“为了提高蛋白检测的灵敏度,研究者们都尝试将蛋白检测转换成核酸检测,然后利用众多的核酸检测信号放大方法来提高检测灵敏度。核酸酶是利用核酸检测各种靶标的有效工具,可以利用核酸酶的催化特性来放大响应信号,从而实现高灵敏度的检测。我们的研究利用Exo III 设计促进靶分子循环利用的策略,以实现对核酸靶标的信号放大和灵敏检测。相比其它核酸酶的利用,这种扩增策略很简单,只需要一种酶和一个发夹DNA 作为反应物来产生扩增的信号。重要的是,ExoIII 表现出与序列无关的活性,这体现出其与其他扩增策略中使用的内切酶的区别以及优势。将 Exo III 辅助信号放大与结合诱导的 DNA 组装相结合,则实现了Exo III 辅助信号放大作为通用型平台应用于蛋白质高灵敏检测。” 张华昌表示。张华昌师从岭南师范大学周国华副教授,上述研究已经发表在《Microchemical Journal》上。
岭南师范大学周国华团队将 Exo III 辅助信号放大与
结合诱导的 DNA 组装相结合,以实现高灵敏度的蛋
白质检测。两条独立的单链 DNA 在与同一靶标结合
后会杂交,并触发 Exo III 辅助的靶标循环扩增。该
策略可以实现所有蛋白质的均质检测,并讨论了检测
条件和性能。以人附睾蛋白4(HE4)为例,线性检
测范围为0.01~50 ng/mL,LOD 为3 pg/mL,可实
现快速检测。值得注意的是,长时间孵育可以获得
0.05~1 pg/mL 范围内的线性关系。该方法将对生命
科学研究、疾病诊断、治疗和预后产生积极影响。
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