文使用快速液相 UFLC,配合岛津 shimpack XR-ODS 75mm L.x4.6mm I.D., 2.2pm快速分析色谱柱,参考农业部标准,并在此基础上建立了10种氨基甲酸酯类农药的检测方法。该方法得到的校准曲线线性良好,检测限 低于 5pg/L,定量限低于 16pg/L, 保留时间重复性低于0.1%,面积重复性低于0.6%。使用岛津快速分析色谱柱能够将检测时间至少缩短8分钟,即节省了时间又节省了测试成本。
还剩3页未读,是否继续阅读?
岛津企业管理(中国)有限公司为您提供《氨基甲酸酯类农药中氨基甲酸酯类农药成分含量检测方案(液相色谱仪)》,该方案主要用于杀虫剂中氨基甲酸酯类农药成分含量检测,参考标准--,《氨基甲酸酯类农药中氨基甲酸酯类农药成分含量检测方案(液相色谱仪)》用到的仪器有